DNA双链断裂检测——变压场凝胶电泳(GFGE)
DNA双链断裂与细胞死亡的关系更为密切。变压场凝胶电泳是采用将细胞包埋在低熔点琼脂糖凝胶中,通过蛋白酶、去污剂等渗入凝胶中融解细胞、去蛋白,纯化细胞DNA,再通过梯增电压进行琼脂糖凝胶电泳,结合DNA解旋荧光测定(FADU)法和检测DNA双链断裂。 1、主要试剂及配制方法: (1)蛋白酶K,SDS,低熔点琼脂糖。 (2)配制方法: 细胞缓冲液(A液)。0.25mol/L NaCl + 10mmol Na2HPO4 + 1mmol/L MgCl2,pH7.2. 细胞裂解液(B液)。9mol/L脲 + 10mmol/L NaOH + 2.5mmol/L环烷二胺四乙酸 + 0.1%SDS。 碱性变性液I(C液)。B液 + 0.2mol/NaOH,体积比为45:55. 碱性变性液I(D液)。B液 + 0.2mol/NaOH,体积比为40:60. 抗变性液(F液)。1ug/L溴化乙锭 + 13.3mmol/......阅读全文
DNA损伤检测法——应用ImageXpress-Nano成像分析系统
前言在研究中经常会涉及DNA或染色体的损伤,因为DNA损伤与很多疾病的发生有密切的关系,如遗传疾病、肿瘤等。放射性辐射、环境影响或化合药物等都有可能引起DNA的损伤。之前的研究表明标记组蛋白H2AX在丝氨酸139上的磷酸化位点是敏感的可早期预测DNA双链断裂的方法。本文详细介绍了自动细胞成像检测DN
RAD52基因突变因子与药物介绍
该基因编码的蛋白质与酿酒酵母rad52相似,rad52是dna双链断裂修复和同源重组的重要蛋白。该基因产物与单链dna末端结合,介导dna与dna的相互作用,这是dna链退火所必需的。同时发现其与dna重组蛋白rad51相互作用,提示其在与rad51相关的dna重组和修复中的作用。这个基因的假基因存
抗双链DNA抗体的系统性红斑狼疮简介
系统性红斑狼疮是由于外界环境因素作用于有遗传易感性的个体,激发机体免疫功能紊乱及免疫调节障碍从而累及全身多个系统和脏器的自身免疫性疾病。 系统性红斑狼疮(SLE)是自身免疫介导的,以免疫性炎症为突出表现的弥漫性结缔组织病。血清中出现以抗核抗体为代表的多种自身抗体和多系统累及是SLE的两个主要临
人抗双链DNA抗体(dsDNA)ELISA试剂盒使用说明
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗双链DNA抗体(dsDNA)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗双链DNA抗体(dsDNA)水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入抗双链DNA抗体(dsDNA),再与HRP标记的
DNA序列测定技术(Sanger双脱氧链终止法与Maxam-Gilbert-...
选择随机定向测定策略的影响因素(1)计算设备 任何大规模的测序计划将在很大程度上依赖计算机程序对原始序列资料进行分类、整理和排列(Staden,1986)。在权衡随机法的利与弊之时,必须将与适当的计算机设备进行联机的问题放到压倒一切的位置上来考虑。如果这些设备尚无从适当的计算机设备进行联机的问题
JACS:南京大学实现横向DNA双链环的平行纳米组装
上图为两条不同序列的96碱基的DNA小环(C1和C2)在6条不同序列的短链作铰链的辅助下构建的DNA纳米管(NT1)及其相应的原子力显微镜图,管径10纳米,管长1~15微米;下图为一条96碱基的DNA小环在3条不同序列的短链作铰链的辅助下构建的DNA纳米管(NT3)及其相应的原子力显微镜图,管径10
RAD21基因突变因子与药物介绍
该基因编码的蛋白质与pombe-rad21裂殖酵母的基因产物高度相似,该基因参与dna双链断裂的修复以及有丝分裂过程中的染色单体结合。该蛋白是一种核磷酸化蛋白,在细胞周期m期发生高磷酸化。这种蛋白与着丝粒区有丝分裂染色质的高度调节关系表明它在有丝分裂细胞中的姐妹染色单体结合中起作用。[由RefSeq
MRE11A基因突变与药物因子介绍
该基因编码一种参与同源重组、端粒长度维持和DNA双链断裂修复的核蛋白。该蛋白本身具有3’到5’的核酸外切酶活性和核酸内切酶活性。该蛋白与RAD50同系物形成复合物;该复合物是DNA末端非同源连接所必需的,具有增加的单链DNA内切酶和3’到5’的外切酶活性。该蛋白与DNA连接酶结合,在体外利用靠近DN
与细胞周期信号通路相关因子介绍MRE11A
该基因编码一种参与同源重组、端粒长度维持和DNA双链断裂修复的核蛋白。该蛋白本身具有3’到5’的核酸外切酶活性和核酸内切酶活性。该蛋白与RAD50同系物形成复合物;该复合物是DNA末端非同源连接所必需的,具有增加的单链DNA内切酶和3’到5’的外切酶活性。该蛋白与DNA连接酶结合,在体外利用靠近DN
实体肿瘤检测MRE11基因介绍
该基因编码一种核蛋白,参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物;该复合物用于dna末端的非同源连接,并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合,这
MRE11A基因编码功能及结构描述
该基因编码一种参与同源重组、端粒长度维持和DNA双链断裂修复的核蛋白。该蛋白本身具有3’到5’的核酸外切酶活性和核酸内切酶活性。该蛋白与RAD50同系物形成复合物;该复合物是DNA末端非同源连接所必需的,具有增加的单链DNA内切酶和3’到5’的外切酶活性。该蛋白与DNA连接酶结合,在体外利用靠近DN
细胞周期信号通路相关MRE11A
该基因编码一种参与同源重组、端粒长度维持和DNA双链断裂修复的核蛋白。该蛋白本身具有3’到5’的核酸外切酶活性和核酸内切酶活性。该蛋白与RAD50同系物形成复合物;该复合物是DNA末端非同源连接所必需的,具有增加的单链DNA内切酶和3’到5’的外切酶活性。该蛋白与DNA连接酶结合,在体外利用靠近DN
Nature子刊:阻断DNA修复机制可提高脑瘤放疗效果
最近,美国德克萨斯大学(UT)西南医学中心的研究人员证明,在两种肿瘤细胞系和小鼠中阻断关键的DNA修复机制,能够改善高致命性脑瘤(称为胶质母细胞瘤,glioblastomas)的放射疗法效果。 放射疗法(radiation therapy)可引起DNA的双链断裂,必须得到修复肿瘤
SETMAR基因突变因子与药物介绍
该基因编码一个融合蛋白,该蛋白包含一个N-末端组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶结构域和一个C-末端水手转座酶结构域编码蛋白与DNA结合,参与DNA的非同源末端连接和双链断裂修复该蛋白的集合结构域部分特异性地甲基化组蛋白H3赖氨酸4和36这种基因在灵长类动物中只作为一个融合基因存在,其他生物缺乏水手的领域。
GEN1基因的结构特点和生理作用
该基因编码rad2/着色性干皮病g组核酸酶家族的一个成员,其成员具有n末端和内部着色性干皮病g组核酸酶结构域,然后是螺旋发夹螺旋结构域和无序c末端结构域。该基因编码的蛋白质参与了holliday连接的解析,holliday连接是一种中间的四向结构,在同源重组和双链断裂修复过程中共价连接dna。该蛋白
使用分光光度法检测DNA纯度和计算DNA含量
DNA在260nm处吸收强烈,OD260值为1的溶液相当于大约50μg/mL双链DNA,而蛋白质的特征吸收在280nm处,测定DNA提取物中260nm处和280nm处的吸收值OD260和OD280,可大致判断所提取的DNA的纯度。OD260/OD280的值在1.7~1.9之间,说明提纯度较好,低于1
电转仪助力CRISPR编辑iPSC新进展:首次报告协同基...(一)
电转仪助力CRISPR编辑iPSC新进展:首次报告协同基因编辑效应 2006年,日本科学家山中伸弥(Shinya Yamanaka)教授利用逆转录病毒将4个转录因子转入成体细胞,将其转变为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSC)。从此后,
琼脂糖电泳检测质粒dna的现象有哪些
DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此他们能以相同的速度向正极方向移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即DNA分
琼脂糖电泳检测质粒dna的现象有哪些
DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此他们能以相同的速度向正极方向移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即DNA分
琼脂糖电泳检测质粒dna的现象有哪些
DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此他们能以相同的速度向正极方向移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即DNA分
DNA损伤修复信号通路相关因子MRE11
该基因编码一种核蛋白,参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物;该复合物用于dna末端的非同源连接,并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合,这
MRE11基因编码功能及结构描述
该基因编码一种核蛋白,参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物;该复合物用于dna末端的非同源连接,并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合,这
关于单细胞凝胶电泳技术的基本原理介绍
单细胞凝胶电泳技术的原理是基于有核细胞的DNA分子量很大,在DNA超螺旋结构附着在核基质中,用琼脂糖凝胶将细胞包埋在载玻片上,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜及其他生物膜破坏,使细胞内的RNA、蛋白质及其他成分进入凝胶,继而扩散到裂解液中,惟独核DNA仍保持缠绕的环区附着在剩余的核骨架上,并留在
MRE11基因突变与药物因子介绍
该基因编码一种核蛋白,参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物;该复合物用于dna末端的非同源连接,并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合,这
同济大学等处GenesDev揭示DNA修复的新型调节因子
来自同济大学医学院、美国梅奥诊所(Mayo Clinic)和军事医学科学院放射与辐射医学研究所等处的研究人员,将UHRF1确定为DNA修复的一个新型调节因子,并揭示了一种模型,在这种模型中磷酸化-去泛素化级联反应动态地调节着BRCA2CRAD51通路。这一研究结果发布在12月9日的《Genes&De
同济大学等处GenesDev揭示DNA修复的新型调节因子
生物通报道:来自同济大学医学院、美国梅奥诊所(Mayo Clinic)和军事医学科学院放射与辐射医学研究所等处的研究人员,将UHRF1确定为DNA修复的一个新型调节因子,并揭示了一种模型,在这种模型中磷酸化-去泛素化级联反应动态地调节着BRCA2–RAD51通路。这一研究结果发布在12月9日的《
加强了Spo11形成DSB机制的理解,扩展了DNA断裂修复的概念
减数分裂是生殖细胞在有性生殖过程中产生单倍体细胞的分裂过程,能够增加配子的多样性,促进生物适应环境变化。在减数分裂时,同源染色体相互配对,发生重组交换。这一同源重组过程,由Spo11介导的DNA 双链断裂 (DNA double-strand breaks, DSBs) 所引发,但Spo11是如
王嘉东等Molecular-Cell发文揭示放射损伤修复调控新机制
染色体的完整性和遗传信息的精准传递对于细胞以及个体而言至关重要,而放射损伤所导致的DNA双链断裂会直接导致染色体的断裂、丢失和重排,如不能及时修复则会导致细胞的死亡或者癌变。 MRN(MRE11/RAD50/NBS1)复合体在放射损伤修复通路中扮演着重要的角色,该复合体作为DNA损伤的“感应器
《科学》《自然》齐撤稿!英国学者因数据造假被查
4月11日,《科学》和《自然》杂志同时各撤回一篇有关DNA修复过程的论文,原因是作者数据造假。 值得注意的是,在这两篇论文中“犯事”的是同一个作者。 这个名叫Abderrahmane Kaidi的作者在2013年前是英国剑桥大学的癌症研究人员。他不仅骗过了顶级期刊和审稿人,还因为自己的学术不
RNA生物合成的抑制剂相关介绍
一、碱基类似物 有些人工合成的碱基类似物能干扰和抑制核酸的合成。作用方式有以下两类: (一)作为代谢拮抗物,直接抑制核苷酸生物合成有关酶类。如6-巯基嘌呤进入体内后可转变为巯基嘌呤核苷酸,抑制嘌呤核苷酸的合成。可作为抗癌药物,治疗急性白血病等。此类物质一般需转变为相应的核苷酸才能表现出抑制作