mRNA的S1作图实验

实验材料 mRNA试剂、试剂盒 琼脂糖电泳缓冲液ATP寡聚核苷酸引物多核苷酸激酶缓冲液T4仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤一、图片简介 二、实验步骤 1. 用1×碱性制胶缓冲液制备1.2%的低融点琼脂糖,并将凝固好的胶在1×碱性电泳缓冲液中浸泡过夜。 2. 将以下试剂混合以制备磷酰化的寡聚核苷酸:(1)20 μl [γ-32P]ATP(10 mCi/ml,共200 μCi)(2)1 μl 100 μg/ml 寡聚核苷酸引物(3)25 μl 10×多核苷酸激酶缓冲液(4)4 U T4多核苷酸激酶(5)30℃反应30 min 后,65℃加热5 min 灭火激酶。3. 将溶于55 μl 水的18 μg 单链模板DNA和9 μl 10×TM缓冲液加入已磷酸化的寡聚核苷酸中,40℃杂交15 min。 4. ......阅读全文

mRNA的S1作图实验

M13模板 双链模板             实验材料 mRNA 试剂、试剂盒

mRNA的S1作图实验

实验材料 mRNA试剂、试剂盒 琼脂糖电泳缓冲液ATP寡聚核苷酸引物多核苷酸激酶缓冲液T4仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤一、图片简介 二、实验步骤 1.  用1×碱性制胶缓冲液制备1.2%的低融点琼脂糖,并将凝固好的胶在1×碱性电泳缓冲液中浸泡过夜。 2.  将以下试剂混合以制备磷酰化的寡

mRNA的S1作图实验——双链模板

实验材料mRNA试剂、试剂盒NaOHEDTA乙酸铵仪器、耗材离心机蒸发器实验步骤1.  对于18 μg DNA溶液,加入10×NaOH/EDTA溶液至1×的浓度,在室温放置5 min。2.  加入1.5倍体积的1.5 mol/l pH4.5乙酸铵缓冲液中和。3.  加2.5倍体积乙醇-70℃沉淀15

mRNA的S1作图实验——M13模板

S1作图能用以确定RNA的5’端和内含子边界。实验材料mRNA试剂、试剂盒琼脂糖电泳缓冲液ATP寡聚核苷酸引物多核苷酸激酶缓冲液T4仪器、耗材离心机分光光度计摇床实验步骤一、图片简介 二、实验步骤 1.  用1×碱性制胶缓冲液制备1.2%的低融点琼脂糖,并将凝固好的胶在1×碱性电泳缓冲液中浸泡过夜。

用S1核酸酶对RNA作图

            实验方法原理 三种不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用来进行 RNA 定量,确定内含子位置,以及用来鉴定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5' 端和 3' 端的位置。当检测 RNA 被杂交到

用S1核酸酶对RNA作图

三种不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用来进行 RNA 定量,确定内含子位置,以及用来鉴定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5' 端和 3' 端的位置。当检测 RNA 被杂交到 DNA 模板上时,用核酸酶 S1 进行保护试验的分析;当检测 RNA 被杂交

用S1核酸酶对RNA作图

实验方法原理 三种不同的核酸酶——S1 核酸酶、RNA 酶、外切核酸酶Ⅶ被用来进行 RNA 定量,确定内含子位置,以及用来鉴定在克隆的 DNA 模板上的 mRNA 的 5' 端和 3' 端的位置。当检测 RNA 被杂交到 DNA 模板上时,用核酸酶 S1 进行保护试验的分析;

S1核酸酶作图的方法和原理

三种不同的核酸酶——S1核酸酶、RNA酶、外切核酸酶Ⅶ被用来进行RNA定量,确定内含子位置,以及用来鉴定在克隆的DNA模板上的mRNA 5′端和3′端的位置。当检测RNA被杂交到DNA模板上时,用核酸酶S1进行保护试验的分析;当检测RNA被杂交到来自DNA模板的RNA上时用RNA酶。外切核酸酶Ⅶ有更

DNA作图实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 限制酶缓冲液仪器、耗材 电泳仪实验步骤   用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。2.  从每个反应取小份样品作电泳分析,用已知的分子量标准作对照。剩余的样品置于冰浴。3.  比较分子量标准估算出DNA片段的长度,推导出每种限制性内切酶的酶切位点数目。4. 

DNA作图实验

多种酶消化 限制酶部分消化             实验方法原理 应用遗传学技术构建能显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。

减数分裂作图实验

实验材料酵母菌株试剂、试剂盒消解酶 100T仪器、耗材毛细吸管头强力胶水光学玻璃纤维YPD平板YPD培养管实验步骤第 1 天显微针的制备四分体解剖针可以通过手工拉制细玻璃丝或使用「技术和方案 23, 制备四分体解剖针」中描述的光学纤维玻璃丝来制备。将会演示针的准备过程并且提供给你一些必需品,以便你可

DNA作图实验——多种酶消化

主要用于显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。实验方法原理应用遗传学技术构建能显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。实验材料DNA试剂、试剂盒限制酶缓冲液仪器、耗材电泳仪实验步骤1.  用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。 2.  从每个反应取小份样品作电泳分析,用已知的分

减数分裂作图实验

实验材料 酵母菌株试剂、试剂盒 消解酶 100T仪器、耗材 毛细吸管头强力胶水光学玻璃纤维YPD平板YPD培养管实验步骤 第 1 天显微针的制备四分体解剖针可以通过手工拉制细玻璃丝或使用「技术和方案 23, 制备四分体解剖针」中描述的光学纤维玻璃丝来制备。将会演示针的准备过程并且提供给你一些必需品,

DNA作图实验——限制酶部分消化

实验材料DNA试剂、试剂盒限制酶缓冲液仪器、耗材电泳仪实验步骤1.  用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。2.  用32P末端标记消化产物,5’末端可先用小牛肠碱性磷酸酶处理。3.  用T4多核苷酸激酶进行标记。4.  3’末端可先用大肠扞菌DNA聚合酶ⅠKlenow片段或T4 DNA

mRNA-的分离实验

oligo(dT)-纤维素亲和层析法             实验方法原理  哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以

mRNA-的分离实验

实验方法原理 哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNA。实验步骤1.  用0.1 mol/L NaOH悬浮0.5~1.0 goligo(dT)-纤维素。 2.  将悬浮液装入灭菌的一次性层

mRNA的提取及纯化实验

磁珠法 亲和柱层析法 亲和柱层析法             实验材料 mRNA

单细胞mRNA差异显示实验

目前有几种方法可以显示生理刺激下组织样本中未知基因的表达水平变化。然而, 很多组织内的细胞又存在形态和功能上的异质性,因此常常需要从单个细胞水平研究基因表达的差异。现在,我们介绍一种新方法,它常规用来在单细胞水平考察未知基因的差异性表达。现代神经科学研究技术作者:U.Windhorst & H. J

mRNA的提取及纯化实验

实验材料 mRNA试剂、试剂盒 mRNA分离试剂盒异丙醇NaAC仪器、耗材 仪器水浴离心机取液器分光光度计实验步骤 一、生物素标记的Oligo(dT)探针与mRNA的煺火1.  在DEPC处理过的1.5 ml Eppendof管中,加入0.2-1 mg 的总RNA和无RNase的水至终体积为0.5

mRNA-的-PCR-差异显示实验

对应于 mRNA 的 DNA 序列,可以被回收、克隆、测序,可以用作杂交或筛库的探针。来源:《精编分子生物学实验指南(第五版)》实验材料人的细胞总 RNA 或 poly(A)+ RNA试剂、试剂盒人胎盘 RNase 抑制剂DNase ITris·ClKClMgCl23:1 (V V) 苯酚 氯仿乙酸

单细胞mRNA差异显示实验

            实验方法原理 ##流程图 试剂、试剂盒 溶液和缓冲液 仪器、耗材

mRNA-的-PCR-差异显示实验

            实验方法原理 实验材料 人的细胞总 RNA 或 poly(A)+ RNA 试剂、试剂盒

单细胞mRNA差异显示实验

实验方法原理 ##流程图试剂、试剂盒 溶液和缓冲液仪器、耗材 水浴槽PCR热循环仪微量离心机塑料制品和滤器实验步骤 一、RNA 的分离收集对照组和实验组细胞,放入含 45ul2 mmol/L DTT 的 1.5 ml 微量离心管中。95℃ 水浴热解 2 min。每管加入以下物质:37℃ 温育 30

mRNA-的-PCR-差异显示实验

实验方法原理 实验材料 人的细胞总 RNA 或 poly(A)+ RNA试剂、试剂盒 人胎盘 RNase 抑制剂DNase ITris·ClKClMgCl23:1 (V V) 苯酚 氯仿乙酸钠乙醇DEPC 处理的水简并锚定 oligo(dT) 引物组合MoMuLV 逆转录酶缓冲液DTT4dN

免疫学实验血清前S1蛋白介绍

  血清前S1蛋白介绍:   血清前S1蛋白:前S1蛋白(preS1)是构成乙型肝炎病毒衣壳蛋白的重要成分,它含有肝细胞膜受体,在HBV感染肝细胞和机体免疫应答反应中起重要作用。采用ELISA法对患者HBsAg阳性标本进行了preS1和血清标志物检测。   血清前S1蛋白正常值:   前S1蛋

什么是转录作图?

中文名称转录作图英文名称transcription mapping定  义标明转录物序列在基因组上的位置。应用学科遗传学(一级学科),基因组学(二级学科)

什么是基因作图?

基因作图(英文gene mapping)是一种遗传学作图,用来定位染色体中特定的DNA片段。是基因组研究的成果之一,主要分为以重组率为定位依据的遗传舆图,以及以DNA片段实际位置为依据的物理舆图,两这各有不同用途与优缺点。

什么是RNA作图?

中文名称RNA作图英文名称RNA mapping定  义对RNA分子在基因上的定位分析。将RNA与相应的DNA杂交后,用单链特异性核酸酶(常用的如S1核酸酶)切去不发生杂交的单链部分,用以分析RNA与相应DNA的关系,包括确定RNA的5′和3′端、外显子和内含子在DNA上的相应位置等。应用学科生物化

糖作图的概念

中文名称糖作图英文名称carbohydrate mapping定  义利用各种分析方法(如层析、电泳、质谱、核磁共振等)研究糖的组成时所得到结果的图示化。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

粒度分析的作图

粒度分析的结果,可按表6-3所示的格式整理,然后作出直方图、频率曲线图、累积曲线图和概率累积曲线图(图6-5,图6-6)。图的横坐标表示颗粒大小,纵坐标表示百分数或累积百分数。直方图是广泛使用的一种粒度分布的图解形式,以并排高低不同的矩形表示各粒级百分比。如果把每个矩形顶连点连接成一平滑曲线,即成频