iTRAQ技术常见问题与答疑

1、什么是iTRAQ? iTRAQ技术,即同位素相对标记与绝对定量技术。该技术可对复杂样本、细胞器、细胞裂解液等样本进行相对和绝对定量研究,具有较好的定量效果、较高的重复性。由于其能够同时对多达8种样品进行标记分析,故在生命科学的各个领域得到了广泛的应用。2、iTRAQ的原理是什么? iTRAQ的检测可以做这样的比喻,蛋白被打成肽段后,被平均的铺在了一个有384个孔的平板上,然后机器会从每个孔中选取浓度在前5名的蛋白进行鉴定和比对,所以,如果假设每个一个样本中有100个蛋白,他们的浓度均为1%,那么得到的结果就是蛋白的得分低,但是鉴定的蛋白数量会很多,可以达到90以上;如果一个样本中有100个蛋白,有3个蛋白的含量分别为30、20、10、其他的97钟蛋白为剩下的50%,那么这三种蛋白的得分高,但是鉴定出的蛋白数量会比较少,也许只有50或者60个。因为......阅读全文

污水处理技术篇:工业废水处理技术答疑50题(一)

工业废水排放是造成水质安全问题的重要因素之一,工业污水处理不达标将会引发严重后果。关于工业废水有很多技术工艺,也面临着各种各样的问题,今天小编为大家总结了关于工业废水处理技术50大问题总结,希望给做工业废水的你提供帮助。 1.问:采用 CAST 工艺,污泥脱水后的混合液直接排入进水泵房,导致进水CO

光谱基础知识答疑——拉曼、荧光等多种热门光学光谱技术

  拉曼光谱技术  1. 拉曼点扫面积有多大?  显微镜物镜出口的激光光斑的直径约1-2微米。拉曼成像的区域大小更多取决于自动平台的移动范围,尺度和自动平台相关,有75X50mm,100X80mm,300X300mm等选择。  2. 表面增强拉曼能否表征金膜表面修饰的单分子层自组装膜的形态?如膜的缺

代谢组学样本收集答疑解惑

  样本收集是代谢组学研究的第一步,是保障代谢组学研究结果可靠性的最重要的环节之一。根据不同的研究目的该选取何种生物样本?不同种类的生物样本的规范收集流程是什么?有哪些注意事项(抗凝剂、冻融、抑菌剂等使用细节)?如何保存生物样本?可保存多久等等?这些都是代谢组学实验中小伙伴经常咨询的问题,本文将针对

磁珠酶免疫分析平台答疑

Luminex MagPix 磁珠酶免疫分析平台多功能的MAGPIX 只需一台即可达到多台仪器共同作用才能完成的效果,具有更大的灵活性和更多的选择性。无论是单一指标还是多重指标,检测核酸还是蛋白,MAGPIX均可为您简化实验,提供高超的分析性能。 蛋白研究

PCR常见问题分析与对策

1.PCR产物的电泳检测时间  一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 2.假阴性,不出现扩增条带  PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。  模板:①模板中含有杂蛋白

移液器常见问题与解答大全

移液器是实验室里面最长使用的实验仪器之一,基本上每一个实验室人员都曾经或现在使用过移液器,因而也会遇到移液器使用时的一些问题。笔者总结归纳了移液器使用时常见的问题与解答大全,希望对于大家有所帮助:移液器使用时常见的问题与解答大全:问题可能原因提议移液器渗漏多道移液器吸嘴里不均衡的液体水平·吸嘴与移液

余氯各种常见问题与常识!

传统的余氯测试方法主要有分光光度法和比色法,这二种方法的缺点是:需要5种以上的试剂和溶液,测试精度受样品的颜色和浑浊度的影响。为何说电极法测试余氯是最简单的测试方法?传统的余氯测试方法主要有分光光度法和比色法,这二种方法的缺点是:需要5种以上的试剂和溶液,测试精度受样品的颜色和浑浊度的影响。而且,这

浓缩仪常见问题与解答

1、样品浓缩仪与氮吹仪的区别?答:样品浓缩和氮吹仪都是用氮气来进行吹扫,只是各厂家的命名不一样。2、如何能让实验速度更快、效率更高?答:样品浓缩仪的原理是通过提高样品的温度,使样品的溶剂在无氧状态下进行挥发,从而快捷高效的达到浓缩的目的。影响实验速度的原因有两个:1)加热的温度。2)气体的流量及气体

色谱柱常见问题与解决

色谱柱在使用中zui常见的问题就是柱压升高,如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加,属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高(系统管路堵塞及压力传感器故障除外),以下列举部分色谱柱常见问题与解决办法:  1、色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染解决方法:如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染,可以将色谱柱反方向用甲

定量PCR技术常见问题交流

1.  如果扩增曲线ct值比较靠后的话,32左右,一般有什么方法解决没有 ct值比较靠后,对实验有一定的影响,因为经过那么多次的循环,酶的活性有可能有所下降,这时候扩增效率会有所改变(而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值)。因此最好能够把ct值往前移。 解决办法可以将模

空心阴极灯技术常见问题

空心阴极灯技术交流Q1:什么时候应该更换元素灯?A1:当检测能量突然下降,甚至消失或噪声和飘移突然增大时,可作为更换元素灯的依据。Q2:购买元素灯应该提供哪些信息?A2:提供使用元素灯的仪器品牌和型号以及原装元素灯的元素和序列号等信息,以便销售人员进行配对。Q3:新买的元素灯为什么跟原装灯不一样?A

技术:超声破碎细胞常见问题

大肠杆菌表达外源蛋白,在超声破碎的时候,用含有1%triton-X-100的PBS悬浮,然后超声的效果较好,1%triton-X-100的作用还是很明显的,对其他的一些细菌同样起作用。   细菌沉淀直接加样品1buffer,再加5ul的巯基乙醇,混匀,离心,煮沸10min,直接上样,染色脱色步骤如下

iTRAQ定量蛋白质组学技术分析抗菌肽F1的抗菌机制研究

  本研究利用iTRAQ定量蛋白质组学分析技术,对抗菌肽F1处理的大肠杆菌及空白对照在不同时间段菌体的生长速率以及其产生的蛋白质进行了分析与鉴定,通过比较实验组与对照组蛋白质表达水平差异,以期了解抗菌肽F1的抗菌机制。  抗菌肽在农业和食品工业中受到越来越多的关注,因为它们具有控制病原体的潜力。然而

PeproTech类器官培养操作的答疑解惑

类器官(organoids)是一种利用具有干性潜能的细胞体外培养出的3D细胞培养物。由于与对应的器官拥有高度相似的组织学特征,具有自我更新和自我组织能力,并能重现该器官的部分生理功能,因此类器官可作为多种疾病的体外模型,在干细胞与发育、再生医学、疾病研究、药物开发和精准医疗等多个方面拥有广泛的应用前

答疑!甲流高发,公众如何科学应对?

  答疑!甲流高发,公众如何科学应对?  中国疾控中心流感监测显示,近期我国多地出现流感活动水平上升,在流行的流感病毒中,甲型流感病毒占绝对优势。什么是甲流?流感和普通感冒有什么不同?得了流感应该如何治疗?如何科学预防流感?记者采访疾控专家和传染病专家为您答疑解惑。  什么是甲流?  陕西省疾控中心

PCR中常见问题分析与对策

PCR产物的电泳检测时间 一般认为PCR产物应在48h以内完成电泳检测,有些zui好于当日电泳检测,大于48h后带型就会出现不规则,甚至消失。 1  假阴性,不出现扩增条带     PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节

拉曼光谱常见问题与答案

  一、测试了一些样品,得到的是Raman Shift,但是文献是wave number,不知道它们之间的转换公式是怎么样的?激光波长632.8nm。  答1.两者是一回事。  Raman shift即为拉曼位移或拉曼频移,频率的增加或减小常用波数差表示,拉曼光谱仪得到的谱图横坐标就是波数wave

eBioscience流式抗体常见问题与解答

1、eBioscience公司提供了哪些抗体?  A:物种——人、小鼠、大鼠、非人灵长类、犬类等。检测指标——包括细胞表面标记(CD分子,膜骨架,趋化因子受体)和胞内指标(细胞因子,核内转录因子)。抗体标记——生物素标记抗体,亲和纯化抗体以及直标荧光素抗体。eB抗体的直标荧光素有(括号内是发射光波长

质粒提取的原理与常见问题

现在较常用的质粒提取方法有三种:碱裂解法、煮沸法和去污剂裂解法,前两种方法较为剧烈,适用于较小的质粒(<15Kb),而去污剂裂解法则比较温合,一般用于分子量较大的质粒(>15Kb)。 碱裂解法是一种广泛使用的制备质粒DNA的方法。其原理为:染色体DNA远远大于质粒DNA,染色体DNA为线状

测序过程常见问题分析与解答

DNA测序样品用什么溶液溶解比较好?    答:溶解DNA测序样品时,用灭菌蒸馏水溶解最好。DNA的测序反应也是Taq酶的聚合反应,需要一个最佳的 酶反应条件.如果DNA用缓冲液溶解后,在进行了测序反应时,DNA溶液中的缓冲液组份会影响测序反应的体 系条件,造成Taq酶的聚合性能下降。 有很多客户在

拉曼光谱常见问题与答案

  一、测试了一些样品,得到的是Raman Shift,但是文献是wave number,不知道它们之间的转换公式是怎么样的?激光波长632.8nm。  答1.两者是一回事。  Raman shift即为拉曼位移或拉曼频移,频率的增加或减小常用波数差表示,拉曼光谱仪得到的谱图横坐标就是波数wave

WiMAX技术常见问题解答

什么是 WiMAX技术?  WiMAX 是一种基于标准的技术,可以替代现有的有线和DSL 连接方式,来提供最后一英里的无线宽带接入。WiMAX 将提供固定、移动、便携形式的无线宽带连接,并最终能够在不需要直接视距基站的情况下提供移动无线宽带连接。在典型的3 到10英里半径单元部署中,获得

成都疫情期间遇地震咋办?官方答疑来了

  成都市卫健委现就市民通过12345热线和网络反映的本次本土疫情防控聚焦问题进行统一回复。请广大市民朋友自觉落实疫情防控措施,主动做好个人防护,聚力夺取疫情防控新胜利。资料图 新华社供图  9月4日,成都市疫情防控指挥部发布的《通告》中提到“其余区(市)县继续按照《成都市新型冠状病毒肺炎疫情防控指

初学者AAS光谱仪问题答疑

  1问: 用同一套工作曲线和24份样品在A仪器和B仪器上测试,最终各得出24个浓度值,在没有标准值的情况下,怎样对这两种结果做出数值分析?以测出的铜值为例。计算出了从1号样品到24号样品的铜值绝对值差,差值在0.028-1之间,较集中在0.3,0.4,0.5之间.想知道同一套工作曲线和样品在不同的

超声波细胞粉碎机问题答疑

我公司生产的超声波细胞粉碎机大屏幕显示,微电脑控制,隔音箱效果好等特点,超声波细胞粉碎机年销量我公司其它产品。   根据客户在购买与使用过程中的有关超声波细胞粉碎机的相关的问题,我们进行汇总,答疑,希望对顾客有一定的帮助。   超声波细胞粉碎机问题一:超声波粉碎机能粉碎干粉吗?   普森答疑:超声波

PCR实验指导与常见问题分析2

Fig. 11. Example of the influence of extension temperature. Multiplex PCR with mixtrues A-B using two different PCR programs. Reactions on the right s

PCR实验指导与常见问题分析5

MgCl2 concentrationRelationship between MgCl2 and dNTP concentrationdNTP concentrations of about 200µM each are usually recommended for the Taq polyme

离心机常见问题与维护如何

剖析与检查修理:检查修理时,首先仔细查看办公指使灯是否亮。转子没安插好,装样品不公平衡,或超超过限量太大时开始工作离心思的。离心思转子普通是用铝合金制作,当受腐蚀后强度减低,容易发生事故故。注意玻璃管有无裂纹。       离心思运转时运用制冷,因为空气的养分,在离心腔内结霜,停机后霜化为水。此时,

余氯测试方法各种常见问题与常识

余氯测试方法各种常见问题与常识传统的余氯测试方法主要有分光光度法和比色法,这二种方法的缺点是:需要5种以上的试剂和溶液,测试精度受样品的颜色和浑浊度的影响。 余氯一般是指溶液中游历氯(例如次氯酸根)浓度,而非氯离子浓度。所以余氯与氯离子是二个不同的含义。在水处理中的加氯量(一般加氯气):一部分是实际

细胞培养常见问题与解答2

8.培养基中丙酮酸钠的作用是什么?丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是,如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。9.为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?GIBICO的胎牛血清 没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白