细胞培养的八个常见问题与解答(FAQ)
1 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。 2 细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？ 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除 DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 3 可否使用与原先培养条件不同之培养基？ 不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活。 4 可否使用与原先培养条件不同之血清种类？ 不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来......阅读全文
细胞培养的八个常见问题与解答(FAQ)
1 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。 2 细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DM
细胞冻存常见问题与解答FAQ1
细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。2、可否使用
细胞冻存常见问题与解答FAQ2
14、DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO 等级， 必须为Tissue culture grade之DMSO (如Sigma D2650)， 其本身即为无菌状况， 第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中， 保存于4°C， 避免反复冷冻解冻造成DMSO 之裂解而释出有害物质，
细胞培养常见问题与解答3
15.如何检测内毒素(热源)水平？ LAL（Limulus Amebocyte Lysate）试验是可用的最敏感和特异的检测细菌内毒素的方法。Levin和Bang 发现细菌可引起鲎（Limulus polyphemus）血管内的凝集作用。内毒素启动一个细胞内酶原系统（丝氨酸蛋白酶级
细胞培养常见问题与解答4
22.在High Five无血清培养基中去污剂的浓度是多少？ High Five无血清培养基中去污剂的浓度：0.025 g/L Tween-80，1.0 g/L Pluronic Poly-all。 23.High Five细胞用多大的密度冻存？ 3.0x10E6 ce
细胞培养常见问题与解答2
8.培养基中丙酮酸钠的作用是什么？丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。9.为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀？GIBICO的胎牛血清 没有预老化，储存在2－8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纤维蛋白
细胞培养常见问题与解答1
1.为什么要热灭活血清？加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。2.如何用台盼兰计数活细胞？用无血清培养基把细胞悬液稀释到200－2000个/毫升，在0
细胞培养FAQ
1 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后， 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？ 除少数特别
重组细胞因子和蛋白常见问题解答(FAQ)
1．PeproTech细胞因子和蛋白产品的稳定性如何？答：除非在产品说明书中特别注明，PeproTech的所有产品均为冻干粉，它们在室温条件下非常稳定(至少1个月)。尽管如此，我们还是建议您在收到我们的产品后保存于-20oC，以确保蛋白100%的活性。对于大多数蛋白，重悬后在4oC仅能短期保存(约1
CXC06纤维测定仪常见问题解答（FAQ）
粗纤维，虽然称不上是什么营养物质，但也是人体必不可少的“非营养”物质。据医学界最新的研究发现，粗纤维能够预防某些疾病、如冠心病、结肠癌、便秘等疾病，是人体健康的好帮手。粗纤维不能被人体吸收，但是仍然能够对人体起到如此大的作用，大家一定很纳闷，粗纤维倒底是什么物质。其实，粗纤维到处可见，水果、蔬菜里都
细胞培养常见问题解答
1.如何选用特殊细胞系培养基？ 培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。 2.何时须更换培养基？ 视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更
细胞培养板的选择与常见问题解答（一）
细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V型）；培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。（1）平底和圆底（U型和V型）培养板的区别和选择：贴壁细胞一
细胞培养板的选择与常见问题解答（二）
(4)细胞分布不均及解决办法问：我的细胞接种培养板，细胞总是聚集在周边部分，该如何处理啊？我看园子里有的战友的细胞却是聚集在中间，是不是板子的质量问题啊？答：请问你的细胞是如何混匀的？是滴管吹打还是振荡培养板？如果是后者，而且是转圈摇匀的话，很有可能由于离心力的作用使细胞甩到周边部分，导致细胞中间少
细胞培养（cell－culture）的一些常见问题与解答1
1、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗？不见得！因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++， Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下，pH 8.0， 温度37 ℃其作用能力最强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前，一
细胞培养（cell－culture）的一些常见问题与解答2
6、血清的有关问题：新生牛血清：新出生牛5天内取血制成小牛血清：小牛出生16周以内采血制成。胎牛血清：（进口血清）要求剖腹取胎制成。国内厂家往往不能做到，经常把出生2天以内采血称为胎牛血清。根据血清的生产工艺及血红蛋白、内毒素含量又分为：（1）特级胎牛血清：40纳米过滤，内毒素含量≤10EU，血红蛋
细胞培养（cell－culture）的一些常见问题与解答1
1、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗？不见得！因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++， Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下，pH 8.0， 温度37 ℃其作用能力最强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前，一
细胞培养（cell－culture）的一些常见问题与解答2
6、血清的有关问题：新生牛血清：新出生牛5天内取血制成小牛血清：小牛出生16周以内采血制成。胎牛血清：（进口血清）要求剖腹取胎制成。国内厂家往往不能做到，经常把出生2天以内采血称为胎牛血清。根据血清的生产工艺及血红蛋白、内毒素含量又分为：（1）特级胎牛血清：40纳米过滤，内毒素含量≤10EU，血红蛋
细胞培养常见问题解答（三）
21 侦测出细胞株有支原体污染时， 该如何处理?直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株。22 CO2 培养箱之水盘如何保持清洁?定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之。23 为何培养基保存于4 °C 冰箱中，颜色会偏暗红色， 且pH值会越来越偏碱性?培养基保存于4 °C 冰箱中，
细胞培养常见问题解答（二）
11 欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞， 其离心速率一般为300xg (约1,000rpm)，5 - 10 分钟， 过高之转速， 将造成细胞死亡。12 细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生
细胞培养常见问题解答（四）
另：这里补充一下培养用品的消毒，供参考：细胞培养的最大危险是发生培养物的细菌，真菌和病毒等微生物的污染，污染主要是由于操作者的疏忽而引起，常见的原因有操作间或周围空间的不洁，培养器皿和培养液消毒不合格或不彻底，由于有关培养的每个环节的失误均能导致培养失败，故细胞培养的每个环节都应严格遵守操作常规，防
细胞培养常见问题解答（二）
16 细胞欲冷冻保存时， 细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x106 cells/ml vial， 融合瘤细胞则以5x106 cells/ml vial 为宜。17 应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室
细胞培养常见问题解答（一）
1 冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后， 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO?除少数特别注明对D
细胞培养常见问题解答（一）
1 冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后， 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO?除少数特别注明对D
浓缩仪常见问题与解答
1、样品浓缩仪与氮吹仪的区别？答：样品浓缩和氮吹仪都是用氮气来进行吹扫，只是各厂家的命名不一样。2、如何能让实验速度更快、效率更高？答：样品浓缩仪的原理是通过提高样品的温度，使样品的溶剂在无氧状态下进行挥发，从而快捷高效的达到浓缩的目的。影响实验速度的原因有两个：1）加热的温度。2）气体的流量及气体
SWATH技术常见问题与解答
SWATH（Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra）采集模式是苏黎世联邦理工学院及AB SCIEX（全球领先的生命科学分析技术公司）的科学家联合推出的一项基于质谱应用的新技术。利用此项技术，科学家有史以来首次可
SWATH技术常见问题与解答
SWATH（Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra）采集模式是苏黎世联邦理工学院及AB SCIEX（全球领先的生命科学分析技术公司）的科学家联合推出的一项基于质谱应用的新技术。利用此项技术，科学家有史以来首次
移液器常见问题与解答大全
移液器是实验室里面最长使用的实验仪器之一，基本上每一个实验室人员都曾经或现在使用过移液器，因而也会遇到移液器使用时的一些问题。笔者总结归纳了移液器使用时常见的问题与解答大全，希望对于大家有所帮助：移液器使用时常见的问题与解答大全：问题可能原因提议移液器渗漏多道移液器吸嘴里不均衡的液体水平·吸嘴与移液
测序过程常见问题分析与解答
DNA测序样品用什么溶液溶解比较好? 答：溶解DNA测序样品时,用灭菌蒸馏水溶解最好。DNA的测序反应也是Taq酶的聚合反应,需要一个最佳的 酶反应条件.如果DNA用缓冲液溶解后,在进行了测序反应时,DNA溶液中的缓冲液组份会影响测序反应的体 系条件,造成Taq酶的聚合性能下降。 有很多客户在
eBioscience流式抗体常见问题与解答
1、eBioscience公司提供了哪些抗体？ A：物种——人、小鼠、大鼠、非人灵长类、犬类等。检测指标——包括细胞表面标记（CD分子，膜骨架，趋化因子受体）和胞内指标（细胞因子，核内转录因子）。抗体标记——生物素标记抗体，亲和纯化抗体以及直标荧光素抗体。eB抗体的直标荧光素有（括号内是发射光波长
几个问题帮你了解细胞培养FAQ
1.细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？ 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 2.可否使用与