有丝分裂(Feulgen染色)制片技术
实验概要 1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。 实验原理 有丝分裂(mitosis)是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内染色体准确地复制,并有规律地、均匀地分配到两个子细胞中去,保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中,如根尖组织、茎尖组织、居间分生组织、愈伤组织等,每天都有分裂高锋时间,此时经预处理,固定、解离、染色和涂抹压片等方法,在显微镜下可以观察到处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。 孚尔根染色法是鉴别细胞中DNA反应的组织化学方法。细胞内的DNA(通常位于核及染色体上)在1N HCl 60℃水解时部分地破坏了脱氧核糖与嘌呤碱之间的糖苷键而使嘌呤碱脱掉,从而使脱氧核糖的第一个碳原......阅读全文
有丝分裂(Feulgen染色)制片技术
实验概要 1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。 实验原理 有丝分裂(mitosis)是植物
有丝分裂(Feulgen染色)制片技术
实验概要1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。实验原理有丝分裂(mitosis)是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内染色体准确地复制,并有规
有丝分裂(Feulgen染色法)
实验原理:细胞中的DNA受1NHC1,60℃水解作用以后,核酸中的嘌呤碱很快完全被除掉,使脱氧核糖中潜在的醛基获得自由状态。水解后,组织要经水洗再移至希夫(Schiff)试剂中,希夫试剂即同露出来的醛基发生反应,呈现紫红色。这个反应是Feulgen在1942年提出来的,是DNA的一个特异性检查法。
病理制片技术——常规染色
苏木精(hematoxylin)和伊(eosin)染色方法,简称HE染色方法,是生物学、细胞学与组织学最广泛应用的染色方法。在病理科称为常规染色 方法。病理学的诊断都是以HE方法为基础的。染色的目的是把组织切片或细胞涂片等浸入染料及其他染色剂配成的染色液中,经过适当的时间和处理,
病理制片技术——常用特殊染色
1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1
果蝇唾腺染色体制片技术
实验概要1、练习分离果蝇幼虫唾腺的技术,学习唾腺染色体的制片方法; 2、观察果蝇唾腺的形态学及遗传学特征; 3、了解体细胞染色体配对现象;实验原理本世纪初,D.Kostoff用压片法首先在D.melanogaster果蝇幼虫的唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体—唾液腺染色体(salivary
动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片材料、原理和步骤2
2.第3步可省去,改用1ml 注射器直接钻入骨末端即可,避免剪去骨骺时损失过多骨髓细胞; 3.在分离股骨大转子一端时,应防止折断股骨头; 4.如有需要,细胞悬液可用尼龙网过滤,进一步去除骨碎片及杂质。 四、实验结果及思考题 1.在低倍及中倍镜下观察Giemsa染色之后的染色体制片,寻
动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片材料、原理和步骤1
实验九 动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片 一、实验目的: 了解动物细胞染色体制片的原理,学习骨髓细胞染色体的制片方法,观察动物细胞染色体的数目和形态。 二、实验原理: 染色体是基因的载体。真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传指标之一。制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色
DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理实验目的: 学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。实验原理: DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,
DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理 实验目的: 学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。 实验原理: DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚
DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理实验目的:学习DNA的Feulgen染色方法,观察染色结果,了解反应原理。实验原理:DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,使细胞内含有
培养细胞的染色实验——Feulgen染色法
实验方法原理此染色法为Feulgen早在1924年提出的一种鉴别细胞中DNA的组织化学方法。细胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解离脱氧核糖核酸,使嘌呤碱基与糖苷犍破坏,嘌呤碱脱掉,脱氧核糖的中的醛基游离;醛基能与Schiff试剂相结合,形成一种紫色的复合物。本方法中酸的离解根重要,若温度过低
染色体制片
实验概要掌握染色体制片的基本程序。实验步骤1. 取对数生长期细胞一个。2. 将培养基换成10mL DMEM(H) 10%FBS 0.1μg/mL秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3. 将细胞培养液倒掉,马上加入3~4mL 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后
植物染色体制片
实验概要掌握染色体制片方法,并自选材料进行染色体制片;学会染色体核型分析。主要试剂酒精、冰醋酸、甲醇、盐酸、铁矾、苏木精(或洋红、石炭酸品红)、秋水仙碱(或对二氯苯饱和水溶液、8-羟基奎啉、富民隆乳剂)、二甲苯、中性树胶、石碳酸、甲醛、山梨醇等。主要设备显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、吸水纸、纱布块、
染色体制片步骤
1、取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。2、将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3、将细胞培养液倒掉,马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后,马上加入终止液终止消化,并将分
细胞染色制片方法
1、 取对数生长期细胞一个T75或T25瓶。2、 将培养基换成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培养基,处理1~2小时。3、 将细胞培养液倒掉,马上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即摇晃0.5~1min。当在显微镜下看到分裂相细胞脱壁后,马上加入终止
显微制片染色剂
染色剂3.4 苏丹Ⅲ试液 此液可使木栓化、角质化细胞壁及脂肪油、挥发油、树脂等染成红色或淡红色。3.5 钌红试液(临用新制)此液可使粘液染成红色。3.6 间苯三酚试液 此液与浓盐酸合用,可使木化细胞壁染成红色或紫红色。3.7 碘试液(临用现配。应置棕色瓶内保存)此液可使淀粉染成蓝色或紫
小白鼠骨髓细胞染色体制片技术
实验概要1、掌握哺乳动物骨髓细胞染色体玻片标本的制备方法。 2、观察动物染色体的形态特征,统计小白鼠体细胞中染色体数目。实验原理制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。 制备动物染色体标本原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬液中
显微制片技术
显微制片技术 在进行显微鉴别时,首先要将“检样”制成适于镜检的标本。对于完整的药材可制成各种切面的切片;对于粉末药材(包括丸、散等成方)可直接装片或作适当处理后制片。² 永久片制作技术² 临时制片技术² 滑走切片机——半自动切片机² 透射光生物学显微镜² 连续变倍体视显微镜²
果蝇唾腺染色体制片实验
实验方法原理 果蝇唾腺染色体是处于体细胞同源染色体的配对状态,由于多次复制而不分开,因而形成具有1 000-4 000根染色体丝的巨大染色体,又称为多线染色体.,本实验利用剖离果蝇三龄幼虫的唾腺,,压制染色体玻片标本的方法,观察多线染色体的特征。实验材料 果蝇试剂、试剂盒 水醋酸洋红仪器、耗材 解剖
病理制片技术取材
一、概念取材是将送检标本进行客观描述并将病变部位组织切成厚薄适度的小片后装入小盒(进入组织脱水程序),取材至关重要。二、取材环境取材室由取材台、记录桌、标本陈列架、电脑查询等组成;取材台应有良好的排风、进出水系统,配备齐全的刀、剪、镊、尺等基本工具和备用固定剂,记录桌应备 有打号机(无时应用铅笔
植物制片实验技术
实验概要植物制片技术是植物显微技术的一个重要组成部分,在有关植物形态建成、植物杂交育种、作物病虫害防治、药用植物的培育和鉴别以及林木材性鉴定等多方面的研究工作中,都需要应用显微制片技术,本实验介绍了植物制片基本方法。主要试剂1. FAA固定液(福尔马林-冰醋酸-酒精),又称万能固定液或称标准保全液。
植物制片实验技术
实验概要 植物制片技术是植物显微技术的一个重要组成部分,在有关植物形态建成、植物杂交育种、作物病虫害防治、药用植物的培育和鉴别以及林木材性鉴定等多方面的研究工作中,都需要应用显微制片技术,本实验介绍了植物制片基本方法。 主要试剂 1. FAA固定液(福尔马林-冰醋酸
病理制片技术——封片
封片是将组织切片封固保存于载玻片与盖玻片之间,使之不与空气发生接触,防止其氧化、褪色,利于镜检观察及保存。一、手工封片手工封片应注意以下七点。(1)所用树胶浓度要适中,以一般速度滴下并恰能成珠既可。太稀时易溢出玻片,当二甲苯挥发后,组织切片就会收缩产生胶不匀并出现大片气泡。太浓时,滴在玻片上树胶不易
病理制片技术——包埋
一、意义组织块经过固定、脱水、透明、浸蜡等处理后,用包埋剂(如石蜡、树脂、塑料等)将其包制成含组织块的蜡块或塑料块等的过程称为包埋。不同的包埋方法有不同的要求,经包埋后,组织可达到一定的硬度和韧度,有利于切成理想的薄片。二、包埋步骤先将熔化的石蜡注入包埋托内(模具),而后用镊子将经过浸蜡的组织块从脱
植物有丝分裂染色体压片实验
实验方法原理细胞的有丝分裂是一个连续动态的变化过程,但可以通过它的形态变化,特别是细胞核中的染色体行为,人为地划分阶段,并进行比较研究。在自然状态下,一大群处于各个分裂期的细胞混杂在一起。必须仔细观察,寻找有丝分裂过程各期典型形态特征的细胞,从而建立起细胞周期的概念。植物的分生组织(如根尖分生区、茎
有丝分裂的中期染色体运动
用药物(秋水仙素、巯基乙醇等)破坏纺锤体,则染色体不能排列到赤道面,除去药物后,纺锤体重新形成,则染色体又能排列到赤道面,由此可见,染色体向赤道面的排列和纺锤体的活动有关。由辐射损伤或其他原因造成的没有着丝粒的染色体断片不能排列到赤道面上。因此说明,染色体向赤道面的排列和着丝粒的活动有关。用微束
植物有丝分裂染色体压片实验
实验方法原理 实验材料 黑麦 ( Secale cereale) 、 大麦 ( Hordeu m vulgare) 种子或洋葱 ( A llium cepa) 鳞茎试剂、试剂盒 对二氯苯饱和溶液 甲醇 冰醋酸 70 % 酒精 1mol L 盐酸 石炭酸品红染液仪器、耗材 恒温培养箱 恒温水浴锅 显微
DNA显示和细胞有丝分裂相的观察
核酸是生物最重要的组成成分,核酸分为两大类,即脱氧河塘核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。它们在细胞内的分布及化学性质均有所不同。DNA主要分布在核的染色质或有丝分裂过程中出现的染色体内。RNA分布在细胞质和核仁内。但在染色质及染色体中也含有少量的RNA,核仁中也有少量的DNA。在线粒体,叶绿体等细
病理制片技术——组织脱水
组织经固定后会有大量水分,组织脱水是用某些溶剂逐渐将组织内的水分置换出来,以利于透明剂和石蜡的渗入。 一、手工脱水 1.器械准备:大标本缸6个,浸蜡用金属缸3个,脱水篮,恒温烤箱。 2.日常工作程序见表5.1。 表5.1 手工脱水日常工作程序