支原体的扫描电镜检测
1、原理利用电子显微镜的超级放大功能，可直接观察培养细胞中支原体污染情况。2、操怍方法①细胞传代至贴有盖玻片的平皿中；②培养24h取出；③PSB洗涤；④2.5%戊二醛/ PSB固定15min，PSB洗涤；⑤1%锇酸固定30min，PSB洗涤；⑥乙酸异戊酯脱水；⑦冰点干燥；⑧喷金；⑨扫描电镜观察，照相综上所述，几种不同的方法各有特点，其应用也各有侧重。①支原体培养法是最为经济和可靠的方法，但其实验周期较长，所以常用于进行对怀疑细胞的最后甄别。②DNA染色法较为快捷，方法简单，但其灵敏度有一定欠缺，易造成漏检。③PCR检测支原体的方法最为快速、灵敏，取样量少，既可进行细胞检测也可进行细胞上清的检测，同时可以检测8种支原体的污染，是目前常用的检测手段。但其成本较高，条件要求严格，有时易出现假阳性。其弥补的方法是对怀疑的样品经过3次PCR检测，或用培养法检测。④电镜法非常直观、准确，但对使用环境要求高，操作复杂，实验周期较长，常作为样品......阅读全文
支原体的扫描电镜检测
1、原理利用电子显微镜的超级放大功能，可直接观察培养细胞中支原体污染情况。2、操怍方法①细胞传代至贴有盖玻片的平皿中；②培养24h取出；③PSB洗涤；④2.5%戊二醛/ PSB固定15min，PSB洗涤；⑤1%锇酸固定30min，PSB洗涤；⑥乙酸异戊酯脱水；⑦冰点干燥；⑧喷金；⑨扫描电镜观察，照相
支原体的检测
实验材料 细胞仪器、耗材 培养瓶载物片盖片显微镜实验步骤 1. 标本制备用尖镊子从培养瓶中直接取出预先置入的支持物（长形盖片；24 小时前置入），令细胞面向上，置放在载物片上，再覆以24 mmX 36 mm的较大盖片；如不用支持物培养法，也可取少许培养液滴在载物片上，再覆以盖片法观察亦可。2.
支原体的检测实验
相差显微镜检测法 低涨处理地衣红染色观察法 荧光染色法 电镜检测法 培养检测法 实验材料 细胞
荧光检测支原体
实验方法原理在无抗生素情况下，至少将细胞培养一周，将培养上清转移至处于对数生长早期的指示细胞中，孵育 3~5d ，将细胞固定和染色，寻找细胞核之外的荧光。实验材料来自于7天单层培养的无抗生素的细胞培养上清液或经离心后的上清液指示细胞试剂、试剂盒Hoechst 33258 染料BSS-PRD-PBSA
荧光检测支原体
实验方法原理在无抗生素情况下，至少将细胞培养一周，将培养上清转移至处于对数生长早期的指示细胞中，孵育 3~5d ，将细胞固定和染色，寻找细胞核之外的荧光。实验材料来自于7天单层培养的无抗生素的细胞培养上清液或经离心后的上清液
支原体的检测实验_电镜检测法
实验方法原理在用一般方法难以确定时，可做电镜检测。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1. 细胞培养 48～72 小时。2. 接近汇合前，用0.05%～0.25%胰蛋白酶消化细胞5～10 分钟。3. 用吸管轻轻吹打，制备成细胞悬液。
支原体的检测实验_培养检测法
实验方法原理这是用支原体培养基方法进行检测，培养法稍显繁锁，但比较精确。实验材料肉汤血清试剂、试剂盒细胞悬液仪器、耗材培养基实验步骤1. 肉汤制备用支原体肉汤（Sigma 产）和北京生物制品所制两种均可；用前加10%马血清；2. 培养每45 ml肉汤培养基加2.5×106 /ml细胞悬液5 ml
PCR法检测支原体
实验方法原理PCR法的基本原理是酶促DNA合成反应，即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下，经DNA聚合酶的作用，使DNA链扩增延伸。实验材料细胞样品试剂、试剂盒dNTPTapDNA聚合酶琼脂糖矿物油支原体检测试剂盒仪器、耗材超净工作台PCR仪电泳仪凝胶成像分析系统台式离心机旋涡混悬器实验步骤1.
支原体常用检测方法
支原体这种微小的微生物(直径0.2-0.8 µm)，是细胞培养中令人头疼的大问题。支原体污染可能来自培养基、血清或实验操作者，会影响细胞生长率、细胞形态、基因表达、细胞代谢和细胞活力。支原体感染不易察觉，因此对培养细胞定期进行支原体检测就非常重要。 污染实验室培养细胞的支原体
PCR法检测支原体
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术，其基本原理是酶促DNA合成反应，即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下，经DNA聚合酶的作用，使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点，但其对实验环境的要求严格，实验成本较高，有时还有假阳性的现象出现。1、仪器设
PCR法检测支原体
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术，其基本原理是酶促DNA合成反应，即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下，经DNA聚合酶的作用，使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点，但其对实验环境的要求严格，实验成本较高，有时还有假阳性的现象出现。1、仪
培养法检测支原体
培养法最为可靠且成本低廉，但培养周期较长。常用于细胞以及I临床治疗细胞的支原体检查。1、所需仪器设备及培养基（1）仪器设备：培养箱，显微镜。（2）培养基①支原体肉汤培养基。②精氨酸肉汤培养基。③支原体琼脂培养基。2、检查方法（1）样品的贮存：样品如在24h以内进行支原体检测，则可贮存在2—8℃；如果
支原体污染及检测
（1）支原体污染在细胞培养中最常见、不易被查觉，但支原体污染可显著影响细胞功能干扰实验结果。支原体是介于细菌和病毒之间的目前所知能独立生活的最小微生物，它无细胞壁，形态呈高度多形性，最小直径0.2um，可通过滤器。 目前通过对国内100余株/系细胞的检测，形势不容乐观。污染率达30% ~ 60% 。
细胞支原体污染的PCR检测
支原体菌株来源： M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原体 M.FermentaneATCC19989发酵支原体 M.SalivariumATCC23064唾液支原体 M.HominisATCC23114人型支原体 M.Ora
细胞支原体污染的PCR检测
支原体菌株来源：M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原体M.FermentaneATCC19989 发酵支原体M.SalivariumATCC23064唾液支原体M.HominisATCC23114人型支原体M.OraleATCC23714口腔支原体M.HyorhinisATCC290
肺炎支原体lgM检测
实验方法原理肺炎支原体快速检测卡可检测血清中的肺炎支原体lgM抗体。患者的血清样品分别加入两个测试孔内，当样品沿膜扩散时，分别加入3滴抗人lgM碱性磷酸酶复合物、3滴洗液和2滴底物，5分钟后观察结果。质控孔为质量控制，固定有人lgM，测试孔固定有肺炎支原体抗原。阳性反应结果为蓝色，阴性结果为无色。实
肺炎支原体lgM检测
【原理】 肺炎支原体快速检测卡可检测血清中的肺炎支原体lgM抗体。患者的血清样品分别加入两个测试孔内，当样品沿膜扩散时，分别加入3滴抗人lgM碱性磷酸酶复合物、3滴洗液和2滴底物，5分钟后观察结果。质控孔为质量控制，固定有人lgM，测试孔固定有肺炎支原体抗原。阳性反应结果为蓝色，阴性结果为无色。【材
支原体检测的临床意义
检查人体否受到支原体的感染是为临床诊断与治疗支原体感染患者提供依据的一种检查方法。诊断支原体感染必需经过实验室检查，不能仅仅根据症状就作出诊断。 阳性，见于支原体感染。肺炎支原体是呼吸道感染、肺炎的主要原因。解脲支原体、人型支原体则引起泌尿生殖道感染。
细胞支原体污染的荧光检测方法
DNA荧光染色法：1.原理：利用荧光染剂（bisbenzimide, Hoechst 33258）侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域，因为支原体之DNA中A-T含量占多数（55～80%），所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染
应对破坏细胞的支原体~qPCR支原体检测试剂来帮你
织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染；严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。德国MB公司qPCR支原体检测试，该
ELISA法检测肺炎支原体
ELISA法检测肺炎支原体 肺炎支原体可引起支原体肺炎，曾被称为“非典型肺炎”。支原体肺炎通常起病缓慢，病情严重，体征轻微，肺炎常为间质性。此外，肺炎支原体与人脑组织有共同抗原，故亦可引起中枢神经系统症状。临床上一般通过检查肺炎支原体抗体IgG、IgM诊断支原体肺炎。 (一)肺炎支原体抗体I
细胞如何检测是否支原体污染？
我的细胞，居然背着我养“小三”！那“小三”，名叫 支 · 原 · 体 !!!因为这“小三”，我的细胞表现都变了！瞒我这么久，原来这些日子都是假的！就让BI带您来了解这位不速之客吧！全球实验室状况支原体流行中▲ 全球平均有约15~35%细胞实验室发生支原体污染（65~80%严重污染），超过一半实验室
细胞培养中支原体污染的检测
细胞培养中最令人头疼的问题之一是微生物的污染，而支原体的污染更给人一种看不见摸不着的感觉。长期以来，这个问题一直令细胞培养工作者困惑。在人们日常生活的工作环境中，支原体可以说无处不在，它可以通过人的毛发、口腔、穿着的衣服、动物的皮毛以及日常的细胞培养的操作环境造成对细胞污染。国内外研究表明造成细胞培
支原体污染细胞培养的检测方法
由于支原体种类不同，应采取不同的方法进行检测，常用的方法有如下几种。1、观察细胞的形态和生长特征支原体污染比较严重时可出现生长减慢，有的培养基pH明显变酸，并出现细胞病变，其病变特征与病毒感染相似，因此不能准确诊断。2、分离培养法大多数支原体可出现特有的典型菌落。该方法准确、可靠，但时间长，敏感性不
支原体的检测实验_荧光染色法
实验方法原理荧光显微镜检查法，荧光染料用 Hoechst 33258，它是一种能与DNA 特异结合的荧光染料。支原体内含有DNA，能着色，是现有检测法中最方便和最有效的一种。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks醋酸甲醇蒸馏水仪器、耗材盖片显微镜实验步骤1. 标本盖片培养细胞汇合前从瓶中取出（如细胞已
美国药典中的支原体检测
支原体是一类没有细胞壁，能够自我复制的，可以通过过滤器并能够通过人工培养增殖的原核微生物，其不能进行革兰氏染色，但染色时会留下菌落的印记。支原体是寄生虫和共生体，有些可能对多种动植物宿主致病。在人类中，支原体通常是表面寄生虫定植于呼吸道和泌尿道的上皮内壁，感染可能会持续很长时间，而不会引起明显的细胞
支原体的检测实验_相差显微镜检测法
实验材料细胞仪器、耗材培养瓶载物片盖片显微镜实验步骤1. 标本制备用尖镊子从培养瓶中直接取出预先置入的支持物（长形盖片；24 小时前置入），令细胞面向上，置放在载物片上，再覆以24 mmX 36 mm的较大盖片；如不用支持物培养法，也可取少许培养液滴在载物片上，再覆以盖片法观察亦可。2. 观察相
荧光显微镜检测支原体
实验方法原理 检测支原体有两种不同的策略：第一种方法将在下述方案中述及，利用对 DNA 染色的荧光染料 Hoechst 33258, 它对细胞核周围（在细胞表面或胞质中）的特殊物质进行染色，可显示支原体污染；第二种方法是利用 DNA 探针
荧光显微镜检测支原体
荧光显微镜检测支原体实验方法原理检测支原体有两种不同的策略：第一种方法将在下述方案中述及，利用对 DNA 染色的荧光染料 Hoechst 33258, 它对细胞核周围（在细胞表面或胞质中）的特殊物质进行染色，可显示支原体污染；第二种方法是利用 DNA 探针识别细胞提取物中的 DNA 支原体特
荧光显微镜检测支原体
实验方法原理检测支原体有两种不同的策略：第一种方法将在下述方案中述及，利用对 DNA 染色的荧光染料 Hoechst 33258, 它对细胞核周围（在细胞表面或胞质中）的特殊物质进行染色，可显示支原体污染；第二种方法是利用 DNA 探针识别细胞提取物中的 DNA 支原体特异序列，进行支原体污染的检测