指导RNA
中文名称指导RNA英文名称guide RNA;gRNA定 义一种小分子RNA,约含60~80个核苷酸,在RNA编辑中起模板作用。其功能是提供核苷酸插入或删除的信息。由小环DNA及大环DNA编码的指导RNA均带有编辑区的序列信息,可介导编辑过程。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),基因表达与调控(二级学科)......阅读全文
指导RNA
中文名称指导RNA英文名称guide RNA;gRNA定 义一种小分子RNA,约含60~80个核苷酸,在RNA编辑中起模板作用。其功能是提供核苷酸插入或删除的信息。由小环DNA及大环DNA编码的指导RNA均带有编辑区的序列信息,可介导编辑过程。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),基因表达与调
Northern杂交试验指导手册(1)-RNA提取
方法一、改良异硫氰酸胍提取法试剂及其配制异硫氰酸胍变性液:贮存液-在含484ml 水(经DEPC处理), 17.6ml 0.75mol/L柠檬酸钠(pH7.0)和26.4ml10%Sarkosyl的溶液中加入250g异硫氰酸胍,加热至60~65℃并持续搅拌使之充分溶解。贮存液室温保存备用(不超过3个
Northern杂交试验指导手册(5)-RNA探针制备
五、RNA探针制备(根据the DIG system user's guide)A. 地高辛标记的体外转录试剂及其配制(试剂盒提供):10× NTP标记混合物:in Tris-HCl (pH 7.5)10mmol ATP10mmol CTP10mmol GTP6.5mmol UTP3.5mm
Northern杂交试验指导手册(2)-RNA质量检测
二、RNA质量检测提取的RNA需要对其质量和数量进行检测。实验室常用的方法有紫外吸收值检测和电泳检测两种。方法一、紫外吸收检测试剂:TE ( 10mmol/L Tris, 1mmol/LEDTA)。dH2O试验程序1.预热紫外分光光度计10~20min.。2.取两个1ml的狭缝石英杯,一个装入1ml
多位专家指导:如何提取和研究血液DNA,RNA与蛋白
血液是唯一与所有器官都有接触的组织,携带着有关机体的大量宝贵信息。在理论上,检测血液携带的 DNA、RNA、囊泡和细胞残骸可以帮助人们诊断和监控各种疾病。 产前基因筛查是血液检测的一个重要应用,通过分析孕妇血液中的胎儿DNA来鉴定染色体异常(比如唐氏综合症)。此外,越来越多的研究者开始关注血液
移液器校准指导
校准是在移液器正常体积的 100 , 50 和 10 下,通过 10 点测试( 10-point test )移液器操作来证实的。记录这种信息的特殊软件使用是一种可补充和促进文件程序的溶液。如果通过这种测试的结果表明移液器不在规格范围内,则必须进行调整。调整后,移液器必须再次校准,直到结果符合规格
凝胶选择指导
Invitrogen提供了大量的涵盖面广的蛋白分离预制胶,包括不同的成分,百分比浓度和格式。使用合适的胶百分比浓度,缓冲系统,上样孔格式以及胶的厚度,对于获得最好的结果非常重要。以下提供了帮助你选择适合你应用的正确凝胶的信息。E-PAGE™ 96 High-Throughput System是整合的
RNA干扰技术(RNA-interference,RNAi)
1995年,康乃尔大学的Su Guo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫(C. elegans)中的par-1基因时,发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达,而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA(sense RNA)以期观察到基因表达的增强。但得到的结果
RNA干涉(RNA-Interference,RNAi)(1)
基因沉默(gene silencing)是生物体内特定基因由于种种原因不表达的遗传现象。一方面,基因沉默是生物遗传操作创造新的遗传修饰生物(genetically modified organisms)的障碍,另一方面,它又是植物抵抗外来核酸入侵(如病毒)的一种反应,为植物抗病毒的遗传育
RNA干涉(RNA-Interference,RNAi)(2)
早期的 RNAi 技术可用在研究与胚胎发育相关基因的功能上,但是由于细胞分裂造成 dsRNA 的稀释,使得这种方法在研究成体的基因功能时有一定的局限性。为弥补早期 RNAi 技术的不足,Tavernarakis 等将 RNAi 技术做了一些改进及更动,将目的基因之标的序列以反向重复的方式,由
RNA提取时RNA降解原因
1 ) 新鲜细胞: 裂解液的量不足,使得裂解不充分。 2 ) 新鲜组织: 某些含有内源性核酸酶的样品,很难避免RNA酶的降解,建议采用的方法为在液氮条件下将组织研碎,并且,匀浆时采用更多的裂解液。 3 ) 冷冻样品: 样品取材后应该迅速置于液氮中冷冻存放,然后转移到-70℃冰箱存
RNA提取心得(组织RNA提取和培养细胞的RNA提取)
一.组织RNA提取 1.最好新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好,这是肯定的。 2. 如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到0-4℃,注意不要拿到常温,待组织解冻后,用 DEPC泡过的剪刀剪一小块组织,称重后,放到预冷的匀浆器中,然后
RNA分离与分析实验_分离RNA
实验材料标记细胞试剂、试剂盒乙酸缓冲液仪器、耗材漩涡器实验步骤1. 收获标记细胞。2. 小心处置上清液,用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸缓冲液悬浮细胞沉淀,每 1 ml 压积细胞用 10 ml 缓冲液。3. 于室温用漩涡器振荡裂解细胞。4. 加等体积的水饱和酚,充分混匀,于 60
反义技术——RNA干扰(RNA-interference,RNAi)
最近由于RNA干扰(RNA interference,RNAi)的发现使反义领域的研究增多。这种自然发生的现象最早是在秀丽线虫中发现的(1),是序列特异性地使转录后的基因沉默的有力机制。由于最近两年在RNAi领域取得的进步,已经有许多这方面的综述发表(2-4)。RNA干扰是由长的双链 RNA
RNA干扰相关知识RNARITS)
RNA-induced initiation of transcriptional gene silencing(RITS):是一种组织染色质变型的复合物。RITS复合物也包含Dicer加工形成的siRNA和AGO蛋白质,通过结合到异染色质的基因池上来促使异染色质上基因的沉默。
RNA干扰相关知识RNARISC
RNA-induced silencing complex(RISC):一种RNA-蛋白质复合物,通过与目标mRNA完全或者部分的互补配对来实施切割或者翻译抑制功能。SiRNA组装siRISC,miRNA组装miRISC。RISCs(无论siRISC还是miRISC)包括两种类型:切割型和不切割型。
FDA发布儿童肿瘤药物研究指导草案-以问答形式提供指导
FDA发布了一篇关于儿童肿瘤药物研究的指导草案,目的是向企业研究机构等提供关于提交初步儿童肿瘤药物研究计划(ipsP)的信息,这份草案以问答形式提供指导,解决最常见的问题。FDA表示这份没有规定法律上可执行的责任,只是描述了FDA目前对儿童肿瘤药物研究的想法。这份指导草案将2020年8月18日作为
DNA转化实验指导3
6. Simultaneous digestion of the pUC vector with both enzymes in the presence of 3 units of Shrimp Alkaline Phosphatase (Amersham BioSciences) in
指导本科生科研
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2022/10/488186.shtm
DNA转化实验指导4
2B. Transformation 1. Preparation of electrocompetent DH5a cells: autoclave 4 baffled 1 liter flasks containing 500 mL LB. Remove a 1 mL aliquo
DNA转化实验指导1
CONTENT Transformation-Competent E. coli preparation Inoue "ultra-competent" methodRubidium chloride methodCosmid packaging protocol DNA Ligation an
DNA转化实验指导5
2C. Notes on Transformation 1. Bacto tryptone and yeast extract can cause allergic reactions. 2. All containers used to handle the bacteria (
pH电极使用维护指导
当电极玷污导致性能下降或不能使用时,请试图按以下方式清洗后再校正,有可能使电极得以恢复,否则请购买新电极: 1.用0.1mol/L HCl 或HNO3浸泡半小时,然后再用贮存液浸泡1小时。 2.电极沉积物的清洗: 1)蛋白质:用1%胃蛋白酶的盐酸溶液(HCl浓度为0.1mol/L)浸泡15分钟,或用
Northern杂交试验指导手册
Northern杂交试验指导手册DIG标记的Northern杂交试验指导一、 RNA提取方法一、改良异硫氰酸胍提取法试剂及其配制异硫氰酸胍变性液:贮存液-在含484ml 水(经DEPC处理), 17.6ml 0.75mol/L柠檬酸钠(pH7.0)和26.4ml10%Sarkosyl的溶液中加入25
DNA转化实验指导2
1B. Cloning 1. A caveat on dephosphorylation: the most common reason for failure to obtain colonies is a result of adding too much BAP or CIP to
真空泵安装指导
1、泵应安装在地面结实坚固的场所,周围应留有充分的余地,便于检查、维护、保养。 2、泵底座下应保持地基水平,底座四角处建议垫减震橡皮或用螺栓浇制安装,确保泵运转平稳,振动小。 3、泵与系统的连接管道应密封可靠,对小泵可采用金属管路连接密封垫采用耐油橡胶,对小泵可采用真空胶管连接,管道管径不得
QNix-8500测厚仪操作指导
Nix 8500是全球*一的,您可以在内置,电缆连接和无线电控制探头之间进行选择,从而灵活地解决了以前无法满足的苛刻应用的涂层测厚仪。QNix 8500的主机和探头组成一个模块化系统,使您可以通过任何方式将手持式仪器与可用的探头结合在一起。 为此,请直接将探头与仪器连接或使用适配器电缆。 可以在距仪
布洛芬的临床应用指导
布洛芬因其抗炎、解热和镇痛效果确切,不良反应小,与阿司匹林、对乙酰氨基酚并列成为解热镇痛的三大支柱药物。 1 布洛芬的药理作用 1.1药理作用 该药通过抑制环氧化酶,减少前列腺素的合成,而产生镇痛、抗炎作用,通过下丘脑体温调节中枢而起解热作用。本药用于治疗痛经的机制可能是应用其对前
涂层测厚仪的分类指导
涂层测厚仪的分类 首先带大家了解下涂层测厚仪的分类!对材料表面保护、装饰形成的覆盖层,如涂层、镀层、敷层、贴层、化学生成膜等,在有关国家和国际标准中称为覆层(coating)。 覆层厚度测量已成为加工工业、表面工程质量检测的重要一环,是产品达到优等质量标准的必备手段。为使产品国际化,我国出口商
吹膜机操作指导书
一.开机前准备:1.检查各控制开关,要求各控制开关处于关闭位置。2.合上电源总开关。3.打开模头上的加热开关和三台挤出机机身上4、5、6区的加热开关,设定各加热器的温度到120℃开始对模头和机身加温。4.检查各导辊是否清洁、运转是否灵活,用酒精把电晕机胶辊和各导辊擦洗干净。5.空转检查上牵引、下牵引