HRP标记抗体的方法(戊二醛二步法和简易过碘酸钠法)2
（6）PH7.8饱和硫酸铵溶液及半饱和硫酸铵溶液。 （7）萘氏试剂及聚乙二醇(PEG，MW2000)。 （8）纯化的特异性抗体或抗Ig抗体。 （9）HRP(RZ>3.0)。 （10）Sephadex G-25层析柱(2cm×50cm)。 （11）搅拌器，分光光度计，离心机。 （12）透析袋，大、小烧杯，试管，吸管等。 二、简易过碘酸钠法 本法是以NaIO4先将HRP表面的糖分子氧化成醛基，然后再与Ig上的氨基相结合，所获酶标记抗体的产率高，将近70%的 HRP和Ig结合，99%的Ig与酶结合，酶与Ig的活性无重大损失，是目前最常用的方法。 1. 原理 经典的过碘酸钠法中需采用二硝基氟苯封闭HRP上残留的α-和ε氨基基以避免酶分子之间的交联。后来Wilson等改用在低PH下使NaIO4......阅读全文
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和...2
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和生物素标记)（3）移入透析袋中，在1000ml 0.01mol/L PH9.5碳酸盐缓冲液中，4℃透析过夜，更换三次缓冲液，注意避光。 （4）吸取上述醛化好的HRP溶液3ml，加入5mg IgG的碳酸盐缓冲液1ml，室温轻搅2-3小时，避光；加入5m
铁蛋白的鉴定方法介绍
1、电镜鉴定将铁蛋白水溶液滴在有Formvar膜的铜网上用3%磷钨酸染色3min自然干燥后电镜下观察可见含4个电子致密区球型蛋白分子，外被蛋白外壳直径12nm左右，内核7.5nm。 2、抗体和铁蛋白的结合戊二醛作为偶联剂效果较好，对抗体活性影响小。可分为一步法和二步法。戊二醛一步法：在0.9mL的0
关于酶联免疫吸附试验的标记方法介绍
酶联免疫吸附试验的标记方法，良好的酶结合物取决于两个条件：即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要，因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中，抗体的活性有所降低，故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白，最好使用亲和层析提纯的抗体，可提高敏感
关于酶标记法的基本信息介绍
酶标记法：酶与抗体交联，常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行，标记效果好，特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为：将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中，加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠（NaIO4）水溶液0.5ml，混匀置4℃冰箱30
什么是酶标记法？
酶与抗体交联，常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行，标记效果好，特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为：将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中，加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠（NaIO4）水溶液0.5ml，混匀置4℃冰箱30分钟 ，
常用酶标记法介绍
酶与抗体交联，常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行，标记效果好，特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为：将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中，加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠（NaIO4）水溶液0.5ml，混匀置4℃冰箱30分钟 ， 取出
酶联免疫吸附酶标记法的方法特点介绍
酶与抗体交联，常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行，标记效果好，特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为：将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中，加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠（NaIO4）水溶液0.5ml，混匀置4℃冰箱30分钟 ， 取出
酶联免疫吸附试验的标记方法
良好的酶结合物取决于两个条件：即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备 标记抗体至关重要，因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中，抗体的活性有所降低，故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白，最好使用 亲和层析提纯的抗体，可提高敏感性，而且可稀释使用，减少
酶联免疫吸附试验的标记方法
良好的酶结合物取决于两个条件：即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要，因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中，抗体的活性有所降低，故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白，最好使用亲和层析提纯的抗体，可提高敏感性，而且可稀释使用，减少非特异性
酶联免疫吸附试验的标记方法
良好的酶结合物取决于两个条件：即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备 标记抗体至关重要，因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中，抗体的活性有所降低，故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白，最好使用 亲和层析提纯的抗体，可提高敏感性，而且可稀释使用，减少
ELISA方法的标记方法介绍
良好的酶结合物取决于两个条件：即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要，因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中，抗体的活性有所降低，故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白，最好使用亲和层析提纯的抗体，可提高敏感性，而且可稀释使用，减少非特异性
酶联免疫吸附试验的标记方法
抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要，因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。 在酶标记过程中，抗体的活性有所降低，故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白，最好使用亲和层析提纯的抗体，可提高敏感性，而且可稀释使用，减少非特异性吸附。 酶与抗体交联，常用戊二醛法和过碘酸
ELISA方法的基本类型、用途及操作程序
抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要，因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。 在酶标记过程中，抗体的活性有所降低，故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白，最好使用亲和层析提纯的抗体，可提高敏感性，而且可稀释使用，减少非特异性吸附。 酶与抗体交联，常用戊二醛法和过碘酸盐氧化
ELISA的试剂2
3.1.3 包被用抗原 用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等，须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取，一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取，蛋白成份抗原可从富含此抗原的材料中提取等（例
酶标抗体的质量鉴定与保存
1． 酶活性和抗体效价测定 采用双向免疫扩散法（稀释抗体）和DAB-H2O2显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。 2． 酶量和IgG量 酶量（mg/ml）=OD403´0.4 IgG量（mg/ml）=（OD280-OD402´0.42）´0.94´0.62
酶标抗体的质量鉴定与保存
1． 酶活性和抗体效价测定采用双向免疫扩散法（稀释抗体）和DAB-H2O2 显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。2． 酶量和IgG量酶量（mg/ml）=OD403 ′0.4IgG量（mg/ml）=（OD280- OD402 ′0.42）′0.94′0.62其中，0.42为酶蛋白本身
酶标抗体的质量鉴定与保存
1．酶活性和抗体效价测定： 采用双向免疫扩散法（稀释抗体）和DAB-H2O2 显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。 2．酶量和IgG量： 酶量（mg/ml）=OD403 ′0.4 IgG量（mg/ml）=（OD280- OD402 ′0.42）′0.94
酶免疫测定的酶—大分子蛋白结合物的制备
酶结合物可以说是酶免疫测定试剂盒的核心组成部分。通常酶免疫测定试剂盒的有效使用期限即是根据酶结合物的稳定性而定的。因为在酶免疫测定试剂盒中，最易受外环境影响的组成试剂即是酶结合物。此外，酶结合物的质量亦是影响试剂盒质量的很重要的因素之一，可见酶结合物的制备对于酶免疫测定来说，是非常关键的一个环节。
酶标记抗体技术方法（三）
3. 结果判定： 除标记物IgG量的计算，略有不同以外，其余均同戊二醛法。 IgG量(mg／ml)＝(OD280nm-OD403nm×0.3)×0.62 4. 试剂及器材: (1) 0.1M NaIO４：称取241mg高碘酸钠(广州化学试剂厂，批号830602)溶于蒸馏水10ml中。 (2
脱盐的二步法和多效蒸发法的方法介绍
农田土壤中可溶性盐类的含量逐渐减少的现象。农作物正常生长允许的土壤含盐量称“土壤脱盐标准”。改良盐碱土可通过以灌水冲洗和排水为主的水利措施结合农业措施，使作物根系层中的土壤含盐量逐渐减少，达到脱盐标准。 二步法 第一步，利用离子交换膜技术，通过阳离子膜使海水中的阳离子交换为铵离子，通过阴离子
多聚螯合物酶组化实验——EPOS－法
长期以来，许多的研究者希望 IHC 方法更敏感、更稳定、更简单，要求多步检测系统简化，但敏感性要进一步提高，使这一技术面临巨大的挑战。在实践中，往往是步骤减少了，敏感性也降低，这是一对矛盾。一种新的多聚螯合物酶二步法在 1995 年被隆重推出，该方法与简单的二步法相比较，具有很高的敏感性、稳定性和特
ELISA(EIA)酶结合物的制备
免疫酶技术(immunoenzymatic technique)又称酶免疫测定法(enzyme immunoaay,EIA),是继免疫荧光技术和放射免疫技术之后发展起来的又一种免疫标记技术。它是把抗原抗体的特异性反应和酶的高效催化作用相结合而建立的。该技术通过化学方法将酶与抗体或抗抗体结合
怎么样正确的进行ELISA试剂盒的检测
最全的ELISA试剂盒说明书在这里（通用版）规格：96T 48T用途：科研实验（仅供实验室研究使用）保存：2-8℃。有效期：6个月结合物的制备1. 戊二醛交联法戊二醛是一种双功能团试剂，它可以使酶与蛋白质的氨基通过它而联结。碱性磷酸一般用此法进行标记。交联方法一步法、两步法两种。在一步法中戊二醛直接
免疫金组织化学染色实验——双－PAG－法
实验方法原理免疫金银染色方法敏感、简便、省时、安全可靠，葡萄球菌 A 蛋白（SPA）金标记四步法是在此基础上发展起来的更为敏感的一种新方法。SPA 和许多哺乳类动物 IgG 具有亲和性，且它们之间的连接不会干扰抗原-抗体的结合。简单的 SPA 金标记二步法后，第三步用抗 SPA 与 SPA 金表面分
碱性磷酸酶标抗体制备技术的简介
碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AP），系小牛肠粘膜和大肠杆菌中提炼出来的一种磷酸酯的水解酶，由多个同功酶组成。从小牛肠粘膜提取的AP分子量为100kDa，酶作用的最适pH为9.6；从大肠杆菌中提取酶分子量为80kDa，最适pH为8.0。它的作用底物较多，常用的酶底物有对硝
免疫金银染色双PAG法
实验概要本实验介绍了免疫金银染色双PAG法的操作步骤。实验原理免疫金银染色方法敏感、简便、省时、安全可靠，葡萄球菌A蛋白(SPA)金标记四步法是在此基础上发展起来的更为敏感的一种新方法。SPA和许多哺乳类动物IgG具有亲和性，且它们之间的连接不会干扰抗原—抗体的结合。简单的SPA金标记二步法后，第三
过二硫酸钠风险术语
R22Harmful if swallowed. 吞食有害。 R36/37/38Irritating to eyes, respiratory system and skin. 刺激眼睛、呼吸系统和皮肤。 R42/43May cause sensitization by inhalati
过二硫酸钠的安全术语
S17Keep away from combustible material. 远离可燃性物质。 S26In case of contact with eyes, rinse immediately with plenty of water and seek medical advice.
单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和...1
目前动物用单抗，在动物疫病诊断和检疫、妊娠检测、性别鉴定等方面有广泛的应用，大多以诊断试剂（盒）的形式提供，其中核心试剂为标记的单抗。下面将介绍最常用的几种标记技术。 一、酶标记 1、辣根过氧化物酶（HRP）标记 辣根过氧化物酶（HRP）标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖
抗体标记方法
Biotinylation of Antibody ( Contributed by Nanci Donacki) Antibody labeling (House Ear Institute)Labeling protocols using affinity markers. Coupling