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定量PCR技术常见问题交流

1. 如果扩增曲线ct值比较靠后的话,32左右,一般有什么方法解决没有 ct值比较靠后,对实验有一定的影响,因为经过那么多次的循环,酶的活性有可能有所下降,这时候扩增效率会有所改变(而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值)。因此最好能够把ct值往前移。 解决办法可以将模板加以浓缩或者抽干之后用少量水去溶解。 2. 为什么合成的引物做不加摸板的对照也能扩增出目的条带,而内参用同样体系就没有呢? 引物被污染。 3. 实时定量PCR,荧光定量PCR,实时荧光定量PCR,real-time PCR,这些是不是同一个概念 是一个概念。 4. 我的标准曲线的slope总是大于4,而且每个梯度的平行ct值差别比较大,原因? 这个斜率是=1/LOG 10(扩增效率),理论上扩增效率=2,斜率是3.322。如果斜率大于4,说明扩增效率比较小。可以考查一下反应体系是否合理?酶活是否正常?平行管的C......阅读全文

2017“DMPK”华山论剑 “质谱沙龙”十一春秋

  分析测试百科网讯 2017年12月9日,北京地区“DMPK&质谱沙龙”联合年会在北京朝阳医院召开,会议由首都医科大学附属北京朝阳医院主办,SCIEX中国、北京质谱医学研究有限公司和分析测试百科网协办。会议的主旨是将DMPK和质谱技术两个主题的内容深入交流,广泛拓展,促进合作和开发,使质谱

2017年暑假生物医学大型仪器理论与实验技术培训班

(二轮通知 2017年7月10~19日,北京)  中国医学科学院基础医学研究所∕北京协和医学院基础学院在医学领域具有国内一流的影响力和知名度,以尖端的医学研究及出色的理论和实验教学成为著名的医学科学研究与教育基地。为了培养生物医学领域创新人才,现推出一年一度的,以尖端仪器和实战训练为特色的“大型仪器

食品安全检测的技术手段

  摘要:检测监测技术是减少食源性疾病的有力保证,食品安全技术的运用首先体现在检测技术上,检测正是保障食品安全最为有效的手段。   1.食品安全离不开检测技术   检测监测技术是减少食源性疾病的有力保证,食品安全技术的运用首先体现在检测技术上,检测正是保障食品安全最为有效的手段。

NaicaTM crystal 微滴芯片式数字PCR系统

   导语:数字PCR技术是基于PCR技术发展起来的核酸检测和定量的最新技术,在众多应用中,在精准医疗方面的应用尤为突出。法国Stilla Technologies公司专注于开发新一代核酸绝对定量技术,其旗下品牌Naica TM Crystal全自动微滴芯片数字PCR仪系

耶拿生命科学:新款PCR设计灵感来自中国客户

  ——访德国耶拿生命科学部中国区经理诸建  分析测试百科网讯 2016年10月10-12日,2016上海慕尼黑分析生化展(analytica China 2016)的生命科学展馆里,德国耶拿生命科学部门首次以独立展位亮相并推出了一系列生命科学新技术与新产品,如革命性的核酸纯化技术Smart Ext

PCR技术的原理与方法(3)

PCR常见问题 一.没有扩增产物 1.循环温度:变性温度、退火温度 2.引物设计 3.DNA聚合酶活性 4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份) 5、DNA样品 二.非特异产物及电泳呈涂布状 1.Mg

一拎即走的快检实验室,耶拿微生物现场快检系统MobiLab2

  2017年10月11日,在BCEIA 2017会议期间,德国耶拿公司在北京国家会议中心隆重举办了“病原微生物现场快速检测系统MobiLab2”的新品发布会。耶拿公司资深的产品经理吴潇韫女士向大家详细介绍了这套设计新颖独特的“一拎即走的快检移动实验室”。  耶拿公司产品经理吴潇韫女士病原微生物现场

核酸检测革命:可替代PCR的犀利技术——RPA

导读重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。本专题为大家详细介绍RPA的原理、引物设计、疑难解答以及在致病菌检测、病毒检测以及癌症研究中的灵活应用。自PCR技术诞生以来已经有三十年了,从经典PCR、实

什么是PCR阴性?

举乙肝的例子来说:通过酶免的方法查乙肝两对半和通过荧光定量PCR的方法学查乙肝DNA小明得了肝炎,但他不知道自己得了肝炎,有一天身体不舒服或者正常体检(比如入职体检),他去看医生,临床医生怀疑他得了肝炎(肝炎有很多种比如病毒性肝炎,也就是病毒倾入他体内后由于人体的三道防线没能把病毒消灭掉,导致病毒在

2016暑假生物医学大型仪器理论与实验技术培训班通知

  点击此处下载完整盖章版培训班二轮通知   中国医学科学院基础医学研究所∕北京协和医学院基础学院在医学领域具有国内一流的影响力和知名度,以尖端的医学研究及出色的理论和实验教学成为著名的医 学科学研究与教育基地。为了培养生物医学领域创新

合肥研究院开展数字定量PCR技术技术讲座

  5月20日,中国科学院合肥物质科学研究院技术生物与农业工程研究所邀请南京润亚生物科技发展有限责任公司技术总监围绕数字定量聚合酶链式反应技术(简称PCR技术)进行专题培训。  培训老师首先阐述了PCR技术的发展历史,PCR经历了传统PCR(核酸电泳定性分析)、实时定量PCR(相对定量分析)、数字P

关注细胞分析!首届微纳流细胞分析学术报告会京召开

  分析测试百科网讯 2018年9月25日,首届微纳流细胞分析学术报告会在北京召开,百余位业内专家学者参与了此次报告会。本次大会为期两天,同期在清华大学化学系举办“第5期微流控芯片质谱联用细胞分析讲习会”。会议围绕着微流控及细胞研究领域的最新研究成果进行交流与探讨,关注微流控细胞分析基础研究与应用开

质谱沙龙第十六期活动报道

      2009年2月22日下午,质谱沙龙第十六期活动在第二炮兵总医院远程会诊中心会议室举行。此次到会者除了来自发酵研究院、清华大学医学院、北京大学分析中心、二炮总医院、军事医学科学院、解放军307医院、北京生命科学研究所、中科院植物所、AB公司

2018年蛋白和肽类药物及诊断试剂研发与质控国际研讨会

2018年蛋白和肽类药物及诊断试剂研发与质控国际研讨会(PPTD 2018)第二轮会议通知  蛋白质和肽类药物及诊断试剂的有效性评价和质量的精确控制是目前全球生物医药产业面临的巨大挑战,是企业研发的重点,是标准化工程化开发的前提。为推动体外诊断与肽类、蛋白质药物工程化发展,加强计量及分析表征技术对质

RT-PCR、QPCR、Real-time PCR、real-time RT-PCR你真的区分的开吗?

多少同学能将 RT-PCR、Realtime-PCR、QPCR区分开?有多少同学还在犯晕?今儿这贴,师兄就带你区分区分,拨开那扇 PCR 迷雾。什么是 RT-PCR?RT-PCR就是逆转录 PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录PCR(reverse tr

生物芯片北京国家工程研究中心:十年磨砺 用“芯”创造

  2010年5月6日,中共中央总书记、国家主席胡锦涛陪同朝鲜劳动党总书记、国防委员会委员长金正日参观博奥生物有限公司。新华社供图  2008年12月27日,中共中央政治局常委、国务院总理温家宝来到北京中关村科技园区,看望广大科技工作者,就园区的创新发展问题进行专题调研。这

2016年寒假生物医学大型仪器理论与实验技术培训班二轮通知

2016年寒假生物医学大型仪器理论与实验技术培训班二轮通知(2016年1月20~28日)   中国医学科学院基础医学研究所∕北京协和医学院基础学院在医学领域具有国内一流的影响力和知名度,以尖端的医学研究及出色的理论和实验教学成为著名的医 学科学研究与教育基地。为了培

第三届中国食品企业实验室检测与管理技术论坛在京举办

  分析测试百科网讯 2016年9月7日,第三届中国食品企业实验室检测与管理技术论坛在北京万方苑国际酒店举办,会议由中国检验检疫学会、太平洋国际展览联合举办,旨在进一步提升食品企业实验室的运行管理水平和自检自控能力,保证实验室检测数据的科学性和准确性,本届论坛的主题为“加强实验室能力建设,提高实验室

3分钟了解:PCR检测怎么做以及注意事项

PCR反应的准备PCR反应体系10×扩增缓冲液10μl4种dNTP混合物(终浓度)各100~250μmol/L引物(终浓度)各5~20μmol/L模板DNA0.1~2μgTaq DNA聚合酶5~10 UMg2+(终浓度)1~3mmol/L补加双蒸水100 μl其中dNTP、引物、模板DNA、Taq

Western Blot实验技术详解和常见问题解答

Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被

荧光定量标准溶解曲线

  全球大爆发的新型冠状病毒肺炎或新型冠状病毒感染疾病的诊断有多种方法,其中针对其病毒核酸的实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测是病原学诊断的金标准。PCR 方法是所有核酸(RNA、DNA)定量检测的重要方法,对于新冠病毒等RNA核酸首先需要逆转录为cDNA,而后PCR方法则基本一致,下面

SLAS 2013分会:美国年会创新计划奖项的侯选者及获得者

  2013年6月6日,实验室自动化与筛选协会2013亚洲会展在上海金茂君悦大酒店盛大开幕,国内外知名药企、生物医学研究专家、学者等应邀参会。“美国年会创新计划奖项的候选者及获得者”报告分论坛于6月7日下午举行,由RainDance科技研发副总裁Darren R.Link博士、百时美施贵宝公司高级研

浅析微电泳仪应用5大注意事项

  详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答   PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,

详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答

详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪

详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答

详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪

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详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪

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详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪

详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答

详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪

陈颖:基于分子生物学和蛋白质组学的食品真伪鉴别技术

   2014年7月31日,第二届国际检验检测技术与装备博览会在北京国家会议中心隆重召开(以下简称检博会)。本届博览会以“高端技术,服务民生”为主题,以“质检、科技、国际”为特色,秉着“搭建国际平台,服务检测市场”的宗旨,为科技服务水平提升、检验检测行业和谐发展、科技成果交流与合作、检验检测仪器拓展

2015年暑期生物医学大型仪器理论与实验技术培训班二轮通知

(2015年7月18~22日)   中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院在医学领域具有国内一流的影响力和知名度,以尖端的医学研究及出色的理论和实验教学成为著 名的医学科学研究与教育基地。为了培养生物医学领域创新人才,现首次推出以 尖端仪器和实战训练为特色的"大型仪器原理与