支原体的检测实验_相差显微镜检测法
实验材料细胞仪器、耗材培养瓶载物片盖片显微镜实验步骤1. 标本制备用尖镊子从培养瓶中直接取出预先置入的支持物(长形盖片;24 小时前置入),令细胞面向上,置放在载物片上,再覆以24 mmX 36 mm的较大盖片;如不用支持物培养法,也可取少许培养液滴在载物片上,再覆以盖片法观察亦可。2. 观察相差显微镜油浸下观察,支原体呈暗色微小颗粒,有类似布朗运动的表现,多位于细胞表面和细胞之间。注意事项1. 支原体与细胞破碎后溢出的细胞内容物如线粒体等颇相似,应细加区别。......阅读全文
支原体的检测实验_相差显微镜检测法
实验材料细胞仪器、耗材培养瓶载物片盖片显微镜实验步骤1. 标本制备用尖镊子从培养瓶中直接取出预先置入的支持物(长形盖片;24 小时前置入),令细胞面向上,置放在载物片上,再覆以24 mmX 36 mm的较大盖片;如不用支持物培养法,也可取少许培养液滴在载物片上,再覆以盖片法观察亦可。2. 观察相
支原体的检测实验_电镜检测法
实验方法原理在用一般方法难以确定时,可做电镜检测。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1. 细胞培养 48~72 小时。2. 接近汇合前,用0.05%~0.25%胰蛋白酶消化细胞5~10 分钟。3. 用吸管轻轻吹打,制备成细胞悬液。
支原体的检测实验_培养检测法
实验方法原理这是用支原体培养基方法进行检测,培养法稍显繁锁,但比较精确。实验材料肉汤血清试剂、试剂盒细胞悬液仪器、耗材培养基实验步骤1. 肉汤制备用支原体肉汤(Sigma 产)和北京生物制品所制两种均可;用前加10%马血清;2. 培养每45 ml肉汤培养基加2.5×106 /ml细胞悬液5 ml
培养法检测支原体
培养法最为可靠且成本低廉,但培养周期较长。常用于细胞以及I临床治疗细胞的支原体检查。1、所需仪器设备及培养基(1)仪器设备:培养箱,显微镜。(2)培养基①支原体肉汤培养基。②精氨酸肉汤培养基。③支原体琼脂培养基。2、检查方法(1)样品的贮存:样品如在24h以内进行支原体检测,则可贮存在2—8℃;如果
PCR法检测支原体
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪
PCR法检测支原体
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪器设
PCR法检测支原体
实验方法原理PCR法的基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA链扩增延伸。实验材料细胞样品试剂、试剂盒dNTPTapDNA聚合酶琼脂糖矿物油支原体检测试剂盒仪器、耗材超净工作台PCR仪电泳仪凝胶成像分析系统台式离心机旋涡混悬器实验步骤1.
支原体的检测实验
相差显微镜检测法 低涨处理地衣红染色观察法 荧光染色法 电镜检测法 培养检测法 实验材料 细胞
ELISA法检测肺炎支原体
ELISA法检测肺炎支原体 肺炎支原体可引起支原体肺炎,曾被称为“非典型肺炎”。支原体肺炎通常起病缓慢,病情严重,体征轻微,肺炎常为间质性。此外,肺炎支原体与人脑组织有共同抗原,故亦可引起中枢神经系统症状。临床上一般通过检查肺炎支原体抗体IgG、IgM诊断支原体肺炎。 (一)肺炎支原体抗体I
支原体的检测
实验材料 细胞仪器、耗材 培养瓶载物片盖片显微镜实验步骤 1. 标本制备用尖镊子从培养瓶中直接取出预先置入的支持物(长形盖片;24 小时前置入),令细胞面向上,置放在载物片上,再覆以24 mmX 36 mm的较大盖片;如不用支持物培养法,也可取少许培养液滴在载物片上,再覆以盖片法观察亦可。2.
支原体的检测实验_荧光染色法
实验方法原理荧光显微镜检查法,荧光染料用 Hoechst 33258,它是一种能与DNA 特异结合的荧光染料。支原体内含有DNA,能着色,是现有检测法中最方便和最有效的一种。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks醋酸甲醇蒸馏水仪器、耗材盖片显微镜实验步骤1. 标本盖片培养细胞汇合前从瓶中取出(如细胞已
支原体的检测实验_低涨处理地衣红染色观察法
实验方法原理本法为固定染色法,简便易行,标本可长期保存,不仅适于检测支原体,亦可用于检测真菌和细菌。实验材料细胞试剂、试剂盒培养液枸橼酸Carnoy地衣红冰醋酸酒精仪器、耗材离心机实验步骤1. 取材用支持物盖片培养法或培养液均可;用培养液时,先吸取培养液1 毫升,500~800 转/分,离心5 分
荧光检测支原体
实验方法原理在无抗生素情况下,至少将细胞培养一周,将培养上清转移至处于对数生长早期的指示细胞中,孵育 3~5d ,将细胞固定和染色,寻找细胞核之外的荧光。实验材料来自于7天单层培养的无抗生素的细胞培养上清液或经离心后的上清液
荧光检测支原体
实验方法原理在无抗生素情况下,至少将细胞培养一周,将培养上清转移至处于对数生长早期的指示细胞中,孵育 3~5d ,将细胞固定和染色,寻找细胞核之外的荧光。实验材料来自于7天单层培养的无抗生素的细胞培养上清液或经离心后的上清液指示细胞试剂、试剂盒Hoechst 33258 染料BSS-PRD-PBSA
生化检测项目支原体检查法介绍
支原体检查法介绍: 支原体检查法是检查人体否受到支原体的感染,为临床诊断与治疗支原体感染患者提供依据的一种检查方法。支原体只能粘附在呼吸道或泌尿生殖道的上皮细胞表面的受体上,而不进入组织和血液。支原体检查法正常值: 酶联免疫法:为阴性。支原体检查法临床意义: 临床意义 阳性,见于支原体感染,可
ELISAIgM检测和被动凝集法检测肺炎支原体抗体的比较
一、肺炎支原体感染的特点肺炎支原体(MP)是一种常见的非典型肺炎的病原体,经飞沫和直接接触传播,临床多表现为呼吸道感染综合征,起病可急可缓,以发热和咳嗽为主要表现。中高度发热多见,也可低热或无热。MP对大环内酯类抗生素敏感, 但对常规治疗肺炎的药物耐受。早诊断、早治疗有利于避免滥用抗生素, 缩短病程
支原体污染及检测
(1)支原体污染在细胞培养中最常见、不易被查觉,但支原体污染可显著影响细胞功能干扰实验结果。支原体是介于细菌和病毒之间的目前所知能独立生活的最小微生物,它无细胞壁,形态呈高度多形性,最小直径0.2um,可通过滤器。 目前通过对国内100余株/系细胞的检测,形势不容乐观。污染率达30% ~ 60% 。
支原体常用检测方法
支原体这种微小的微生物(直径0.2-0.8 µm),是细胞培养中令人头疼的大问题。支原体污染可能来自培养基、血清或实验操作者,会影响细胞生长率、细胞形态、基因表达、细胞代谢和细胞活力。支原体感染不易察觉,因此对培养细胞定期进行支原体检测就非常重要。 污染实验室培养细胞的支原体
支原体培养实验——支原体固体培养基接种法
支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。实验材料肺炎支原体试剂、试剂盒糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊青霉素仪器、耗材培养皿烧杯玻璃棒天平移液管离心机棉花拭子实
微生物学技术:PCR法检测支原体
PCR法是20世纪80年代中期建立起来的一种体外DNA扩增技术,其基本原理是酶促DNA合成反应,即在DNA模板、引物和脱氧核糖核酸存在下,经DNA聚合酶的作用,使DNA 链扩增延伸。该方法具有灵敏度高、特异性强、快速的特点,但其对实验环境的要求严格,实验成本较高,有时还有假阳性的现象出现。1、仪
细胞支原体污染的PCR检测
支原体菌株来源: M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原体 M.FermentaneATCC19989发酵支原体 M.SalivariumATCC23064唾液支原体 M.HominisATCC23114人型支原体 M.Ora
支原体的扫描电镜检测
1、原理利用电子显微镜的超级放大功能,可直接观察培养细胞中支原体污染情况。2、操怍方法①细胞传代至贴有盖玻片的平皿中;②培养24h取出;③PSB洗涤;④2.5%戊二醛/ PSB固定15min,PSB洗涤;⑤1%锇酸固定30min,PSB洗涤;⑥乙酸异戊酯脱水;⑦冰点干燥;⑧喷金;⑨扫描电镜观察,照相
细胞支原体污染的PCR检测
支原体菌株来源:M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原体M.FermentaneATCC19989 发酵支原体M.SalivariumATCC23064唾液支原体M.HominisATCC23114人型支原体M.OraleATCC23714口腔支原体M.HyorhinisATCC290
肺炎支原体lgM检测
【原理】 肺炎支原体快速检测卡可检测血清中的肺炎支原体lgM抗体。患者的血清样品分别加入两个测试孔内,当样品沿膜扩散时,分别加入3滴抗人lgM碱性磷酸酶复合物、3滴洗液和2滴底物,5分钟后观察结果。质控孔为质量控制,固定有人lgM,测试孔固定有肺炎支原体抗原。阳性反应结果为蓝色,阴性结果为无色。【材
肺炎支原体lgM检测
实验方法原理肺炎支原体快速检测卡可检测血清中的肺炎支原体lgM抗体。患者的血清样品分别加入两个测试孔内,当样品沿膜扩散时,分别加入3滴抗人lgM碱性磷酸酶复合物、3滴洗液和2滴底物,5分钟后观察结果。质控孔为质量控制,固定有人lgM,测试孔固定有肺炎支原体抗原。阳性反应结果为蓝色,阴性结果为无色。实
细胞凋亡检测实验——形态学检测法
细胞凋亡检测可应用于:(1)肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究;(2)临床诊疗,新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗;(3)对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价具有举足轻重的地位。实验方法原理根据凋亡细胞固有的形态特征,使用合适的显微镜检测凋亡细胞形态变化。
支原体培养实验——支原体半固体培养基接种法
实验方法原理一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。 二、分离培养 混种法:在制备半固体培养基时,培养基加热溶化,温度降至50℃时,添加动物血清
植物气孔渗入法检测实验
实验方法原理各种液体对植物叶片的湿润力不同,湿润力愈强的液体,就愈容易附着于叶片表面而渗入气孔。因此可用湿润力不同的液体测定气孔的大体开度。实验材料植物叶片 试剂、试剂盒搪瓷盘
植物气孔渗入法检测实验
实验方法原理 各种液体对植物叶片的湿润力不同,湿润力愈强的液体,就愈容易附着于叶片表面而渗入气孔。因此可用湿润力不同的液体测定气孔的大体开度。实验材料 植物叶片试剂、试剂盒 搪瓷盘秒表试剂瓶仪器、耗材 液体石蜡无水乙醇苯二甲苯实验步骤 1. 在室外取自然生长的叶片,于叶背中脉任意一侧依次滴上一滴液体
印迹法植物气孔检测实验
实验方法原理把有机溶胶涂在植物的表面,胶体风干后就凝成薄膜,这膜就印有表皮组织各细胞的边界痕迹,从而显示出气孔的开闭情况,此法除用来观测气孔外,还可用于观测表皮组织上的细胞,茸毛以及蜜腺、蜜盘、刺、鳞片等。实验材料植物叶片