微量RNA的抽提RNeasyMinEluteSpinColumn
·为了更好地裂解，细胞数不能大于5×105，细胞过多会减低产率和纯度。 准备工作： 1.在 24 ml 96－100％乙醇 中加入 6 ml 去RNA酶的水。 2.在每 1 ml Buffer RLT 中加入10 ml β-ME (加入β-ME的Buffer RLT可在室温下放置1 月)。 3. Buffer RPE中加入4倍体积的96－100％乙醇。 4.在 550 ml 的去RNA酶的水中加入1500 Kunitz单位的DNA酶1，轻轻翻转试管混匀，勿振荡（溶好的DNA酶1分装后，－20℃可放置9个月，2－8℃可放置6周） 5.当细胞数少于5000个，须在匀浆前在溶液中加入载体 RNA。 首次用时，在1ml 去RNA酶的水中加入 310 ug 载体RNA，则载体RNA的浓度为310 ug/ul，置－20℃保存。 实验时所需浓度为4ng/ul，配制如下：取 5 ul 浓度为310 ug/u......阅读全文
微量RNA的抽提RNeasy－MinElute－Spin－Column
·为了更好地裂解，细胞数不能大于5×105，细胞过多会减低产率和纯度。 准备工作： 1.在 24 ml 96－100％乙醇 中加入 6 ml 去RNA酶的水。 2.在每 1 ml Buffer RLT 中加入10 ml β-ME (加入β-ME的Buffer RLT可在室温下放置1
吴立刚研究组研发微量小RNA深度测序技术
中科院上海生科院生物化学与细胞生物学研究所国家蛋白质科学中心（上海）吴立刚研究组与上海市计划生育研究所施惠娟研究组合作，优化建立了适用于微量样本的小RNA深度测序文库构建方法，并系统解析了小鼠早期胚胎发育过程中小RNA的动态变化及其生物学功能。相关研究成果日前在线发表于《科学进展》。 目前小
从棉花组织中提取微量RNA的标准实验方法protocol
Prior to Extractions ・ Bake all necessary glassware, metal spatulas, mortars, and pestles overnight in a 200℃ oven after wrapping them in aluminum f
超微量紫外/荧光全功能分光光度计在RNA质控的应用
小编心里话：RNA质控是个技术活儿！ 对于每天泡在实验室的人来说，qPCR已是家常便饭。毫无疑问浓度高，纯度好，片段完整，才是我们理想中的RNA样品。然而，RNA总是娇气的存在！室温或4度极易降解，提取的时候容易有污染物残留。因此完整的RNA质控包含了三个方面：浓度质控，纯度质控，片段完整性质控。
RNA提取时RNA降解原因
1 ) 新鲜细胞： 裂解液的量不足，使得裂解不充分。 2 ) 新鲜组织： 某些含有内源性核酸酶的样品，很难避免RNA酶的降解，建议采用的方法为在液氮条件下将组织研碎，并且，匀浆时采用更多的裂解液。 3 ) 冷冻样品： 样品取材后应该迅速置于液氮中冷冻存放，然后转移到-70℃冰箱存
RNA干扰技术(RNA－interference，RNAi)
1995年，康乃尔大学的Su Guo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫（C. elegans）中的par-1基因时，发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达，而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA（sense RNA）以期观察到基因表达的增强。但得到的结果
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（2）
早期的 RNAi 技术可用在研究与胚胎发育相关基因的功能上，但是由于细胞分裂造成 dsRNA 的稀释，使得这种方法在研究成体的基因功能时有一定的局限性。为弥补早期 RNAi 技术的不足，Tavernarakis 等将 RNAi 技术做了一些改进及更动，将目的基因之标的序列以反向重复的方式，由
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（1）
基因沉默（gene silencing）是生物体内特定基因由于种种原因不表达的遗传现象。一方面，基因沉默是生物遗传操作创造新的遗传修饰生物（genetically modified organisms）的障碍，另一方面，它又是植物抵抗外来核酸入侵（如病毒）的一种反应，为植物抗病毒的遗传育
RNA提取心得（组织RNA提取和培养细胞的RNA提取）
一.组织RNA提取 1.最好新鲜组织，这样RNA提取的效果比较好，这是肯定的。 2. 如果不是新鲜的（最好在半年之内，-80℃或者液氮中冻存的）组织，注意不要反复冻融，从冰冻状态拿到0-4℃，注意不要拿到常温，待组织解冻后，用 DEPC泡过的剪刀剪一小块组织，称重后，放到预冷的匀浆器中，然后
RNA干扰相关知识RNARISC
RNA-induced silencing complex（RISC）：一种RNA-蛋白质复合物，通过与目标mRNA完全或者部分的互补配对来实施切割或者翻译抑制功能。SiRNA组装siRISC，miRNA组装miRISC。RISCs（无论siRISC还是miRISC）包括两种类型：切割型和不切割型。
RNA干扰相关知识RNARITS）
RNA-induced initiation of transcriptional gene silencing（RITS）：是一种组织染色质变型的复合物。RITS复合物也包含Dicer加工形成的siRNA和AGO蛋白质，通过结合到异染色质的基因池上来促使异染色质上基因的沉默。
RNA分离与分析实验_分离RNA
实验材料标记细胞试剂、试剂盒乙酸缓冲液仪器、耗材漩涡器实验步骤1. 收获标记细胞。2. 小心处置上清液，用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸缓冲液悬浮细胞沉淀，每 1 ml 压积细胞用 10 ml 缓冲液。3. 于室温用漩涡器振荡裂解细胞。4. 加等体积的水饱和酚，充分混匀，于 60
反义技术——RNA干扰（RNA－interference，RNAi）
最近由于RNA干扰（RNA interference，RNAi）的发现使反义领域的研究增多。这种自然发生的现象最早是在秀丽线虫中发现的（1），是序列特异性地使转录后的基因沉默的有力机制。由于最近两年在RNAi领域取得的进步，已经有许多这方面的综述发表（2-4）。RNA干扰是由长的双链 RNA
微量元素
人体所需要的各种微量元素都是从食物中得到补充。由于各种食物所含的微量元素种类和数量不完全相同，所以在平时的饮食中，要做到粗、细粮结合和荤素搭配，不偏食，不挑食，就能基本满足人体对各种元素的需要。反之，可造成某些元素的缺乏。人体缺乏某种微量元素会导致疾病，如缺铁导致贫血；缺锌使免疫力下降并影响发育和智
微量移液器介绍
微量移液器简化了所有的免疫,细胞培养临床诊断及食品分析中经常出现，与酶标板相关的工作。 移液器主要特点：移液杆可360旋转,不用工具可卸下121℃高温灭菌。符合人体工程学的外型设计。符合ISO9000和GLP规定，用户可独立校准。数字可调式移液器校准不需要工具。同时有较高的精度和误差系数。吸头接嘴有
微量质谱仪分类
微量质谱仪分类有多种。1、按分析对象的状态可分：微量原子质谱仪和微量分子质谱仪。2、按分析规模可分：小型微量质谱仪和大型微量质谱仪。3、按分析对象的属性可分：微量有机质谱仪和微量无机质谱仪。4、按进样方式可分：微量扩散进样质谱仪、微量探针进样质谱仪和微量色谱进样质谱仪。5、按用途可分：微量生物质谱仪
微量紫外应用
核酸分析：260/280nm 比值 (光学参比320nm) 测定核酸纯度•蛋白质分析：- 福林酚法(Lowry)- 双缩脲法(Biuret)- 考马斯亮蓝法(Bradford)- 二喹啉酸法(BCA)•动力学测试，如酶活性的测定•标准比色皿或者低至 1μL样品量的超微量测试
微量水分仪
技术特点便携式设计:仪器更轻，携带、使用方便。测量快速:仪器开机后无需等待，即刻测量，快速得到湿度值。快速省气:测定时耗气仅2L(101.2kPa)左右。自锁接头:采用德国原装进口自锁接头，安全可靠，无漏气。数据存储:采用大容量设计，多可存储50组测试数据。显示清晰:液晶屏直接显示露点、微水(ppm
微量移液器简介
微量移液器是一种移取微量液体的新型实验工具,是进行生化实验、微生物学实验和分子生物学实验的必备工具。移液器为量出式量器,分定量移液器和可调移液器两大类。其型式分为单头型和多头型。微量移液器主要包括手动移液器和电子移液器两种。微量移液器的容量规格范围为0.1uL~5mL,满足液体的精确取样和转移的
微量和超微量分析的相关介绍
微量、超微量分析和常量分析主要的差别是取样的不同。一般称样在0.01克~0.001克者为微量分析，小于0.001克者为超微量分析。正因为样品很少，所以在分析操作上也和常量分析很不相同。例如沉淀物的溶解度、指示剂的误差等对常量分析的影响可以忽略，而在微量和超微量分析时就会引起很大的误差。尤其是超微
Quantitating－RNA
RNA quantitation is an important and necessary step prior to most RNA analysis methods. Here we discuss three common methods used to quantitate RNA an
RNA－Electrophoresis
Electrophoresis through agarose or polyacrylamide gels is the standard way to separate, identify and purify nucleic acid fragments. The location of th
RNA－剪接
中文名称RNA 剪接英文名称RNA splicing定 义在真核细胞核中从RNA初始转录物切除内含子，连接外显子形成成熟的mRNA的过程。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞遗传（二级学科）
指导RNA
中文名称指导RNA英文名称guide RNA;gRNA定 义一种小分子RNA，约含60～80个核苷酸，在RNA编辑中起模板作用。其功能是提供核苷酸插入或删除的信息。由小环DNA及大环DNA编码的指导RNA均带有编辑区的序列信息，可介导编辑过程。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），基因表达与调
RNA电泳
· RNA Gel (Crawford Lab)· Gel Electrophoresis of RNA (Beverly Faulkner-Jones)great tips on RNA gel electrophoresis. · Northern
RNA降解
新鲜细胞：如果试剂没有问题，且外源性污染也可以排除，那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如 果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞，一定要使裂解液能覆盖住细胞。 2. 新鲜组织：某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏，胸腺等)，即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免RNA的降解。更可靠的方法是：在液氮条件下将组织
RNA电泳
RNA Gel (Crawford Lab)Gel Electrophoresis of RNA (Beverly Faulkner-Jones)great tips on RNA gel electrophoresis.Northern Gel and TransferUsing glyoxal
RNA提取
RNA提取（主要内容如下）Tips for Handing RNA Total RNA IsolationmRNA IsolationrRNA IsolationOthersQ & A posted in the Method Forum Basic Procedures for Handing
RNA－电泳
①电泳RNA 所用器械如制胶的模具、梳子、电泳槽等用肥皂粉洗干净后用双蒸水冲洗二遍后在室温晾干备用。②用新的1XTBE 配制1. 2 %琼脂糖凝胶,倒胶时溴化乙锭(E直接加入凝胶中。③制备好的琼脂糖凝胶板放入电泳槽后再加入经高压灭菌过的1XTBE ,液面只能刚好同胶面平齐,缓冲液不要淹过胶面。④点样
RNA标记
RNA标记是将标记物（如放射性同位素、荧光素或酶）共价地连接到RNA，通过检测标记物，进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛，在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求： 1. 操作简单，灵敏度高 2. 不影响碱基配对的特异性 3. 不影响RN