病理制片技术——常用特殊染色
1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h,染真菌时间要相对短一些,一般情况下肉眼看到染液变色,切片呈棕色时从温箱取出染色缸,倒掉染液,自来水冲洗1min,用0.25%氯化金调色1 min,水洗后,用3%硫代硫酸钠染5min,水洗,用苏木精染液浅染,水洗、分化、冲水返蓝,伊红染10 s,最后经脱水、透明、封固。3.图示结果:基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色,核呈蓝色。4.注葸事项(1)掌握染色温度和时间,如60℃染1 h,80℃染30~40 min。(2)真菌类染色时间相对要短,染色时间过长,切片染色过深,可用分色剂处理。二、黏液卡红染色1.第一步准备工作:配......阅读全文
病理制片技术——常用特殊染色
1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1
病理制片技术——常规染色
苏木精(hematoxylin)和伊(eosin)染色方法,简称HE染色方法,是生物学、细胞学与组织学最广泛应用的染色方法。在病理科称为常规染色 方法。病理学的诊断都是以HE方法为基础的。染色的目的是把组织切片或细胞涂片等浸入染料及其他染色剂配成的染色液中,经过适当的时间和处理,
病理制片技术——常用试剂及染液的配制
1.试剂准备:苏木精10 g,硫酸铝钾80 g,无水乙醇200 ml,蒸馏水2000 rnl,氧化汞3 g,冰乙酸40ml。2.配制步骤(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内,加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。(2)将200 ml无水乙醇注入一只30
病理制片技术——封片
封片是将组织切片封固保存于载玻片与盖玻片之间,使之不与空气发生接触,防止其氧化、褪色,利于镜检观察及保存。一、手工封片手工封片应注意以下七点。(1)所用树胶浓度要适中,以一般速度滴下并恰能成珠既可。太稀时易溢出玻片,当二甲苯挥发后,组织切片就会收缩产生胶不匀并出现大片气泡。太浓时,滴在玻片上树胶不易
病理制片技术取材
一、概念取材是将送检标本进行客观描述并将病变部位组织切成厚薄适度的小片后装入小盒(进入组织脱水程序),取材至关重要。二、取材环境取材室由取材台、记录桌、标本陈列架、电脑查询等组成;取材台应有良好的排风、进出水系统,配备齐全的刀、剪、镊、尺等基本工具和备用固定剂,记录桌应备 有打号机(无时应用铅笔
病理制片技术——包埋
一、意义组织块经过固定、脱水、透明、浸蜡等处理后,用包埋剂(如石蜡、树脂、塑料等)将其包制成含组织块的蜡块或塑料块等的过程称为包埋。不同的包埋方法有不同的要求,经包埋后,组织可达到一定的硬度和韧度,有利于切成理想的薄片。二、包埋步骤先将熔化的石蜡注入包埋托内(模具),而后用镊子将经过浸蜡的组织块从脱
病理制片技术——组织脱水
组织经固定后会有大量水分,组织脱水是用某些溶剂逐渐将组织内的水分置换出来,以利于透明剂和石蜡的渗入。 一、手工脱水 1.器械准备:大标本缸6个,浸蜡用金属缸3个,脱水篮,恒温烤箱。 2.日常工作程序见表5.1。 表5.1 手工脱水日常工作程序
病理制片技术——组织石蜡切片
组织经石蜡包埋后制成的蜡块,用切片机制成切片的过程为石蜡切片法。石蜡切片法现使用的切片机有平推式切片机、轮转式切片机两种。一、平推式切片机石蜡切片法1.切片前的准备:清洗过的载物片(或免清洗的),毛笔,铅笔,小竹片,水槽,雾化器,摊片器,切片刀,刀架。2.切片制作步骤:刀架的粗削部放在头端,在切片机
有丝分裂(Feulgen染色)制片技术
实验概要 1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。 实验原理 有丝分裂(mitosis)是植物
有丝分裂(Feulgen染色)制片技术
实验概要1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。实验原理有丝分裂(mitosis)是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内染色体准确地复制,并有规
病理制片技术——冷冻切片的制作
一、概述 冷冻切片是利用物理降温的方法将新鲜的组织标本冷冻使其产生一定的硬度进行切片的技术方法。与石蜡切片相比,由于冷冻切片不需脱水包埋因此制片速度 快,是为手术进行中的临床医师提供病理诊断的良好方法。此外由于冷冻切片的标本是未经固定的新鲜组织,因此冷冻切片也是脂肪染色、酶
果蝇唾腺染色体制片技术
实验概要1、练习分离果蝇幼虫唾腺的技术,学习唾腺染色体的制片方法; 2、观察果蝇唾腺的形态学及遗传学特征; 3、了解体细胞染色体配对现象;实验原理本世纪初,D.Kostoff用压片法首先在D.melanogaster果蝇幼虫的唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体—唾液腺染色体(salivary
染色体制片
实验概要掌握染色体制片的基本程序。实验步骤1. 取对数生长期细胞一个。2. 将培养基换成10mL DMEM(H) 10%FBS 0.1μg/mL秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3. 将细胞培养液倒掉,马上加入3~4mL 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后
几种常用特殊PCR技术
几种常用特殊PCR技术(一)逆转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR(RT-PCR)常用于基因表达研究(定量PCR)和逆病毒检测.设计RT-PCR引物时,应使引物分别位于不同的外显子中,以便区别cDNA和gDNA
几种常用特殊PCR技术
几种常用特殊PCR技术(一)逆转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR(RT-PCR)常用于基因表达研究(定量PCR)和逆病毒检测.设计RT-PCR引物时,应使引物分别位于不同的外显子中,以便区别cDNA和gDNA
几种常用特殊PCR技术
几种常用特殊PCR技术 (一)逆转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR) RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR(RT-PCR)常用于基因表达研究(定量PCR)和逆病毒检测. 设计RT-PCR引物时,应使引物分别位于不同的外显子中,以便区别cDNA和
特殊染色技术的应用
现代病理学中免疫组织化学技术、电子显微镜技术以及其它细胞及分子生物学技术应用日益广泛, 这些技术要求一定的实验条件和试剂,如市面上使用广泛的徕卡染色机及其配套的徕卡透明试剂。相对而言,组织化学技术则具有无需复杂的实验条件和试剂、操作又比较简单的优势,在临床病理学诊断中具有重要的应用价值。 组织化学染
细胞染色制片方法
1、 取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。2、 将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3、 将细胞培养液倒掉,马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后,马上加入终止
显微制片染色剂
染色剂3.4 苏丹Ⅲ试液 此液可使木栓化、角质化细胞壁及脂肪油、挥发油、树脂等染成红色或淡红色。3.5 钌红试液(临用新制)此液可使粘液染成红色。3.6 间苯三酚试液 此液与浓盐酸合用,可使木化细胞壁染成红色或紫红色。3.7 碘试液(临用现配。应置棕色瓶内保存)此液可使淀粉染成蓝色或紫
植物染色体制片
实验概要掌握染色体制片方法,并自选材料进行染色体制片;学会染色体核型分析。主要试剂酒精、冰醋酸、甲醇、盐酸、铁矾、苏木精(或洋红、石炭酸品红)、秋水仙碱(或对二氯苯饱和水溶液、8-羟基奎啉、富民隆乳剂)、二甲苯、中性树胶、石碳酸、甲醛、山梨醇等。主要设备显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、吸水纸、纱布块、
染色体制片步骤
1、取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。2、将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3、将细胞培养液倒掉,马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后,马上加入终止液终止消化,并将分
显微镜常用制片法
常用制片法 药材切片标本的制作方法较多。在药材鉴定的研究工作中往往将其制成石蜡切片(永久切片),因制成的石蜡切片外形较完整,厚薄均匀,且可制得连续切片,观察时方便,又能长期保存。但由于制片技术较复杂,费时太多,不适用于日常检验。徒手切片或滑走切片法:表面装片:为观察叶类、花类及全草类药材的叶片、
HE和特殊染色技术资料
HE染色苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚
小白鼠骨髓细胞染色体制片技术
实验概要1、掌握哺乳动物骨髓细胞染色体玻片标本的制备方法。 2、观察动物染色体的形态特征,统计小白鼠体细胞中染色体数目。实验原理制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。 制备动物染色体标本原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬液中
显微制片技术
显微制片技术 在进行显微鉴别时,首先要将“检样”制成适于镜检的标本。对于完整的药材可制成各种切面的切片;对于粉末药材(包括丸、散等成方)可直接装片或作适当处理后制片。² 永久片制作技术² 临时制片技术² 滑走切片机——半自动切片机² 透射光生物学显微镜² 连续变倍体视显微镜²
果蝇唾腺染色体制片实验
实验方法原理 果蝇唾腺染色体是处于体细胞同源染色体的配对状态,由于多次复制而不分开,因而形成具有1 000-4 000根染色体丝的巨大染色体,又称为多线染色体.,本实验利用剖离果蝇三龄幼虫的唾腺,,压制染色体玻片标本的方法,观察多线染色体的特征。实验材料 果蝇试剂、试剂盒 水醋酸洋红仪器、耗材 解剖
病理学课程要学制片吗
病理学课程要学制片。病理学科是一门基础与临床之间起着桥梁作用的重要学科,病理研究方法在技术工作上又是多方面的,有尸体解剖,大体标本的制作,制片石腊,切片,冰冻切片,半薄切片,超薄切片等,组织化学方法,免疫酶标技术,荧光技术,摄影技术等。精品资料作为实验技术人员大量的工作是病理制片技术。即常规病理切片
植物制片实验技术
实验概要植物制片技术是植物显微技术的一个重要组成部分,在有关植物形态建成、植物杂交育种、作物病虫害防治、药用植物的培育和鉴别以及林木材性鉴定等多方面的研究工作中,都需要应用显微制片技术,本实验介绍了植物制片基本方法。主要试剂1. FAA固定液(福尔马林-冰醋酸-酒精),又称万能固定液或称标准保全液。
植物制片实验技术
实验概要 植物制片技术是植物显微技术的一个重要组成部分,在有关植物形态建成、植物杂交育种、作物病虫害防治、药用植物的培育和鉴别以及林木材性鉴定等多方面的研究工作中,都需要应用显微制片技术,本实验介绍了植物制片基本方法。 主要试剂 1. FAA固定液(福尔马林-冰醋酸
关于细菌染色技术常用的方法介绍
细菌染色技术常用方法有: ①革兰氏染色法,是一种复染色方法,即选用结晶紫和石碳酸复红两种染液染色的方法,依此将细菌分成革兰氏阳性菌(记G+)和革兰氏阴性菌(记G-)。 ②简单染色法,是用一种染液染色的方法,如美兰或石碳酸复红等,此法只能显示细菌的形态及大小。 ③特殊结构染色法,是染色细菌细