血清IgG的分离制备—盐析法
原理IgG是免疫球蛋白(Immunoglobulin,简称IgG)的主要成分之一,分子量约为15万~16万,沉降生活费数约为7s。IgG是动物和人体血浆的重要成分之一。血浆蛋白质的成分多达70余种,要从血浆中分离出IgG,首先要进行尽可能除去其他蛋白质成分的粗分离程序,使IgG在样品中比例大为增高,然后再纯化而获得IgG。盐析法是粗分离蛋白质的重要方法之一。许多蛋白质在纯水或低盐溶液中溶解度较低,若稍加一些无机盐则溶解度增加,这种现象称为“盐溶”(Salting in)。而当盐浓度继续增加到某一浓度时,蛋白质又变得不深而自动析出,这种现象称为“盐析‘(Salting out)。这些现象的原理大致是由于蛋白质是亲水胶体,带有羧基解离的负电荷或氨基解离的正电荷,其极性基团使分子间相互排斥,同时与水分子形成水膜,这些因素保证蛋白质形成溶于水的溶胶状态。当加入少量盐时,增多了蛋白质分子上的极性基团,因而增大了蛋白质在水中溶解度,......阅读全文
血清免疫球蛋白G(IgG)的概述
免疫球蛋白G(IgG)是在脾脏和淋巴结中合成,在人体血清中的含量最高(占Ig量的75%),而且在血清中半衰期长,主要分布在血清和组织液中,是抗细菌、抗毒素和抗病毒抗体的主要组成部分,也是机体抗感染免疫的过程中的重要物质基础。由于IgG的含量最高,是人体免疫反应的最重要的物质基础,而且它也是唯一能
人体血清免疫球蛋白IgG是什么?
人体血清免疫球蛋白IgG是什么?人体血清免疫球蛋白IgG是初级免疫应答中最持久、最重要的抗体,它仅以单体形式存在。血清中含量最高的免疫球蛋白,是血液和细胞外液中的主要抗体。大多是抗菌性、抗毒性和抗病毒抗体属于IgG,它在抗感染中起到主力军作用,它能够促进单核巨噬细胞的吞噬作用(调理作用),中和细菌毒
DEAE离子交换剂纯化血清IgG
原理离子交换是指液相中的离子与固定相上可解离基团的可逆交换反应。利用这个反应先将要分离的混合物在一定pH的溶液中解离,而后流经固定相,使之与固定相上的可解离基团进行离子交换,吸附于固定相上,凡不能进行交换吸附的成分,则流出层析柱外。再根据交换吸附于固定相上的各组分解离度的差别,运用不同的pH值或不同
血清IgG、IgA、IgM测定方法有哪些呢
(一)单向环状免疫扩散法 原理:将抗血清均匀地分散于琼脂或琼脂糖凝胶内,胶板上打孔,孔内注入抗原或待测血清,抗原在含有抗血清的胶内呈放射状(环状)扩散,在抗原抗体达到一定比例时形成可见的沉淀环。在一定条件下,抗原含量越高,沉淀环越大。 本法出现误差的原因有: ①抗原或标准液溢出加样孔;
蛋白质盐析分离法介绍
摘要 : 盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低,导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出,最后经离心机分离后获得沉淀物和上清液。一、蛋白质盐析分离的原理:蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶),当盐浓度增大到一定数值
食品样品预处理传统方法盐析法
向溶液中加入某种无机盐,使溶质在原溶剂中的溶解度大大降低而从溶液中沉淀析出。这种方法叫作盐析。如在蛋白质溶液中,加入大量的盐类,特别是加入重金属盐,使蛋白质从溶液中沉淀出来。在进行盐析工作时,应注意溶液中所要加入的物质的选择,它不会破坏溶液中所要析出的物质,否则达不到盐析提取的目的。
盐析法沉淀蛋白质的原理
1 中性盐沉淀(盐析法) 在溶液中加入中性盐使生物大分子沉淀析出的过程称为“盐析”。除了蛋白质和酶以外,多肽、多糖和核酸等都可以用盐析法进行沉淀分离。 盐析法应用最广的还是在蛋白质领域,已有八十多年的历史,其突出的优点是: ①成本低,不需要特别昂贵的设备。 ②操作简单、安全。 ③对许多生物
蛋白质的盐析分离法
一、蛋白质盐析分离的原理:蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶),当盐浓度增大到一定数值时,其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低,导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出,最后经离心
盐析法沉淀蛋白质的原理
盐析法沉淀蛋白质的原理是:降低蛋白质的电常数,调节蛋白质溶液的等电点,与蛋白结合形成不溶性盐,使蛋白质溶液呈电中性,破坏了水化膜,从而会使得蛋白质凝聚,最终从溶液中析出。蛋白质在水溶液中的溶解度是由蛋白质周围亲水基团与水形成水化膜的程度,以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。当用中性盐加入蛋白质溶液,
蛋白质的盐析分离法
一、蛋白质盐析分离的原理:蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶),当盐浓度增大到一定数值时,其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低,导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出,zui后经
血清免疫球蛋白G(IgG)的相关疾病
小儿共济失调毛细血管扩张Ⅰ型综合征,迟发性低丙球血症,原发性免疫缺陷病,选择性IgA缺乏症,自身免疫性胰腺炎,小儿自身免疫性溶血性贫血伴血小板减少综合征,小儿普通易变型免疫缺陷,小儿选择性免疫球蛋白A缺乏症,小儿选择性免疫球蛋白G亚类缺陷病,小儿X-连锁无丙种球蛋白血症
血清免疫球蛋白G(IgG)临床意义
(1)升高 ①结缔组织病系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、硬皮病、Sjögren综合征(斯约格伦氏综合征、干燥综合征)等。 ②IgG型多发性骨髓瘤、原发性单克隆丙种球蛋白血症。 ③肝脏病慢性病毒性活动性肝炎、隐慝性肝硬化、狼疮样肝炎等。 ④传染病结核、麻风、黑热病、传染性单核细胞增多症、性
血清免疫球蛋白IgG4的认识
IgG4相关疾病的认识IgG4相关疾病(IgG4-related disease,IgG4-RD)是一组2010年首次命名的系统性炎症纤维化疾病,已受到国内外学者的广泛关注,是一组原因不明的慢性进行性自身免疫性疾病。其受累器官广泛,几乎可累及全身各个器官,多器官同时或相继受累,也可只累及某一器官,可
辛酸/硫酸铵法提纯IgG
一、原理在酸性条件下( pH4.5),非1gG的蛋白成份(包括白蛋白,部分Ig),能被辛酸等短链脂肪酸沉淀,上清中剩余的蛋白主要为IgG,再用硫酸铵沉淀上清,即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。二、材料与方法1、材料(1)动物腹水(2)辛酸(caprylic
辛酸/硫酸铵法提纯IgG
一、原理 在酸性条件下( pH4.5),非1gG的蛋白成份(包括白蛋白,部分Ig),能被辛酸等短链脂肪酸沉淀,上清中剩余的蛋白主要为IgG,再用硫酸铵沉淀上清,即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。 二、材料与方法 1、材料 (1)动物腹水 (2)辛酸(capr
辛酸/硫酸铵法提纯IgG
实验概要本实验介绍了辛酸/硫酸铵法提纯IgG的原理和主要步骤。实验原理在酸性条件下( pH4.5),非1gG的蛋白成份(包括白蛋白,部分Ig),能被辛酸等短链脂肪酸沉淀,上清中剩余的蛋白主要为IgG,再用硫酸铵沉淀上清,即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。主要
辛酸/硫酸铵法提纯IgG
实验概要本实验介绍了辛酸/硫酸铵法提纯IgG的原理和主要步骤。实验原理在酸性条件下( pH4.5),非1gG的蛋白成份(包括白蛋白,部分Ig),能被辛酸等短链脂肪酸沉淀,上清中剩余的蛋白主要为IgG,再用硫酸铵沉淀上清,即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。主要
免疫球蛋白提取技术
免疫球蛋白提取技术 实验方法原理 随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,但大多数采用二步法以上相
盐析法得到的蛋白质如何脱盐
常用的是凝胶过滤层析脱盐,利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。蛋白质溶液中盐分子和蛋白质分子大小相差较大,盐分子较小,会随着层析流动相进入孔径较小的固定相,在层析中迁移速率小,而蛋白质分子尺寸较大,不能随流动相进入固定相,迁移速率大,首先从层析术中流出,实现脱
冻干机冻干蛋白质及盐析法
在冷冻干燥过程中 ,加热温度高、升温速率快将使干燥时间缩短 ,但同时过高的加热温度和过快的升温速率将导致蛋白质失去活性。以玻璃态存在的保护剂呈现出复杂的特性 ,当低于解链温度时 ,玻璃态物质具有粘度大和易脆的特点。当温度超过解链温度 ,玻璃态物质变软 ,随着干燥的进行 ,不断变型以至形成坍塌而失去活
盐析法得到的蛋白质如何脱盐
常用的是凝胶过滤层析脱盐,利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。蛋白质溶液中盐分子和蛋白质分子大小相差较大,盐分子较小,会随着层析流动相进入孔径较小的固定相,在层析中迁移速率小,而蛋白质分子尺寸较大,不能随流动相进入固定相,迁移速率大,首先从层析术中流出,实现脱
盐析法得到的蛋白质如何脱盐
常用的是凝胶过滤层析脱盐,利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。蛋白质溶液中盐分子和蛋白质分子大小相差较大,盐分子较小,会随着层析流动相进入孔径较小的固定相,在层析中迁移速率小,而蛋白质分子尺寸较大,不能随流动相进入固定相,迁移速率大,首先从层析术中流出,实现脱
抗血清的纯化技术生化检验
抗血清的纯化技术:纯化的目的是尽量去除抗血清中与目的抗体不相关的成分,防止与特定抗原反应时起干扰作用。最常见的纯化方式是提取特异性IgG或单价特异性抗血清。一、特异性IgG抗血清制备首先用硫酸铵或硫酸钠盐析法粗提丙种球蛋白,再进一步纯化,常用的方法有:1.离子交换层析法:离子交换剂有DEAE纤维素和
从elisa试剂盒的组成到实验,抗体到底有多重要?
很多朋友都知道,在酶联免疫法的试剂盒中,抗体具有一定的重要性,上海elisa生物技术(劲马)在这新的一周中,为您分析:从elisa试剂盒的组成到实验,抗体到底有多重要?包被固相载体的抗体应具有高亲和力和高特异性,可取材于抗血清或含单克隆抗体的腹水或培养液。如免疫用抗原中含有杂质,在抗血清中将出现杂抗
免疫球蛋白提取技术(一)
免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)的含量代表着机体体液免疫的水平,并进一步代表着B细胞的功能,因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,但大多数
免疫球蛋白提取技术
免疫球蛋白提取技术可应用于:(1)推知机体的体液免疫功能;(2)诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。实验方法原理随着免疫学的发展和需要,免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多,有单一法,但大多数采用二步法以上相结合的方法,特别是以硫酸铵提纯为基础,再经过层析柱的方法来提高免
关于血清免疫球蛋白G(IgG)的基本介绍
免疫球蛋白G(IgG)是在脾脏和淋巴结中合成,在人体血清中的含量最高(占Ig量的75%),而且在血清中半衰期长,主要分布在血清和组织液中,是抗细菌、抗毒素和抗病毒抗体的主要组成部分,也是机体抗感染免疫的过程中的重要物质基础。由于IgG的含量最高,是人体免疫反应的最重要的物质基础,而且它也是唯一能
血清免疫球蛋白G(IgG)的临床意义
(1)升高: ①结缔组织病:系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、硬皮病、Sjögren综合征(斯约格伦氏综合征、干燥综合征)等。 ②IgG型多发性骨髓瘤、原发性单克隆丙种球蛋白血症。 ③肝脏病:慢性病毒性活动性肝炎、隐慝性肝硬化、狼疮样肝炎等。 ④传染病:结核、麻风、黑热病、传染性单核细胞增
血清免疫球蛋白G(IgG)的注意事项
一、抽血前的注意事项 1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。 2、体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。 3、抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。 二、抽血后应注意 1、抽血后,需在针孔
血清IgG、IgA、IgM测定的临床意义是什么?
(一)年龄 新生儿可由母体获得通过胎盘转移来的IgG,故血液中含量较高,接近成人水平。婴幼儿其体液免疫功能尚不成熟,Ig含量低于成人。 (二)免疫球蛋白IgG、IgA、IgM均升高 慢性肝脏疾病如慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、隐匿性肝硬化患者血清中可见3种Ig均升高。慢性细菌感染如慢