液相色谱仪图谱常见问题原因及解决方案
液相色谱系统的许多问题都可以在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键所在。 A、峰拖尾原因解决办法1、筛板阻塞a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱2、色谱柱塌陷填充色谱柱3、干扰峰a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱4、流动相PH选择错误a、调整PH值。对于碱性化合物,低PH值b、更有利于得到对称峰。5、样品与填料表面的溶化点发生反应a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂 b、更改色谱柱 B、峰前延原因解决办法1、柱温低升高柱温2、样品溶剂选择不恰当使用流动相作为样品溶剂3、样品过载降低样品含量4、色谱柱损坏见A1、A2C、峰分叉原因解决办法1、保护柱或分析柱污染取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞,拆下来清......阅读全文
液相色谱仪图谱常见问题原因及解决方案
液相色谱系统的许多问题都可以在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键所在。 A、峰拖尾原因解决办法1、筛板阻塞a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱2、色谱柱塌陷填充色谱柱3
液相色谱仪图谱常见问题原因和解决方案
1、峰拖尾原因解决办法1、筛板阻塞a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱2、色谱柱塌陷填充色谱柱3、干扰峰a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱4、流动相PH选择错误a、调整PH值。对于碱性化合物,低PH值b、更有利于得到对称峰。5、样品与填料表面的溶化点发生反应a、加入离
液相色谱仪图谱拖尾峰严重的原因及解决方案
K’增加时,脱尾更严重原因解决办法1、二级保留效应,反相模式a、加入三乙胺(或碱性样品)b、加入乙酸(或酸性样品)c、加入盐或缓冲剂(或离子化样品)d、更换一支柱子2、二级保留效应,正相模式a、加入三乙胺(或碱性样品)b、加入乙酸(或酸性样品)c、加入水(或多官能团化合物)d、试用另一种方法3、二级
液相色谱仪图谱出现峰变形的原因及解决方案
峰变形原因解决办法1、样品过载减少样品载量
液相色谱仪图谱出现峰分叉的原因及解决方案
峰分叉原因解决办法1、保护柱或分析柱污染取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞,拆下来清洗。如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用适当的再生措施。如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。2、样品溶剂不溶于流动相改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂
液相色谱仪图谱出现峰前延的原因及解决方案
峰前延原因解决办法1、柱温低升高柱温2、样品溶剂选择不恰当使用流动相作为样品溶剂3、样品过载降低样品含量4、色谱柱损坏见A1、A2
液相色谱仪图谱出现峰拖尾的原因及解决方案
峰拖尾原因解决办法1、筛板阻塞a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱2、色谱柱塌陷填充色谱柱3、干扰峰a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱4、流动相PH选择错误a、调整PH值。对于碱性化合物,低PH值b、更有利于得到对称峰。5、样品与填料表面的溶化点发生反应a、加入离子对
液相色谱仪图谱出现早出的峰变形的原因及解决方案
早出的峰变形原因解决办法1、样品溶剂选择不恰当a、减少进样体积b、运用低极性样品溶剂
液相色谱仪图谱峰拖尾程度大于晚出峰的原因及解决方案
早出的峰拖尾程度大于晚出的峰原因解决办法1、柱外效应a、调整系统连接(使用更短、内径更小的管路)b、使用小体积的流通池
液相色谱仪图谱宽峰的原因及处理办法
宽峰原因解决办法1、流动相组成变化重新制备新的流动相2、流动相流速太低调节流速3、漏液(特别是在柱子和检测器之间)见section 3。检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪音。如果必要更换密封。4、检测器设定不正确调整设定5、柱外效应影响a、柱子过载b、检测器对反应时间或池体积响
液相色谱仪图谱基线漂移的原因及处理办法
基线漂移原因解决办法1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。)控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。)使用HPLC级的溶剂,高纯度
液相色谱仪图谱分离度降低的原因及处理办法
分离度降低原因解决办法1、流动相污染或变质(引起保留时间变化)重新配置流动相2、保护柱或分析柱阻塞去掉保护柱进行分析。如果必要则更换保护柱。如果分析柱阻塞,可进行反冲。如果问题仍然存在色谱柱可能被强保留的污染物损坏,建议使用恰当的再生程序。如果问题仍然存在,进口可能阻塞了,更换入口处的筛板或更换色谱
细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案
细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案 培养基pH值变化迅速 培养箱CO2分压设置错误---根据培养基中NaHCO3的浓度增大或降低培养箱CO2的分压,NaHCO3浓度为2.0-3.7g/L时,应相应地使用5%-10%的CO2分压 细胞培养瓶瓶盖过紧---将瓶盖旋松1/4
细胞培养常见问题及可能原因的建议解决方案
培养基pH值变化迅速培养箱CO2分压设置错误---根据培养基中NaHCO3的浓度增大或降低培养箱CO2的分压,NaHCO3浓度为2.0-3.7g/L时,应相应地使用5%-10%的CO2分压细胞培养瓶瓶盖过紧---将瓶盖旋松1/4圈碳酸氢盐缓存系统缓冲能力不足---加入HEPES缓冲液,使其终浓度为1
液相色谱仪图谱基线噪音(规则的)的原因及处理办法
基线噪音(规则的)原因解决办法1、在流动相、检测器或泵中有空气流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。2、漏液见第三部分。检查管路接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换泵密封。3、流动相混合不完全用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂4、温度影响(柱温过高,检测器未
液相色谱仪图谱保留时间不断变化的原因及处理办法
保留时间不断变化原因解决办法1、流速变化重新设定流速2、泵中有气泡从泵中除去气泡3、流动相选择不恰当a、更换合适的流动相b、选择合适的混合流动相
液相色谱仪图谱额外的峰的原因
原因解决办法1、样品中有其他组份正常2、前一次进样的洗脱峰a、增加运行时间或梯度斜率b、提高流速3、空位或鬼峰a、检查流动相是否纯净b、使用流动相作为样品溶剂c、减少进样体积
液相色谱仪图谱保留时间波动的原因
保留时间波动原因解决办法1、温控不当调好柱温2、流动相组分变化防止变化(蒸发、反应等)3、色谱柱没有平衡在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱
液相色谱仪图谱基线噪音(不规则的)的原因及处理办法
基线噪音(不规则的)原因解决办法1、漏液见第三部分。检查接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换密封。检查流通池是否漏液。2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成检查流动相的组成。3、流动相各溶剂不相溶选择互溶的流动相4、检测器/记录仪电子元件的问题断开检测器和记录仪的电源,
PCR实验常见问题、原因分析及其解决方案
PCR产物的电泳检测时间,一般为48h以内,有些最好于当日进行检查,大于48h后带型不规则甚至消失。但有时仍会与到这样那样的问题,影响检测结果的判断,具体归类为以下常见的4点,描述如下:问题一:无扩增产物现象:正对照有条带,而样品则无。原因:1、模板:含有抑制物,含量低。2、Buffer对样品不合适
ELISA常见问题及解决方案
一.背景高或者非特异性染色 原因 解决方案 抗体的非特异性结合 更换封闭液(例如,使用酪蛋白替代BSA);封闭结束后不要清洗;倒出封闭液,吸水纸上吸干残留液体后直接进行下一步。 未充分清洗酶标板 确保在清洗过程中每个微孔都充满缓冲液、清洗仪器正常工作。各步
PCR常见问题及解决方案
PCR常见问题及解决方案 1没有扩展条带 可能的原因及对应的解决方案如下: 酶失活或在反应体系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。 模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸,造成DNA脱嘌呤而影响PCR
ICP常见问题及解决方案
1、Q射频发生器的频率有40.68和27.12MHz两种哪中更好?A单就两种频率本身来说,都可以满足作为热源的需要,但是由于所谓趋肤效应的存在,频率越高趋肤效应越大,这样有两个好处:等离子体厚度小,光强会更大;中心孔道大,样品对等离子体的影响小(等离子体也是电导体),不容易导致灭火,尤其切换到高盐、
ELISA常见问题及解决方案
一.背景高或者非特异性染色 原因解决方案抗体的非特异性结合更换封闭液(例如,使用酪蛋白替代BSA);封闭结束后不要清洗;倒出封闭液,吸水纸上吸干残留液体后直接进行下一步。未充分清洗酶标板确保在清洗过程中每个微孔都充满缓冲液、清洗仪器正常工作。各步骤之间清洗3~5次,不要增加清洗次数。清洗完成后,将
ELISA常见问题及解决方案
一.背景高或者非特异性染色 原因 解决方案 抗体的非特异性结合 更换封闭液(例如,使用酪蛋白替代BSA);封闭结束后不要清洗;倒出封闭液,吸水纸上吸干残留液体后直接进行下一步。 未充分清洗酶标板 确保在清洗过程中每个微孔都充满缓冲液、清洗仪器正常工作。各步
液相色谱仪图谱所有的峰面积都太小的原因及处理办法
所有的峰面积都太小原因解决办法1、检测器衰减设定过高减少衰减的设定2、检测器时间常数设定太大设定较小的时间常数3、进样量太少增大进样量4、记录仪连接不当使用正确的连接
液相色谱仪图谱所有的峰面积都太大的原因及处理办法
所有的峰面积都太大原因解决办法1、检测器衰减设定过低采取较大的衰减2、进样过多减少进样量3、记录仪连接不正确正确连接记录仪
荧光定量pcr常见问题的原因与解决方案
1.扩增产物大小不合适:实时荧光定量PCR扩增片段的长度通常在80-150 bp之间,如果调整反应的时间有可能扩增500bp的片段。 2.PCR反应过程中退火及延伸的时间过短或过长:应根据扩增片段的大小予与调整。 3.MgCl,浓度不合适:按0. 5mm的间距调整MgCI2的浓度。
ELISA实验常见问题及解决方案
指南。以下是影响ELISA检测的关键因素,也是众多ELISA 用户在实验中经常遇到的问题及解决方案,希望能对您的ELISA检测有帮助:为什么所有试剂和检测样本要平衡至室温后再进行加样操作? 温度是ELISA结合反应的重要影响因素。为了使所有样本在一致的温度下反应,实验前务必将所有试剂平衡至室温,包
TA克隆常见问题及解决方案
TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)把PCR片断与一个具有3-T突出的载体DNA连接起来的方法。因为PCR反应中所适用的聚合酶具有末端转移的活性,通常在3加上A。例如:Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,PCR反应时在每条PCR扩增产物的3端自动添加一个3-A突