细菌的局限性转导实验原理、材料和实验步骤
一、实验原理： 转导是由噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展，转导已成为基因精细结构分析的常用方法。转导可分为局限性转导和普遍性转导二大类。 本实验试图用局限性转导为例，用噬菌体（λ）专一性转导半乳糖发酵基因的现象来说明转导的基本原理。并初步掌握转导实验的基本方法。 用E Coli k12 (λ) gal 作为供体菌，此菌带有原噬菌体（λ）。控制半乳糖发酵的基因在细菌染色体上和（λ）紧密连锁。当此菌体受紫外光诱导后，原噬菌体被释放出来，其中有一定比例的噬菌体带有邻近的半乳糖发酵基因。这种噬菌体称λdg，这种噬菌体在感染另一不能发酵半乳糖的菌体时（即受菌体）就有可能使其转变成为能发酵半乳糖的菌体。整个过程可以下图表示： K12（λ）gal+（供体菌） ↓UV λgal+ ↓ K12 S......阅读全文
细菌糖发酵实验
实验材料大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤1. 试管标记 取分别装有不同糖类（如葡萄糖、蔗糖和乳糖等）发酵培
细菌RNA制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 STET氯仿乙酸钠氯化铯无水乙醇EDTA仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 培养100 ml 大肠杆菌或500 ml 蓝细菌至对数生长期，加入1/20体积终止缓冲液，置于冰上。2. 于4℃用JA-10转子17 700 g 离心5 min 收集细胞。3.
细菌糖发酵实验
实验材料 大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒 NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材 超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤 1. 试管标记 取分别装有不同糖类（如葡萄糖、蔗糖和乳糖等
细菌RNA制备实验
革兰氏阴性细菌中提取 革兰氏阳性细菌中提取 实验材料 RNA 试
细菌的生化实验
各种细菌具有各自独特的酶系统，因而对底物的分解能力不同，其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物，可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌，称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多，这里主要介绍碳水化合物的代谢试验1．糖（醇、苷）类发酵试验(1)原理：不同
基因转导形成机制
λ噬菌体的整合和转导噬菌体的形成机制首先由A·坎贝尔所推测，以后经实验证明。当用λ噬菌体转导发酵乳糖的基因时，大约10^6 被感染的细菌中出现一个转导子。这一事实说明大约10^6 噬菌体中只有一个带有发酵乳糖的基因，这是低频转导。当λ噬菌体整合到寄主细胞后，带有发酵乳糖基因的λ噬菌体也整合到寄主染色
基因转导的类别
普遍性转导转导噬菌体能传递供体细菌的任何基因的转导。鼠伤寒沙门氏菌的P22噬菌体、大肠杆菌P1噬菌体、枯草杆菌的PBS1、PBS2、SP10噬菌体都是普遍性转导噬菌体。由普遍性转导产生的转导子（即接受了噬菌体传递的供体细胞基因的受体细胞）不具溶源性，说明转导噬菌体中不带有完整的噬菌体染色体，却带有噬
光转导的定义
中文名称光转导英文名称phototransduction定 义将光能转变为电信号的生物化学过程。光刺激被光感受器细胞的受体接受后，通过与受体偶联的G蛋白激活视紫红质，后者则捕获光子并将其转变为电信号，最终产生视觉。是视觉信号转导系统的重要组成部分。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），信号转导
转导的形成机制
λ噬菌体的整合和转导噬菌体的形成机制首先由A·坎贝尔所推测，以后经实验证明。当用λ噬菌体转导发酵乳糖的基因时，大约10^6 被感染的细菌中出现一个转导子。这一事实说明大约10^6 噬菌体中只有一个带有发酵乳糖的基因，这是低频转导。当λ噬菌体整合到寄主细胞后，带有发酵乳糖基因的λ噬菌体也整合到寄主染色
细菌RNA制备实验——革兰氏阴性细菌中提取
实验材料RNA试剂、试剂盒STET氯仿乙酸钠氯化铯无水乙醇EDTA仪器、耗材离心机分光光度计摇床实验步骤1. 培养100 ml 大肠杆菌或500 ml 蓝细菌至对数生长期，加入1/20体积终止缓冲液，置于冰上。2. 于4℃用JA-10转子17 700 g 离心5 min 收集细胞。3. 用2
普遍性转导和局限性转导的异同点
相同点：均以噬菌体为媒介，导致遗传物质的转移。不同点：（1）能够转导的基因普通性转导：可以转导供体菌的几乎任何基因；局限性转导：可以转导供体菌的少数基因。（2）噬菌体的位置普通性转导：不整合到寄主染色体上；局限性转导：整合到寄主染色体上。（3）转导噬菌体的获得：普通性转导：可通过裂解反应得到；局限性
细菌V.P实验
实验材料大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管，根据需要将培养的细
细菌V.P实验
实验材料 大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒 NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材 超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤 1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管，根据需要将
细菌克隆的溶解实验
细菌克隆的溶解实验可以用于：（1）从表达特定融合蛋白质的重组噬菌体构建噬菌体溶源菌；（2）从该溶源菌诱导合成并纯化出融合的目的蛋白质。实验方法原理具有原噬菌体的细菌称为溶原性细菌。噬菌体分为烈性噬菌体和溶原性噬菌体，在感染于寄主细菌细胞时，前者往往在菌体内增殖并将菌体裂解。实验材料大肠杆菌噬菌体试剂
细菌运动性观察实验
实验方法原理 实验材料 苏云金芽孢杆菌假单胞菌金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒 硝酸银鞭毛染色液 Leifson 氏鞭毛染色液0.01％ 美蓝水溶液仪器、耗材 载玻片盖玻片凹载玻片无菌水凡士林显微镜实验步骤 玻片的准备、菌种材料的准备同鞭毛染色实验。1. 涂凡士林取洁净凹载玻片，在其四周涂少许凡士林（图
细菌的革兰氏染色实验
实验方法原理 G＋菌细胞壁肽聚糖含量多，结构致密，脂质少，乙醇不易渗入脱色；G－菌细胞壁肽聚糖含量少，结构疏松，脂质多，乙醇容易溶解脂质而渗入脱色。G＋菌菌体含有大量核糖核酸镁盐，能与结晶紫、碘牢固结合，使乙醇不易将其脱色；G－菌菌体核糖核酸镁盐含量少，容易被乙醇脱色。G＋菌等电点比G－菌低，在同样
细菌肥达反应实验
实验方法原理试管凝集反应是一种半定量的凝集反应。常用已知抗原测定受检血清中有无相应抗体及其含量，以辅助临床诊断或供流行病学调查分析。实验材料伤寒杆菌“H”菌液伤寒杆菌“O” 菌液试剂、试剂盒诊断血清生理盐水仪器、耗材小试管吸管实验步骤1． 取洁净小试管14只分两排排列于试管架上，每排7只依次用蜡笔注
细菌V.P实验
实验材料大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管，根据需要将培养的细
细菌的革兰氏染色实验
实验方法原理G＋菌细胞壁肽聚糖含量多，结构致密，脂质少，乙醇不易渗入脱色；G－菌细胞壁肽聚糖含量少，结构疏松，脂质多，乙醇容易溶解脂质而渗入脱色。G＋菌菌体含有大量核糖核酸镁盐，能与结晶紫、碘牢固结合，使乙醇不易将其脱色；G－菌菌体核糖核酸镁盐含量少，容易被乙醇脱色。G＋菌等电点比G－菌低，在同样P
细菌的分布观察实验
仪器、耗材 普通琼脂培养基血平板镊子实验步骤 1. 空气中细菌的分布（1）方法：采用沉降法，暴皿15分钟，常规培养24小时观察结果。（2）结果观察：培养基表面菌落生长情况。2. 皮肤表面细菌的分布（1）方法：采用涂抹法，将手指于酒精消毒前后分别涂抹琼脂平板表面，常规培养24小时观察结果。（2）结果观
细菌肥达反应实验
实验方法原理 试管凝集反应是一种半定量的凝集反应。常用已知抗原测定受检血清中有无相应抗体及其含量，以辅助临床诊断或供流行病学调查分析。实验材料 伤寒杆菌“H”菌液伤寒杆菌“O” 菌液试剂、试剂盒 诊断血清生理盐水仪器、耗材 小试管吸管实验步骤 1． 取洁净小试管14只分两排排列于试管架上，每排7只依
细菌V.P实验
实验材料大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管，根据需要将培养的细
细菌克隆的溶解实验
试剂、试剂盒 IPTG溶源菌抽提缓冲液氯化钠溶菌酶LB 琼脂平板仪器、耗材 气体恒溫箱液氮Millipore 滤纸水浴摇床牙签或接种环噬菌体λgt11λgt18-23λZAP 和λZipLox 重组子大肠杆菌 Y1090 hsdR 菌株及 Y1089 菌株实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液，缓冲液和试
噬菌体侵染细菌实验
原理：噬菌体T2有一个蛋白质的外壳，DNA裹在其中。当噬菌体T2感染大肠杆菌时，它的尾部吸附在菌体上。然后，菌体内形成大量噬菌体，菌体裂解后，释放出几十个乃至几百个与原来感染细菌一样的噬菌体T2。材料：大肠杆菌，LB培养基，恒温箱，T2噬菌体过程：第一阶段(感染阶段 ) 噬菌体侵染寄主细胞的第一步是
细菌克隆的溶解实验
细菌克隆的溶解实验 实验方法原理 具有原噬菌体的细菌称为溶原性细菌。噬菌体分为烈性噬菌体和溶原性噬菌体，在感染于寄主细菌细胞时，前者往往在菌体内增殖并将菌体裂
细菌硫化氢实验
实验方法原理某些细菌分解培养基中胱氨酸等含硫氨基酸生成硫化氢，硫遇到培养基中的铅盐或铁盐（如硫酸亚铁）形成黑褐色的硫化铅（或硫化铁）沉淀物。实验步骤将乙型副伤寒杆菌和大肠杆菌分别穿刺接种于醋酸铅培养基中，置37℃恒温箱经18～24小时培养后，若出现黑色沉淀者为阳性。
噬菌体侵染细菌实验
这种说法有点偏颇。1、当噬菌体的DNA用32磷标记后，它吸附到大肠杆菌表面，然后把DNA注入到大肠杆菌里面，利用其中的原料复制子代的DNA。离心后，较轻的噬菌体悬浮在上清液中，大肠杆菌及一些较重的颗粒沉淀在底部，由于噬菌体中含有32磷的DNA都注入到大肠杆菌里面，所以上清液放射性很低，底部的沉淀物放
细菌硫化氢实验
实验方法原理某些细菌分解培养基中胱氨酸等含硫氨基酸生成硫化氢，硫遇到培养基中的铅盐或铁盐（如硫酸亚铁）形成黑褐色的硫化铅（或硫化铁）沉淀物。实验步骤将乙型副伤寒杆菌和大肠杆菌分别穿刺接种于醋酸铅培养基中，置37℃恒温箱经18～24小时培养后，若出现黑色沉淀者为阳性。
细菌的分布观察实验
仪器、耗材普通琼脂培养基血平板镊子实验步骤1. 空气中细菌的分布（1）方法：采用沉降法，暴皿15分钟，常规培养24小时观察结果。（2）结果观察：培养基表面菌落生长情况。2. 皮肤表面细菌的分布（1）方法：采用涂抹法，将手指于酒精消毒前后分别涂抹琼脂平板表面，常规培养24小时观察结果。（2）结果观察：
机械力转导的作用
中文名称机械力转导英文名称mechanotransduction定 义细胞在接受包括摩擦力、压力、牵引力、重力和剪切力等机械力刺激时，将这些刺激信号的机械能转化为电信号或生物化学信号并最终引起细胞生理反应的过程。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），信号转导（二级学科）