细胞化学染色

细胞化学染色,是一种以形态为基础,结合运用化学或生物化学技术对血细胞内各种化学成分作定位、定性及半定量分析的方法。用于研究血细胞生理、病理和化学结构;临床上为某些血液病的诊断、鉴别诊断、疗效观察、预后监测和发病机制的探讨,提供重要依据。血细胞化学染色的基本要求是在原位显示细胞成分和结构,反应产物应是有色沉淀物,具有一定的稳定性。血细胞化学染色可显示糖原、脂类、酶、蛋白质等。 (一)固定 固定有物理法与化学法, 物理法为干燥和火焰固定, 化学法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。 (二)显示 1、偶氮偶联法:利用人工合成的酶底物,在酶作用下,产生分解产物,再与重氮盐结合引起偶氮偶联,使其形成不溶性的偶氮色素,以此证明酶的存在。 2、联苯胺法:粒细胞和单核细胞中的过氧化物酶作用于过氧化氢,释放新生态氧,使无色的联苯胺形成蓝色沉淀。 3、普鲁士蓝法:细胞内、外铁与酸性亚铁氰化钾作用,形成蓝色......阅读全文

免疫荧光组织(细胞)化学染色方法

一、其它荧光抗体染色方法1、膜抗原荧光抗体染色法本法应用直接法或间接法的原理和步骤,可对活细胞在试管内进行染色,常用于T和B细胞、细胞培养物、瘤细胞抗原和受体等的检查和研究,阳性荧光主要在细胞膜上。FACS即采用此法原理。2、双重染色法在同一标本上有两个抗原需要同时显示(如A抗原和B抗原),A抗原的

免疫细胞化学染色操作规程

一、材料和试剂1、玻片:须用免疫组化专用玻片,或用2%多聚赖氨酸包被处理玻片。2、5-10%正常山羊血清封闭液,用PBS配。3、3%牛血清白蛋白(BSA),用PBS配。4、0.01M  PH7.4  PBS5、1% BSA-PBS(含0.05% Tween20)6、AEC底物(1)底物缓冲液(20X

血细胞化学染色:过氧化酶染色的原理

实验原理:血细胞内的过氧化酶分解H2O2 ,释出初生态氧,使无色联苯胺氧化成蓝色联苯胺,后者进一步变成棕黑色化合物,沉着于胞质内。

血细胞化学染色的染色法—α醋酸萘酚酯酶染色(αNAE)的介绍

  (1)血细胞化学染色的染色法—α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE)的原理:α-醋酸萘酚酯酶能将基质液中的α-醋酸萘酚水解,产生α-萘酚,再与重氮染料偶联,可形成不溶性的有色沉淀,沉淀于细胞质中。  (2)血细胞化学染色的染色法—α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE)的操作方法:将甲醛生理盐水滴加在2张

尿红细胞免疫球蛋白细胞化学染色

正常尿液中无免疫球蛋白存在,但在肾小球及肾小管发生病变时尿中可检出免疫球 蛋白,已经证实尿中红细胞多在 Henle′s 环升支瘀着,肾小球来源的尿红细胞表面将被 免疫球蛋白覆盖,而非肾小球来源的尿红细胞表面则无免疫球蛋白覆盖,为此应用细胞 化学染色法可检测尿红细胞表面免疫球蛋白,以鉴别肾性血尿和非肾

血细胞化学染色的染色法—中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)的介绍

  (1)血细胞化学染色的染色法—中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)的原理:中性粒细胞碱性磷酸酶在pH 9.6左右环境中,能水解磷酸萘酚钠底物释放出萘酚,后者与重氮染料偶联,可形成不溶性的有色沉淀(红色颗粒),定位于细胞酶活性所在处。  (2)血细胞化学染色的染色法—中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP

植物组织和细胞显微化学染色_显示细胞壁化学组成方法

实验方法原理植物体内含有许多种化学物质。在得到植物组织切片之后,可以通过组织化学(显微化学)染色的方法使不同类型的化学成分在显微镜下得以显示,从而了解这些物质在植物的组织细胞内的空间分布用于组织化学研究的切片,根据研究对象和所要检测的化学物质的不同,可采用石蜡切片,有时要求新鲜材料采用徒手切片或冰冻

酶免疫细胞化学染色操作指南1

一、材料和试剂1、玻片:须用免疫组化专用玻片,或用2%多聚赖氨酸包被处理玻片。2、5-10%正常山羊血清封闭液,用PBS配。3、3%牛血清白蛋白(BSA),用PBS配。4、0.01M pH7.4 PBS5、1% BSA-PBS(含0.05% Tween20)6、AEC底物(1)底物缓冲液(20X)

酶免疫细胞化学染色操作指南2

2、加3% H2O2,细胞片20ul/孔,培养板100ul/孔,使充分覆盖住细胞。3、室温10分钟后,甩掉 H2O2,用PBS轻轻淋洗2分钟。用滤纸吸干细胞周围水份,96孔在滤水纸上扣干,但注意保持细胞湿润。三、封闭细胞片用5-10%正常山羊血清(20ml/孔),细胞板用2-5%BSA(PBS配制)

常用血细胞化学染色12

二、氯乙酸AS-D荼盼醋酶染色染色原理血细胞内的氯乙酸AS-D荼酚酯酶(naphythol AS-D chloroacetate esterase, NAS-DCE)水解基质液中的氯乙酸AS-D荼酚,产生AS-D荼酚,进而与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性的有色沉淀,定位于细胞质内酶所在的部位。本

植物组织和细胞的显微化学染色实验

实验方法原理 植物体内含有许多种化学物质。在得到植物组织切片之后,可以通过组织化学(显微化学)染色的方法使不同类型的化学成分在显微镜下得以显示,从而了解这些物质在植物的组织细胞内的空间分布用于组织化学研究的切片,根据研究对象和所要检测的化学物质的不同,可采用石蜡切片,有时要求新鲜材料采用徒手切片或冰

常用血细胞化学染色11

一、过氧化物酶染色染色原理粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含有髓过氧化物酶(myeloperoxidase, POX或MPO),能将底物H202分解,产生新生态氧,新生态氧可氧化四甲基联苯胶成联苯胺蓝。联苯胺蓝自我脱氢氧化形成棕色的四甲基苯酿二胺,后者与亚硝基铁氧化纳结合,再进一步氧化形成稳定

植物组织和细胞的显微化学染色实验

实验步骤:(1) 淀粉:淀粉是植物的主要贮藏物质,它们在各种不同的植物细胞中形成各种形状小同的颗粒。一般来说,淀粉本身具有特殊的性状和光学特性,可以不必用专门的显微化学方法来检视,由于碘与淀粉作用可形成碘化淀粉而呈蓝色反应,用碘-碘化钾溶液来测试淀粉粒已成为最常用的方法。(2) 蛋白质:植物细胞

细胞化学词汇染色质组装因子1

中文名称:染色质组装因子1英文名称:chromatin assembly factor-1;CAF-1定  义:与新生DNA链结合,特异地识别组蛋白H3和H4及H3/H4组成的四聚体。定位结合于复制叉之后,可增加H3/H4四聚体的稳定性。需经磷酸化后才有活性,其缺失将严重影响细胞周期进程,使其阻滞在

慢性粒细胞白血病的细胞化学染色、染色体及分子生物...

慢性粒细胞白血病的细胞化学染色、染色体及分子生物学检验为大家整理如下:细胞化学染色 NAP阳性率及积分明显减低,甚至缺如。染色体及分子生物学检验 Ph染色体是CML的特征性异常染色体,检出字为90%~95%,其中绝大多数为t(9;22)(q34;q11)称为典型易位。Ph染色体存在于CML的整个病程

急性淋巴细胞白血病的细胞化学染色表现

细胞化学染色1) 过氧化物酶(POX)与苏丹黑(SB)染色:各阶段淋巴细胞均阴性,阳性的原始细胞小于3%.2)糖原(PAS)染色:约20%~80%的原淋巴细胞呈阳性反应医学教|育网。3)酸性磷酸酶(ACP)染色:T细胞阳性,B细胞阴性。4)其他:非特异性酯酶及溶菌酶均呈阴性反应。

血细胞分析仪激光散射和细胞化学染色技术

  激光散射和细胞化学染色技术  在白细胞分类上,仪器采用两个通道进行,一个为过氧化酶检测通道,另一个为嗜碱细胞检测通道。  过氧化酶反应(peroxidase,POX)是血涂片染色的一个常用细胞化学染色方法,用于鉴别原始细胞与成熟的粒细胞,鉴别粒细胞与非粒细胞。染色后的细胞内无蓝黑色颗粒出现为阴性

血细胞分析仪激光散射和细胞化学染色技术

  在白细胞分类上,仪器采用两个通道进行,一个为过氧化酶检测通道,另一个为嗜碱细胞检测通道。  过氧化酶反应(peroxidase,POX)是血涂片染色的一个常用细胞化学染色方法,用于鉴别原始细胞与成熟的粒细胞,鉴别粒细胞与非粒细胞。染色后的细胞内无蓝黑色颗粒出现为阴性反应,出现细小颗粒或稀疏样分布

植物组织和细胞显微化学染色_显示植物细胞后含物方法

实验步骤(1) 淀粉:淀粉是植物的主要贮藏物质,它们在各种不同的植物细胞中形成各种形状小同的颗粒。一般来说,淀粉本身具有特殊的性状和光学特性,可以不必用专门的显微化学方法来检视,由于碘与淀粉作用可形成碘化淀粉而呈蓝色反应,用碘-碘化钾溶液来测试淀粉粒已成为最常用的方法。(2) 蛋白质:植物细胞中的蛋

临床化学检查方法介绍细胞组织化学染色介绍

细胞组织化学染色介绍:  免疫细胞组织化学染色是利用已知的抗体与细胞抗原特异性相结合的特性,通过化学反应使标记在抗体上的显示剂显示一定的颜色,并借助显微镜、荧光显微镜或电镜进行观察,以达到对组织、细胞结构中化学成分进行定量、定位分析的目的。细胞组织化学染色正常值:  检测结果呈阴性。细胞组织化学染色

关于细胞组织化学染色的简介

  免疫细胞组织化学染色是利用已知的抗体与细胞抗原特异性相结合的特性,通过化学反应使标记在抗体上的显示剂显示一定的颜色,并借助显微镜、荧光显微镜或电镜进行观察,以达到对组织、细胞结构中化学成分进行定量、定位分析的目的。

免疫荧光组织(细胞)化学染色方法:间接法

一、原理与意义 免疫荧光组织(细胞)化学染色方法——间接法,是一种荧光抗体染色法。该方法只需制备一种荧光抗体可以检出多种抗原,敏感性较高,操作方法较易掌握,而且能解决一些不易制备动物免疫血清的病原体(如麻疹)等的研究和检查,所以已被广泛应用于自身抗体和感染病人血清的试验。 二、操作流程 (一)双层法

血细胞化学染色的临床应用之碱性磷酸酶染色(NAP)

(1)原理(偶氮偶联法)    血细胞内的碱性磷酸酶在pH9.4~9.6的条件下将基质液中的α-磷酸萘酚钠水解,产生α-萘酚与重氮盐偶联形成不溶性灰黑色沉淀,定位于酶活性所在之处。(2)结果判断:阳性结果为胞质内出现灰褐色至深黑色颗粒状或片状沉淀。   ①(-)灰褐色沉淀,0分。   ②(+)胞质出

植物组织和细胞显微化学染色_检测植物细胞中核酸方法

实验步骤(1)脱氧核糖核酸:孚尔根染色法是检定细胞中 DNA 的一种常用方法,主要染色液为希夫试剂。切片材料加入蒸馏水后,在盐酸 (1 mol/L) 中 60℃下保温 5-15 min, 转入室温的盐酸中1min, 蒸馏水清洗,希夫试剂染色 1-5 h, 漂洗液中漂洗 3 次,每次 2-10min,

恶性组织细胞病的细胞化学染色结果是什么?

恶组的细胞化学染色特点染色正常单核细胞异常单核细胞恶组细胞过氧化物酶++0~+0碱性磷酸酶000酸性磷酸酶++++++++糖原(PAS)+~++(弥散)+~++(弥散)0~+(弥散)苏丹黑B++±+β-葡萄糖醛酸酶+±±醋酸ASD酯酶00?醋酸α萘酚酯酶++++++±注:“0”为无反应,±为可疑,+

抚生试剂其它免疫荧光细胞化学染色方法

   本法应用直接法或间接法的原理和步骤,可对活细胞在试管内进行染色,常用于T细胞和B细胞、细胞培养物、瘤细胞抗原和受体等的检查和研究,阳性荧光主要在细胞膜上。膜抗原荧光抗体检测法(FACS)即采用此原理。     双重染色法    在同一标本上有两个抗原需要同时显示(如A抗原和B抗原),A抗原的抗

免疫胶体金银细胞化学染色的固定剂选择

免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样,要想得到好的染色效果,关键取决于标本处理是否合适,只有使抗原性及组织结构保存的好,才能使以后的染色成功成为可能,其次要用高特异性和高效价的一抗,选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科,所要检出的抗原种类繁多,性质也各不相同。因此,不可能

免疫胶体金银细胞化学染色的固定剂选择

免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样,要想得到好的染色效果,关键取决于标本处理是否合适,只有使抗原性及组织结构保存的好,才能使以后的染色成功成为可能,其次要用高特异性和高效价的一抗,选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科,所要检出的抗原种类繁多,性质也各不相同。因此,不可能

免疫细胞或组织化学染色的相关问题

附上我们这里的组化步鄹:(切片复温凉干完毕)1。加入配好的0.3%的过氧化氢甲醇溶液(甲醇80ml+0.01MPBS 20ml+30%过氧化氢 1ml)30min,以消除内源性过氧化物酶的影响,0.01MPBS清洗5min×3;2。加入配好的0.3% Triton X100(30% Triton X

免疫胶体金银细胞化学染色中固定剂选择

免疫胶体金银染色和其它免疫细胞化学方法一样,要想得到好的染色效果,关键取决于标本处理是否适当,只有使抗原性及组织结构保存的好,才能使后续的染色成功成为可能,其次要用高特异性和高效价的一抗,选择合适的稀释度。由于免疫组化方法广泛应用于不同的生物学科,所要检出的抗原种类繁多,性质也各不相同。因此,不可能