实质等同性(转录组学)实验(五)

3.13 实时 RT- PCR 验证转录组数据有两种常用的基因(扩增子)定量检测方法:基因特异荧光探针(如 TaqMan chemistry) 或者特异双链 DNA 结合试剂(SYBR green chemistry ) [22]。我们通过实时 RT-PCR,选择 SYBR green chemistry 来验证 cDNA 芯片发现的 DEG 的表达。不同的基因设计特异引物(见注 32) 。3.13.1 实时 RT- PCR 反应的准备( 1 ) PCR 用可视化的 96 孔板在 ABIPRISMA 7500 Sequence Detection System 仪器上进行 ( Applied Biosystems, Foster City, CA,USA ) 。( 2 ) 总 RNA ( 2 μg 脱氧......阅读全文

实质等同性(转录组学)实验(五)

3.13 实时 RT- PCR 验证转录组数据有两种常用的基因(扩增子)定量检测方法:基因特异荧光探针(如 TaqMan chemistry) 或者特异双链 DNA 结合试剂(SYBR green chemistry )  [22]。我们通过实时 RT-PCR,选择 SYBR green che

实质等同性(转录组学)实验

实验材料:小麦  试剂、试剂盒:β-巯基乙醇                                                                  氯仿                                                            

实质等同性(转录组学)实验

实验材料小麦试剂、试剂盒β-巯基乙醇氯仿异戊醇SSTE 缓冲液仪器、耗材SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验步骤3.1 芯片背景我们使用了 19846 个点,包含 9246 个 Unigene 序列的小麦 cDNA 芯片(http://www . cerealsdb. uk. net/index. htm

实质等同性(转录组学)实验(一)

实验材料 小麦试剂、试剂盒 β-巯基乙醇氯仿异戊醇SSTE 缓冲液仪器、耗材 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验步骤 3.1 芯片背景我们使用了 19846 个点,包含 9246 个 Unigene 序列的小麦 cDNA 芯片(http://www . cerealsdb. uk. net/index.

实质等同性(转录组学)实验2

3.9 芯片数据介绍对简单的实质等同性实验来说,一个比较转基因系与对照之间基因表达的散点图就已足够了。文献 [ 5 ] 中参与两个实验的样品都标注在图15. 2中。结果用 GeneSpring 软件包显示,绘制了每组比较小麦系之间每个基因成对的平均强度,并突出显示少数感兴趣的基因(统计上显著差异表达

实质等同性(转录组学)实验(三)

3.5 cDNA 合成( 1 ) 加 100 μg DNA 酶处理过的总 RNA ( 不超过 20 μl) 、8 μl oligo  (dT)23 锚定引物和无核酸酶水至终体积 28 μl。( 2 ) 将启动反应混合物在 70℃ 孵育 10 min,置于冰上 5 min。( 3 ) 向启动反应混合物

实质等同性(转录组学)实验(二)

3.4 RNA 提取3.4.1 小麦胚乳总 RNA 提取提取方法根据 Chang 等 [ 11 ] 改编而来。( 1 ) 用预冷的研钵和杵(-70°C ) 在液氮里将 2~3 g 组织磨成粉末(见注 8 ) 。( 2 ) 室温下迅速将磨碎组织转移到有 15 ml 提取缓冲液(加入 300 μl β-

实质等同性(转录组学)实验(四)

3.9 芯片数据介绍对简单的实质等同性实验来说,一个比较转基因系与对照之间基因表达的散点图就已足够了。文献 [ 5 ] 中参与两个实验的样品都标注在图15. 2中。结果用 GeneSpring 软件包显示,绘制了每组比较小麦系之间每个基因成对的平均强度,并突出显示少数感兴趣的基因(统计上显著

实质等同性(代谢组学)实验

实验材料SIMCA - P 多变量统计软件试剂、试剂盒[ 1H ] - NMR 抽提剂仪器、耗材Eppendorf 聚丙稀管NMR 管NMR 波谱仪实验步骤本章描述的方法最适合于分析小麦精白面,但改进后也适用于全面粉、麦麸或其他组织,如叶和根。在开展实质等同性代谢组学实验前,如其他任何田间试验或温室

实质等同性(代谢组学)实验

实验材料:SIMCA - P 多变量统计软件    试剂、试剂盒:[ 1H ] - NMR 抽提剂      仪器、耗材:Eppendorf 聚丙稀管                                                                  NMR 管    

实质等同性(代谢组学)实验

实验材料 SIMCA - P 多变量统计软件试剂、试剂盒 [ 1H ] - NMR 抽提剂仪器、耗材 Eppendorf 聚丙稀管NMR 管NMR 波谱仪实验步骤 本章描述的方法最适合于分析小麦精白面,但改进后也适用于全面粉、麦麸或其他组织,如叶和根。在开展实质等同性代谢组学实验前,如其他任何田间试

实质等同性(蛋白质组学)实验

实验材料ESI-MSMALDI - MS试剂、试剂盒提取缓冲液仪器、耗材SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验步骤众所周知,在实验室内和实验室间难以保证双向聚丙烯酰胺凝胶电泳的重复性。在我们实验室,强制性地要求严格遵守标准操作程序(sop ) , 以确保不同的操作者可以获得可重复的分离结果。小麦白面粉样品

实质等同性(蛋白质组学)实验

实验材料ESI-MSMALDI - MS试剂、试剂盒提取缓冲液仪器、耗材SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验步骤众所周知,在实验室内和实验室间难以保证双向聚丙烯酰胺凝胶电泳的重复性。在我们实验室,强制性地要求严格遵守标准操作程序(sop ) , 以确保不同的操作者可以获得可重复的分离结果。小麦白面粉样品

实质等同性(蛋白质组学)实验

实验材料:ESI-MS                                                                  MALDI - MS  试剂、试剂盒:提取缓冲液仪器、耗材:SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳        实验步骤:众所周知,在实验室内和实验室间难

实质等同性(蛋白质组学)实验(一)

实验材料 ESI-MSMALDI - MS试剂、试剂盒 提取缓冲液仪器、耗材 SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳实验步骤 众所周知,在实验室内和实验室间难以保证双向聚丙烯酰胺凝胶电泳的重复性。在我们实验室,强制性地要求严格遵守标准操作程序(sop ) , 以确保不同的操作者可以获得可重复的分离结果。小

实质等同性(蛋白质组学)实验(三)

3.4 凝胶染色为了用蛋白质组学研究 2D 胶上蛋白点,染色必须与质谱分析兼容,且灵敏度越高越 好。符合这些标准的染色法有好几种可供使用,包括胶体考染、某些银染和各种荧光染剂,如 Sypro  Ruby、Orange、Deep  Purple 和 Flamingo。胶体考染灵敏性不如银染和荧

实质等同性(蛋白质组学)实验(二)

3.2 等电聚焦(IEF)各种长度(如 7 cm、13 cm、18 cm、24 cm ) 和不同 pH 范围的固定化 pH 梯度 ( IPG ) 胶条可供使用。IPG 胶条常在 20℃ 下(温度低于 20℃ 可导致尿素结晶)于适量水化液中水化过夜(16 h ) 。这可在溶胀托盘 ( re-s

实质等同性的概念

中文名称实质等同性英文名称substantial equivalence定  义系联合国经济和合作组织(OECD)于1993年提出的对新食物进行安全性评估的原则。根据该原则,若一种生物工程食物或食物成分与其相应的传统食物或食物成分基本相同,则可以认为具有相同的安全性。这一种基于比较的指导原则已被许多

关于实质等同性的基本信息介绍

  生物安全的危险度评估和安全性评价表明,安全是生物技术中的核心问题,是发展生物技术的底线,但是安全问题本身也是抽象的,是动态的,其安全性标准不是绝对的和等同划一的。风险预防的目的在于在保障安全的基础上实现生物技术的良性健康发展,其含义有二,一是生物安全立法的目的不在于遏制生物技术的发展,而是推动生

转录物组学的定义

中文名称转录物组学英文名称transcriptomics定  义研究基因组转录产生的全部转录物的种类、结构和功能的学科。应用学科遗传学(一级学科),总论(二级学科)

转录物组学的定义

中文名称转录物组学英文名称transcriptomics定  义研究基因组转录产生的全部转录物的种类、结构和功能的学科。应用学科遗传学(一级学科),总论(二级学科)

与转录组学和蛋白组学比较,代谢组学有何优点

那年夏天Forever与转录组学和蛋白组学比较,代谢组学有以下优点:①代谢组学放大了基因和蛋白表达的微小变化,从而使检测更容易;②代谢组学的研究不需建立全基因组测序及大量表达序列 标签(EST)的数据库,且代谢产物的种类要远小于基因和蛋白的数目.③ 由于给定的代谢产物在每个组织中都是一样的,所以研究

空间转录组学研究案例简析

01空间转录组研究解析前列腺癌异质性特征[1]影响因子:11.878发表时间:2018.06发表期刊:Nat Commun肿瘤内异质性是当今癌症治疗中最大的挑战之一。在这里,研究人员使用空间转录组学(ST)技术研究整个多灶性前列腺癌的全组织基因表达异质性。利用一种新的去卷积方法,分析12个区域的近6

转录组学新技术揭露细胞何时崩溃

  买房关键看位置,细胞在人体内也有类似的生存法则。3月,来自美国得克萨斯大学的癌症研究者在一场报告会上介绍了团队新成果:在肿瘤细胞周围,那些表面看似无恙的细胞,内部已有变化——它们比正常组织表现的更像肿瘤,且更易扩散。  据《科学》报道,这项成果的关键是空间转录组学技术,该技术能帮助研究者定位细胞

Gotham成立-表观转录组学进入转化阶段

  10月11日,纽约的Gotham Therapeutics获得5400万美元A轮投资,正式挂牌成立。Gotham的技术平台是表观转录组学(epitranscriptomics)、即调控RNA的化学修饰。Gotham主要关注一种叫做m6A(6-甲基腺苷)的常见mRNA修饰,这个修饰在RNA代谢中起

前沿:空间转录组学研究案例简析

  上一期,我们介绍了空间转录组测序产品,对于它的优势和特点进行了总结。这么一款优秀产品,用起来到底好不好使呢?我们从现有在疾病研究中发表文章略窥一二。   01空间转录组研究解析前列腺癌异质性特征[1]   影响因子:11.878   发表时间:2018.06   发表期刊:Nat

前沿:空间转录组学研究案例简析

  上一期,我们介绍了空间转录组测序产品,对于它的优势和特点进行了总结。这么一款优秀产品,用起来到底好不好使呢?我们从现有在疾病研究中发表文章略窥一二。   01空间转录组研究解析前列腺癌异质性特征[1]   影响因子:11.878   发表时间:2018.06   发表期刊:Nat C

2018年新技术:空间转录组学技术

  ——也许不久的将来,定位组织中的基因表达就会成为一种常规技术了。  对于基因表达研究来说,空间一直都是具有挑战性的前沿研究领域。但是随着越来越多的研究人员获得了技术进展,这已经不再是令人望而生畏的领域了。这些方法的多样性和创造性使其成为一个值得关注的技术方向。  空间基因表达对于理解组织中细胞的

蛋白质组学不能被基因组和转录组取代

基因和蛋白并不存在严格的线性关系ORF并不预示一定存在相应的功能性基因mRNA水平并非与蛋白质的表达水平对应翻译后修饰及同工蛋白质(isforms)等现象在基因水平无从表现

采用生物信息学和实验方法联合分析转录组信息

The wealth of transcript information that has been made publicly available in recent years requires the development of high-throughput functional geno