病理制片技术——冷冻切片的制作
一、概述 冷冻切片是利用物理降温的方法将新鲜的组织标本冷冻使其产生一定的硬度进行切片的技术方法。与石蜡切片相比,由于冷冻切片不需脱水包埋因此制片速度 快,是为手术进行中的临床医师提供病理诊断的良好方法。此外由于冷冻切片的标本是未经固定的新鲜组织,因此冷冻切片也是脂肪染色、酶组织化学染色以及某些 免疫组织化学染色和原位分子杂交的理想制片方法。冷冻切片的不足是组织细胞的形态略逊于石蜡切片。 二、冷冻切片的制作方法 利用氯乙烷喷洒、二氧化碳喷射、半导体制冷的方法均可制作普通的冷冻切片,用于术中的病理诊断。恒冷箱冷冻切片机可以制作适用于各种目地的冷冻切片,是目前最为常用的理想冷冻切片制片方式。 1.冷冻切片的技术操作方法 (1)将恒冷箱冷冻切片机的速冻头和箱内温度调整到适宜的切温度,一般情况下为一18~一25℃。 (2)在......阅读全文
病理制片技术——冷冻切片的制作
一、概述 冷冻切片是利用物理降温的方法将新鲜的组织标本冷冻使其产生一定的硬度进行切片的技术方法。与石蜡切片相比,由于冷冻切片不需脱水包埋因此制片速度 快,是为手术进行中的临床医师提供病理诊断的良好方法。此外由于冷冻切片的标本是未经固定的新鲜组织,因此冷冻切片也是脂肪染色、酶
病理制片技术——组织石蜡切片
组织经石蜡包埋后制成的蜡块,用切片机制成切片的过程为石蜡切片法。石蜡切片法现使用的切片机有平推式切片机、轮转式切片机两种。一、平推式切片机石蜡切片法1.切片前的准备:清洗过的载物片(或免清洗的),毛笔,铅笔,小竹片,水槽,雾化器,摊片器,切片刀,刀架。2.切片制作步骤:刀架的粗削部放在头端,在切片机
冷冻组织切片制作
实验试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇实验设备载玻片,Whatman 1#滤纸,低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织
冷冻组织切片的制作
实验概要本实验介绍了冷冻组织切片制作的基本操作流程。主要试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇主要设备载玻片,Whatm
冷冻组织切片的制作实验
实验试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇实验设备载玻片,Whatman 1#滤纸,低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织
病理制片技术取材
一、概念取材是将送检标本进行客观描述并将病变部位组织切成厚薄适度的小片后装入小盒(进入组织脱水程序),取材至关重要。二、取材环境取材室由取材台、记录桌、标本陈列架、电脑查询等组成;取材台应有良好的排风、进出水系统,配备齐全的刀、剪、镊、尺等基本工具和备用固定剂,记录桌应备 有打号机(无时应用铅笔
病理制片技术——封片
封片是将组织切片封固保存于载玻片与盖玻片之间,使之不与空气发生接触,防止其氧化、褪色,利于镜检观察及保存。一、手工封片手工封片应注意以下七点。(1)所用树胶浓度要适中,以一般速度滴下并恰能成珠既可。太稀时易溢出玻片,当二甲苯挥发后,组织切片就会收缩产生胶不匀并出现大片气泡。太浓时,滴在玻片上树胶不易
病理制片技术——包埋
一、意义组织块经过固定、脱水、透明、浸蜡等处理后,用包埋剂(如石蜡、树脂、塑料等)将其包制成含组织块的蜡块或塑料块等的过程称为包埋。不同的包埋方法有不同的要求,经包埋后,组织可达到一定的硬度和韧度,有利于切成理想的薄片。二、包埋步骤先将熔化的石蜡注入包埋托内(模具),而后用镊子将经过浸蜡的组织块从脱
冷冻切片术的制作方法
以Shandon As 620 E型恒温箱冷冻切片机为例,该机的箱面上有电子控制板,装有即时冷冻键和除霜键,启动即时冷冻键,机器马上进行工作状态,并可持续10mins。启动即时除霜键,可将工作间顶部后面的制冷栅上的霜除掉,并可持续15mins。有照明键一个,启动该键可照明工作间,有利工作及观察组织的
关于病理切片制作的取材介绍
(1)病理切片— 材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。 (2)病理切片— 组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体
病理制片技术——常规染色
苏木精(hematoxylin)和伊(eosin)染色方法,简称HE染色方法,是生物学、细胞学与组织学最广泛应用的染色方法。在病理科称为常规染色 方法。病理学的诊断都是以HE方法为基础的。染色的目的是把组织切片或细胞涂片等浸入染料及其他染色剂配成的染色液中,经过适当的时间和处理,
病理制片技术——组织脱水
组织经固定后会有大量水分,组织脱水是用某些溶剂逐渐将组织内的水分置换出来,以利于透明剂和石蜡的渗入。 一、手工脱水 1.器械准备:大标本缸6个,浸蜡用金属缸3个,脱水篮,恒温烤箱。 2.日常工作程序见表5.1。 表5.1 手工脱水日常工作程序
石蜡切片制作基本技术
石蜡切片 石蜡切片(paraffin section) 组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡
病理制片技术——常用特殊染色
1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1
冷冻切片技术实验及冷冻切片机的基本操作
实验目的1 掌握冷冻切片的方法2 掌握冷冻切片的用途实验原理 冷冻切片是借助低温使组织冻结达到一定的硬度并通过冰起支撑作用来进行切片的一种方法。速冻 可减小冰晶直径,避免组织细胞损伤。制冷 压缩机佛里昂制冷、半导体温差电制冷 实验材料 新鲜动物肝脏实验方法 1 准备 将仪器 打开,样品台温度调至-4
冷冻切片的制作方法及注意事项
冷冻切片的方法及注意事项一、实验前准备⒈清理实验台及仪器⒉开启冷冻切片机并将冷冻切片机预降至所需温度(- 15~-20 ℃*)⒊准备好处理好的载玻片、刀片、胶水以及药品二、取材解剖之后迅速取出所需的新鲜组织,用干纱布或滤纸擦干后不需固定直接取材(24×24×2mm*),以防形成冰晶造成切片中形成形状
显微标本的制作粉末制片
粉末制片 主要用于粉末状的药材及药材粉末制成的成方制剂的观察。4.2.l 药材粉末制备 取干燥药材,磨或锉成细粉(通常应过80目以上药筛),装瓶,贴上标签。制备粉末时,注意取样的代表性。例如:根类药材要切取根头、根中段及根尾等部位,并全部磨粉,过4号筛,混合均匀,不得丢弃渣头。干燥时,一般温
冷冻切片术技术简介
是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断。冷冻切片的种类较多,有低温恒冷箱冷冻切片法,二氧化碳冷冻切片法,甲醇循环制冷冷冻切片法等。这些方法,随着时代的变迁,科技的发展,许多年前被认为是非常重要的技术,也逐步被淘
病理制片技术——常用试剂及染液的配制
1.试剂准备:苏木精10 g,硫酸铝钾80 g,无水乙醇200 ml,蒸馏水2000 rnl,氧化汞3 g,冰乙酸40ml。2.配制步骤(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内,加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。(2)将200 ml无水乙醇注入一只30
石蜡切片的制作
以石蜡制作的切片,可以制成极薄的切片。一般的切片厚度要求在4—6微米。而石蜡切片不但可以达到这个要求,甚至可以切得更薄到2微米以至1微米。这一点是冰冻切片和火棉胶切片难以获得的结果。另外,石蜡切片还便于制作大批的或是连续的切片。而且以石蜡包埋的组织块便于长期保存。所以石蜡切片是目前各种切片制作方法中
石蜡切片的制作
以石蜡制作的切片,可以制成极薄的切片。一般的切片厚度要求在4—6微米。而石蜡切片不但可以达到这个要求,甚至可以切得更薄到2微米以至1微米。这一点是冰冻切片和火棉胶切片难以获得的结果。另外,石蜡切片还便于制作大批的或是连续的切片。而且以石蜡包埋的组织块便于长期保存。所以石蜡切片是目前各种切片制作方法中
石蜡切片和半薄切片的制作
实验概要本方法介绍了石蜡切片和半薄切片的制作流程。主要试剂4%戊二醛固定液(pH7.0磷酸缓冲液),乙醇,二甲苯,纯石蜡,蜂蜡,树脂胶主要设备真空泵,AO手摇式切片机,Olypmus BH-2型显微镜,LKB超薄切片机实验步骤1. 石蜡切片的制作 1) 取材固定新鲜配置4%戊二醛固定液(pH7.
冷冻超薄切片术技术简介
中文名称冷冻超薄切片术英文名称cryoultramicrotomy;ultracryotomy定 义将低温冷冻标本在低温超薄切片机中制成供电镜观察使用的超薄切片的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
石蜡切片与冷冻切片的区别
1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组 织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片, 而那些稳
冰冻切片的制作技巧
这个主要看组织固定包埋技术和冰冻切片机性能吧,固定包埋因人而异,因为需要快速出诊断报告,这一点要求切片机的速冻效果好,机器能马上进入工作状态。这一点我觉得深圳瑞沃德厂家的冰冻切片机设计的很好,可以上班前自动唤醒(无需人员手动),上班了,机器也就可以马上进入工作状态。样本快速制冷,2-3分钟就可以了
冰冻切片的制作步骤
冷冻切片 1、取出组织支承器,放平摆好组织,周边滴上包埋剂,速放于冷冻台上冰冻,用吸热器压住组织,至包埋剂与组织冻结成白色冰体即可切片(1~3分种)。 2、将冷冻好的组织块,夹紧于切片机持承器上,启动粗进退键,转动旋钮,将组织修平。 3、调好欲切的厚度,根据不同的组织而定,原则上是细胞密集的薄切,纤
显微标本的制作切片
显微标本的制作4.1 横切制片或纵切制片4.1.1 药材的预处理 将应观察的部位、切成适当大小的块或段,一般以宽lcm、长3cm为宜,切面削平整。质地软硬适中的样品可直接进行切片;质地坚硬的则需先使其软化后再切片。制片的预处理——软化 软化方法可采用放在吸湿器中闷润,或在水中浸软或煮软。经
冷冻切片操作
1.冷冻切片机要始终处于运行状态,即使在不做冷冻切片时也要开着致冷,不能时开时关,以免影响机器寿命。2.手术取下的新鲜组织不要固定,因固定过的组织不利于切片,而且还会影响染色。3. 用OCT做包埋剂,起到支撑的作用。先将OCT标在固定头上再将组织放在OCT上,OCT不要太多,以免流到固定头外,组织表
组织学切片机分类及应用
切片机种类很多,包括药材类切片机,器材类切片机,食品类切片机,组织切片类切片机等。组织切片机主要是对人体组织及动植物组织作病理切片分析的设备。组织切片机一般主要分为:轮转式切片机和冷冻切片机。轮转式切片机:是借转动手摇轮进行切片动作。蜡块台镶装于可在沟槽内上下运动的金属夹座中,借微动螺旋向前推进切断
组织学切片机分类及应用
切片机分为很多种类,包括药材类切片机,器材类切片机,食品类切片机,组织切片类切片机等。按其结构又可分为摇动式切片机、轮转式切片机、滑动式切片机、推动式(雪橇式)切片机等。组织切片机是一种对人体组织及动植物组织作病理切片分析的设备。组织切片机一般分为:轮转式切片机和冷冻切片机。轮转式切片机:是借转动手