微生物的诱发突变实验
实验方法原理 紫外线（UV）是一种最常用的物理诱变因素，它的主要作用是使 DNA 双链之间或同一条链上两个相邻的胸腺嘧啶形成二聚体，阻碍双链的分开、复制和碱基的正常配对，从而引起突变。紫外线照射引起的 DNA 损伤，可由光复活酶的作用进行修复，使胸腺嘧啶二聚体解开恢复原状。因此，为了避免光复活，用紫外线照射处理时以及处理后的操作应在红光下进行，并且将照射处理后的微生物放在暗处培养。实验材料 枯草芽孢杆菌 BF7658试剂、试剂盒 无菌生理盐水淀粉培养基碘液仪器、耗材 显微镜紫外线灯（15 W）磁力搅拌器玻璃涂棒血细胞计数板实验步骤 1. 菌悬液的制备1.1 取培养 48 h 生长丰满的枯草芽孢杆菌 BF7658 斜面 4～5 支。用 10 ml 左右的无菌生理盐水将菌苔洗下，倒入一支无菌大试管中，将试管在振荡混合器上振荡 30 s，以打散菌块。1.2 将上述菌液离心（3000 r/min，10 min）， 弃去上清液，用......阅读全文
微生物的诱发突变实验
实验方法原理 紫外线（UV）是一种最常用的物理诱变因素，它的主要作用是使 DNA 双链之间或同一条链上两个相邻的胸腺嘧啶形成二聚体，阻碍双链的分开、复制和碱基的正常配对，从而引起突变。紫外线照射引起的 DNA 损伤，可由光复活酶的作用进行修复，使胸腺嘧啶二聚体解开恢复原状。因此，为了避免光复
微生物的诱发突变实验_亚硝基胍法
实验方法原理亚硝基胍（NTG，N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍）是一种有效的化学诱变剂，在低致死率的情况下也有很强的诱变作用，故有超诱变剂之称。它的主要作用是引起 DNA 链中 GC→AT 的转换，亚硝基胍也是一种致癌因子，在操作中要特别小心，切勿与皮肤直接接触。凡有亚硝基胍的器皿，都要用
微生物的诱发突变实验_紫外线诱变法
实验方法原理紫外线（UV）是一种最常用的物理诱变因素，它的主要作用是使 DNA 双链之间或同一条链上两个相邻的胸腺嘧啶形成二聚体，阻碍双链的分开、复制和碱基的正常配对，从而引起突变。紫外线照射引起的 DNA 损伤，可由光复活酶的作用进行修复，使胸腺嘧啶二聚体解开恢复原状。因此，为了避免光复活，用紫外
突变“热点”揭示癌症诱发新因素
美国加州大学圣地亚哥分校的生物工程师们在最新研究中发现了癌症进化中一个此前未被认识到的关键角色：基因组某些区域发生的簇状突变。研究人员发现，“簇状体细胞突变”在大约10%的人身上诱发了癌症进展，了解它们可以预测患者的存活率。相关论文9日发表在《自然》网站上。簇状意味着它们在细胞基因组的特定区域聚集在
Nature：酒精竟会破坏干细胞DNA－诱发大量突变
都说“小酌怡情，大饮伤身”。在全球，饮酒与癌症病发以及死亡有着脱不开的干系。科学家们相信，这和酒精在人体内的代谢产物乙醛有关——这类物质会影响DNA，从而诱发突变。本研究的通讯作者Ketan Patel教授（图片来源：MRC Laboratory of Molecular Biology） 这
微生物突变的主要类型
为适应不断变化的外界环境，微生物的各种性状都可能发生突变。按突变体的表型特征不同，可将突变分为以下几种主要类型：形态突变型当外界环境条件改变时，微生物的形态很容易受其影响而发生突变。如炭疽杆菌在正常培养基中生长时，菌体粗大，两端平截或凹陷，排列似竹节状，但在含有低浓度青霉素的培养基中生长时，可发生形
DNA定点突变实验
DNA定点突变可用于：（1）研究蛋白质相互作用位点的结构、改造酶的不同活性或者动力学特性；（2）改造启动子或者DNA作用元件；（3）提高蛋白的抗原性或者是稳定性、活性、研究蛋白的晶体结构，以及药物研发、基因治疗等等方面。实验方法原理定点突变是指通过聚合酶链式反应（PCR）等方法向目的DNA片段（可以
DNA定点突变实验
实验方法原理 定点突变是指通过聚合酶链式反应（PCR）等方法向目的DNA片段（可以是基因组，也可以是质粒）中引入所需变化（通常是表征有利方向的变化），包括碱基的添加、删除、点突变等。单点突变的原理是从常规E.coli中经纯化试剂盒(Miniprep)或者氯化铯纯化抽提得到质粒。设计一对包含突变位点的
DNA定点突变实验
DNA定点突变实验 实验方法原理 定点突变是指通过聚合酶链式反应（PCR）等方法向目的DNA片段（可以是基因组，也可以是质粒）中引入所需变化（通常是表征有利方
肠道微生物能影响三聚氰胺诱发肾病
北卡罗莱纳大学的Wei Jia教授与英国伦敦帝国学院的Jeremy Nicholson教授研究小组合作进行了一项国际研究，研究显示，肠道内的微生物可影响三聚氰胺中毒引起的肾脏疾病的严重程度。2008年，近30万中国儿童因食用受三聚氰胺（故意添加以提高蛋白质含量）污染的奶粉引发肾脏疾病而住院。虽然已知
单一基因不仅和糖尿病有关，突变体还会诱发癌症！
最近，来自牛津大学和萨里大学的研究人员通过研究发现，单一基因的突变或许就能对人类机体的面部特征产生较大的影响，近年来科学家们进行了大量研究都发现单一基因在人类多种疾病的发生上扮演着关键角色，本文中，小编对相关研究进行了整理，分享给大家！ 【1】Science：单一基因或可驱动前列腺分化 do
快速－PCR－定点突变实验
实验方法原理 这种 PCR-SDM 方法的要点包括如下几个方面。1. 使用的模板浓度有所增加，这样就可以减少循环数，因此减少了非特异产物扩增的可能性。2. 加入了 Taq Extender, 扩增较长的 PCR 产物时产量和可靠性都有
快速－PCR－定点突变实验
试剂、试剂盒 ATPdNTP 溶液SDM 缓冲液Taq DNA 聚合酶克隆化的 Pfu DNA 聚合酶Taq Extender PCR 添加剂Dpn I 限制性内切酶T4 DNA 连接酶模板 DNAdsDNA 质粒LB 琼脂平板仪器、耗材 FALCON 2059 管子或替代物热循环仪水浴或适当的加热
快速－PCR－定点突变实验
这种 PCR-SDM 方法的要点包括如下几个方面。1. 使用的模板浓度有所增加，这样就可以减少循环数，因此减少了非特异产物扩增的可能性。2.加入了 Taq Extender, 扩增较长的 PCR 产物时产量和可靠性都有所提高。3. 使用 Dpm I 限制性内切酶，降低了母本分子的数量。4. 使用 P
快速－PCR－定点突变实验
这种 PCR-SDM 方法的要点包括如下几个方面。1. 使用的模板浓度有所增加，这样就可以减少循环数，因此减少了非特异产物扩增的可能性。2. 加入了 Taq Extender, 扩增较长的 PCR 产物时产量和可靠性都有所提高。3. 使用 Dpm I 限制性内切酶，降低了母本分子的数量。4. 使用
点突变不易扩增突变系统（简称ARMS)分析实验
实验材料 正常 ARMS 引物 突变 ARMS 引物共 同（普通）引物试剂、试剂盒 4dNTP10 X PCR 反应缓冲液已知基因型 DNA 模板轻矿物油Taq DNA 聚合酶loading缓冲液DNA 分子大小标记DNA 样本仪器、耗材 Perkin-Elmer Cetus thermal cyl
点突变不易扩增突变系统（简称ARMS)分析实验
实验材料正常 ARMS 引物突变 ARMS 引物共 同（普通）引物试剂、试剂盒4dNTP10 X PCR 反应缓冲液已知基因型 DNA 模板轻矿物油Taq DNA 聚合酶loading缓冲液DNA 分子大小标记DNA 样本仪器、耗材Perkin-Elmer Cetus thermal cyler (
引起微生物自发突变的因素有哪些？
①DNA复制遗传物质DNA在复制过程中，由于某些内在或外在的原因，引起核苷酸对掺入的错误，使子代DNA分子核苷酸次序产生变化，从而引起突变。与DNA复制有关的因子以及与复制正确性有关的因子，如果性质发生改变，就会引起自发突变，在特定环境中则表现出表型的改变。如在大肠杆菌和枯草杆菌中发现了由于DNA聚
Nature：科学家成功鉴别出诱发胶质母细胞瘤的原始突变
近日，一项刊登在国际杂志Nature上的研究报告中，来自韩国科学技术院的科学家们通过研究发现了诱发胶质母细胞瘤的突变位点，胶质母细胞瘤是一种恶性脑瘤，研究者指出，从肿瘤中分离出来的神经干细胞或许就是含有诱发胶质母细胞瘤驱动突变的关键细胞，相关研究结果或能帮助理解为何胶质母细胞瘤容易复发，即使进行
法科学实验称转基因玉米诱发肿瘤
2012年9月，法国科学家塞拉利尼在 《食品与化学毒理学》发表文章称，使用抗除草剂的NK603转基因玉米喂养的试验鼠出现高致癌率，试验老鼠身上乒乓球大小的肿瘤很快传遍世界，也登上了中国各大媒体网站的显著位置。 7月13日，塞拉利尼刚现身研讨会就引起媒体的关注。针对外界对小白鼠致癌试验的
地塞米松对蛋清诱发大鼠足跖肿的影响实验
实验方法原理 异体蛋白进入机体后可在短时间内引起组织的急性炎症反应，发生炎症的部位明显肿胀、体积增大。肾上腺皮质激素可通过多种方式明显抑制各种致炎因素引起的炎症，从而改善红、肿、热、痛等症状。本实验通过测定大鼠踝关节肿胀程度，观察炎症的发生及地塞米松的抗炎作用。实验材料 大鼠试剂、试剂盒 地塞米松磷
重大发现！肠道微生物或可诱发机体老化相关的炎症发生
随着年龄增长，机体炎症水平会不断增加，而且炎症也会成为老年人死亡的重要风险因子，但其背后的原因研究人员并不清楚；近日一项刊登在国际杂志Cell Host & Microbe上的研究报告中，来自麦克马斯特大学等机构的研究人员通过对小鼠进行研究发现，肠道微生物或许是机体老化相关炎症和过早死亡的罪魁祸
科学家鉴别出诱发遗传性胰腺癌风险的基因突变
近日，一项刊登在国际杂志Nature Genetics上的研究报告中，来自美国Dana-Farber癌症研究所等机构的研究人员通过对一组极易患癌的家庭进行研究的过程中鉴别出了一种罕见的遗传性基因突变，其或会明显增加个体在一生中患胰腺癌和其它癌症的风险。识别出这种此前未知的突变或能帮助研究人员对这
微生物学中核算突变率介绍
3个前提条件核算突变率须满足至少3个条件：（1）必须检查大的群体以增加估计的可靠性，即增加观察真实的突变率的机会。（2）搞清楚是小于核计的试验误差的回复突变率或正确测定的回复突变。（3）在发生突变的环境下，突变型和亲本型须同时存在，以便检查到每个突变细菌。4个步骤通常采用核计突变率的方法，包括下列4
常用痛行为学检测实验——触刺激诱发痛(allodynia)
实验方法原理机械触刺激诱发痛是指原先的非痛机械刺激，如触摸、轻压等可引起明确的痛感或痛反应。实验材料实验动物实验步骤检测的容器与上述检测机械痛敏相同，只是需要制备一系列粗细或长短不等尼龙丝(von Frey hairs),分别校正引起细丝弯曲的压力强度。测试时，用细丝触压后肢足底部，由低强度开始，通
肿瘤动物模型建立实验——诱发性肿瘤动物模型
肿瘤动物模型的建立可应用于：（1）评价抗肿瘤免疫治疗的疗效；（2）作为抗肿瘤药物筛选模型；（3）为肿瘤转移研究提供更好的研究平台；（4）为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。实验方法原理诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。实验材料肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒无
Wolfram综合征致病基因WFS1突变诱发糖尿病的潜在分子机制
Wolfram 综合征（Wolfram syndrome/WS）是较为罕见的常染色体隐性遗传性疾病，该疾病的临床症状表现为糖尿病、视神经萎缩、神经性耳聋和尿崩症等，糖尿病是其首发症状。Wolfram综合征主要由WFS1基因突变引起，目前已鉴定到100多个WFS1基因的错义突变位点与Wolfram
科学家发现影响免疫系统的基因突变或可诱发白血病
近日，来自英国伦敦癌症研究院(The Institute of Cancer Research)的研究人员通过研究发现，遗传了能够影响机体免疫系统功能的基因突变的个体或患最常见白血病的风险较高，相关研究刊登于国际杂志Nature Communications上；文章中研究人员将个体患慢性淋巴细胞
Wolfram综合征致病基因WFS1突变诱发糖尿病的潜在分子机制
Wolfram 综合征（Wolfram syndrome/WS）是较为罕见的常染色体隐性遗传性疾病，该疾病的临床症状表现为糖尿病、视神经萎缩、神经性耳聋和尿崩症等，糖尿病是其首发症状。Wolfram综合征主要由WFS1基因突变引起，目前已鉴定到100多个WFS1基因的错义突变位点与Wolfram综合
揭示Wolfram综合征致病基因WFS1突变诱发糖尿病的分子机制
Wolfram 综合征（Wolfram syndrome/WS）是较为罕见的常染色体隐性遗传性疾病，该疾病的临床症状表现为糖尿病、视神经萎缩、神经性耳聋和尿崩症等，糖尿病是其首发症状。Wolfram综合征主要由WFS1基因突变引起，目前已鉴定到100多个WFS1基因的错义突变位点与Wolfram