一种快速简便的进行线粒体膜电位检测的方法

背景简介: 线粒体是细胞新陈代谢的主要细胞器,起着“能量工厂”的作用。线粒体内部通过一系列的氧化反应去氧化丙酮酸和NADH,以产生储存能量的ATP分子。而这一系列反应的驱动力是线粒体膜上电化学质子的梯度差,也叫做膜电位。由于这种质子的梯度差为磷酸化和氧化反应提供了“驱动力”,因此它也被当作一个衡量细胞的整体健康状态的指标,同时也可作为研究环境毒性对细胞新陈代谢影响的一个定量监测的指标。 那么该如何来监测线粒体的膜电位呢? 今天介绍一个简单的方法,即Moxi GO II新一代流式细胞分析仪结合TMRE染料法。 TMRE(四甲基罗丹明高氯酸乙酯)是一种线粒体特异的具有红橙色荧光(540/595nm Ex/Em)的阳离子染料,具有膜通透性,会在带负电荷的线粒体膜中迅速积累。线粒体的膜电位越高,TMRE的积累量越多,荧光值越高,因此可以通过检测TMRE荧光值的强度来定量地评估线粒体膜电位,从而评估细胞的健康状态。 在该应用......阅读全文

线粒体在细胞凋亡中有哪些关键作用

线粒体属于内源性caspase-induced凋亡途径中的中心细胞器。其中第一个线粒体源的凋亡促进因子cytc的释放将会在细胞质中招募apaf1和caspase9,形成凋亡复合体,凋亡复合体中caspase9相互活化,最终活化多种效应caspase(3等)。第二个发现的线粒体凋亡因子smac,在凋亡

细胞核与线粒体的分级分离

一、所需试剂及设备小白鼠、冰块、玻璃匀浆器、普通离心机、台式高速离心机、普通天平、光学显微镜、载玻片、盖玻片、刻度离心管、高速离心管、滴管、10ml量筒、25m1烧杯、玻璃漏斗、解剖剪、镊子、吸水纸、纱布、蜡盘、平皿、牙签。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺

细胞核与线粒体的分级分离

  一、原理    细胞内不同结构的比重和大小都不相同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,根据这一原理,常用不同转速的离心法,将细胞内各种组分分级分离出来。    分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆,在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离,其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步,这种方法已成

如果细胞的线粒体受损会怎么样

线粒体受损最大的影响,就是人类的衰老,帕金森氏病、阿尔茨海黑氏症等疾病,都是由于线粒体的受损而导致的,综合来说,关于线粒体会导致人类的衰老,有三种说法:第一种说法是,线粒体在利用氧制造能量进行细胞分化的过程中,产生了大量自由基,破坏细胞结构,导致细胞的损伤所致,这是由Miquel J和Fleming

细胞核与线粒体的分级分离

一、原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,根据这一原理,常用不同转速的离心法,将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆,在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离,其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步,这种方法已成为研究亚细胞成分的化

如果细胞的线粒体受损会怎么样

线粒体受损最大的影响,就是人类的衰老,帕金森氏病、阿尔茨海黑氏症等疾病,都是由于线粒体的受损而导致的,综合来说,关于线粒体会导致人类的衰老,有三种说法:第一种说法是,线粒体在利用氧制造能量进行细胞分化的过程中,产生了大量自由基,破坏细胞结构,导致细胞的损伤所致,这是由Miquel J和Fleming

细胞线粒体内部精细结构研究(二)

2、改良了传统SIM方法产生衍射光栅的方法2D-SIM成像需要通过产生两束互相干涉的光来形成三种不同偏振方向,且光强在空间上呈正弦变化的结构光。在传统的SIM成像方法中,这一过程除了要依靠液晶硅基的空间光调制器(LCOS-SLM)对光相位进行调制之外,还需要一种特殊的光学器件来改变光的偏振方向——旋

简述细胞内氧化还原状态改变的检测

  这反应了细胞凋亡研究中相对较新的趋势,研究什么样的氧化还原环境引起下游事件的发生。CLONTECH公司的ApoAlertTM GlutathioneDetection Kit通过荧光染料monochlorobimane(MCB)体外检测凋亡细胞细胞质中谷光苷肽的减少来检测凋亡早期细胞内氧化还原状

抗线粒体2型抗体检测的原理

  目前间接免疫荧光法仍然很广泛地用于AMA的筛查。大鼠肾是间接免疫荧光法检测AMA的标准底物。把内因子包被在载片上,制作成生物载片。将稀释的患者样本与生物载片温育,如果样本为阳性,特异性抗体与相应的抗原结合。在第二次温育时,荧光素标记的抗人抗体与结合在生物基质上的抗体反应,形成荧光显微镜下所观察到

抗线粒体2型抗体检测的简介

  抗线粒体抗体(AMA)是一种无器官特异性也无种属特异性的自身抗体,其靶抗原是线粒体膜上的多种蛋白,成分复杂,现知有M1~M99种亚型。M2是原发性胆汁性肝硬化患者血清中抗线粒体抗体反应的主要成分,本质是线粒体内膜上的丙酮酸脱氢酶和α-酮酸脱氢酶的复合体。

Cell子刊颠覆发现:癌细胞可从健康细胞获取线粒体DNA

左图:暗场图像凸显了被荧光染色的线粒体的传递。右图:明场下,有足够的光线可以看到连接的纳米级管道。  新西兰马拉格汉研究中心的迈克•贝里奇教授(Mike Berridge)领导的小组是世界上第一个发现线粒体DNA能在动物肿瘤细胞间移动的团队。他们的文章上周发表在《细胞》杂志的子刊《细胞-代谢》(Ce

活体细胞线粒体肿胀流式细胞仪测定法

主要用途       我 公司血液硫化氢含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过碱性苦味酸与肌酐反应,产生蓝色产物所呈现的吸光峰值的变化,即采用比色法来测定样品中硫化氢含量的而经典的技术方法。该技术经过精心改良亚甲基蓝方法、成功实验证明的。其适用于各种人体、动物血液(包括血清或血浆)样品等硫化氢水平检测

从组织和培养细胞中制备轻线粒体组分

试剂和器材: 1. 匀浆介质:0.25mol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH,pH7.4;2. 按要求向溶液加入蛋白酶抑制剂;3. 磷酸盐缓冲液;4. 低速冷冻离心机,配有30—40ml离心管的吊桶式离心转子;5. 高速离心机,配有30—40ml离心管

Nature:氧气缺乏或能重编码癌细胞的线粒体

  线粒体能够燃烧氧气并为机体提供能量,缺少氧气或营养物质的细胞不得不快速改变能量的攻击来维持生长,近日,一项刊登在国际杂志Nature上的研究报告中,来自普朗克研究所的科学家们通过研究发现,在缺氧和营养不足的情况下,线粒体或能被重编程;胰腺中的肿瘤就能利用这种重编程机制来维持生长(尽管氧气和营养水

胰岛β细胞线粒体稳态调控的分子机制被阐明

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/2/517459.shtm中国科学院上海药物研究所李静雅课题组和谭敏佳课题组合作,联合浙江大学基础医学院孟卓贤课题组、上海交通大学附属仁济医院吴琳石课题组,共同解析了糖尿病患者胰岛β细胞线粒体稳态失衡的新分子机

PNAS:失控的线粒体会引起细胞端粒损伤

  匹兹堡大学希尔曼癌症中心的研究人员为长期以来的观点提供了第一个具体证据,即患病的线粒体污染了它们本应提供能量的细胞。  这篇近日发表在PNAS的论文涉及一项因果实验,目的是启动线粒体连锁反应,这种反应会对细胞造成破坏,一直到遗传水平。图片来源:Qian et al. (2019), PNAS  

Nature:“细胞制图师”刷新线粒体分裂理论

一项最新研究发现几乎所有活细胞都有的“发电机”――线粒体分裂的方式与之前教科书上的并不相同。科罗拉多大学博尔德分校的这项新研究首次揭示了线粒体的真正奥秘。科罗拉多大学博尔德分校的Gia Voeltz教授自1993年作为加州大学大四学生,进入Manuel Ares教授实验室进行RNA剪接研究时,就找到

Science揭示细胞凋亡期间,mtDNA逃离线粒体机制

  在一项新的研究中,由澳大利亚莫纳什大学生物医学发现研究所的Benjamin Kile教授领导的一个国际研究团队发现并拍摄了在细胞死亡期间线粒体DNA(mtDNA)逃离线粒体(细胞内产生能量的细胞器)的确切时刻。相关研究结果发表在2018年2月23日的Science期刊上,论文标题为“BAK/BA

Gasdermin蛋白增强线粒体凋亡信号,抑制癌细胞生长

  半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)可以剪切Gasdermin E (GSDME/DFNA5)释放出GSDME-N结构域,从而通过在细胞膜上形成孔洞介导细胞焦亡。图片来源:《Nature Communications》  近日来自托马斯杰斐逊大学(Thomas Jefferson Un

Nature:“细胞制图师”刷新线粒体分裂理论

  一项最新研究发现几乎所有活细胞都有的“发电机”——线粒体分裂的方式与之前教科书上的并不相同。科罗拉多大学博尔德分校的这项新研究首次揭示了线粒体的真正奥秘。  科罗拉多大学博尔德分校的Gia Voeltz教授自1993年作为加州大学大四学生,进入Manuel Ares教授实验室进行RNA剪接研究时

细胞质的内膜系统线粒体的简介

  (mitochondria)常为杆或椭圆形,横径为0.5~1ηm长2~6ηm但在不同类型激胞中线粒体的形状、大小和数量差异甚大。电镜下,线粒体具有双层膜,外膜光滑,厚6~7nm,膜中有2~3nm小孔,分子量为1万以内的物质可自由通过;内膜厚5~6nm,通透性较小。外膜与内膜之间有约8nm。膜间腔

细胞损伤时线粒体大小改变的相关介绍

  细胞损伤时最常见的改变为线粒体肿大.根据线粒体的受累部位可分为基质型肿胀和嵴型肿胀二种类型,而以前者为常见.  基质型肿胀时线粒体变大变圆,基质变浅,嵴变短变少甚至消失.在极度肿胀时,线粒体可转化为小空泡状结构.此型肿胀为细胞水肿的部分改变.光学显微镜下所谓的浊肿细胞中所见的细颗粒即肿大的线粒体

细胞组分的分析方法——线粒体的分离与观察

一.实验目的用差速离心法分离动、植物细胞线粒体。二.实验原理  线粒体(mitochondria)是真核细胞特有的,司能量转换的重要细胞器。细胞中的能源物质——脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化,并通过藕联磷酸化生成ATP,供给细胞生理活动之需。对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行

细胞ROS和线粒体ROS的区别是什么

  活性氧(ROS)是含氧的化学反应性化学物质。实例包括过氧化物,超氧化物,羟基自由基,单线态氧,和α-氧。在生物学背景下,ROS形成为氧的正常代谢的天然副产物,并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而,在环境压力(例如,紫外线或热暴露)期间,ROS水平会急剧增加。这可能会对细胞结构造成严重

发现线粒体翻译与细胞质翻译协调机制

   中科院生物物理所与中科院动物所、军事医学科学院以及天津科技大学等机构合作,揭示了线粒体翻译与细胞质翻译之间的“协调”机制。研究还揭示了一种全新的男性不育发病途径,对男性不育临床干预具有重要借鉴意义。相关成果4月11日在线发表于《自然—结构域分子生物学》期刊。生物物理所研究员秦燕为通讯作者,该所

线粒体基因

线粒体基因:mtDNA,线状、环状,能单独复制,同时受核基因控制。哺乳动物:无内含子,有重叠基因突变率高。

线粒体作用

⑴若将纯化的正常的线粒体与纯化的细胞核在一起保温,并不导致细胞核的变化。但若将诱导生成PT孔道的线粒体与纯化的细胞核一同保温,细胞核即开始凋亡变化。⑵细胞死亡调节蛋白不论是抑制死亡的bcl-2家族还是促进细胞死亡的Bax家族均以线粒体作为靶细胞器。bcl-2蛋白的C端的疏水肽段能插入线粒体外膜。事实

抗线粒体2型抗体检测的标本采集

  1.患者准备检查前一天晚上8点后避免进食和剧烈运动。患者采血前最好休息15分钟以上。2.标本类型常规采集患者空腹静脉血液4ml置于无抗凝剂的一次性真空采血管中备用。3.标本运送标本采集后应明确标识并由专人及时送检,并注意运送过程中的生物危害性。4.标本处理(1)标本置于37℃孵箱孵育待血液完全凝

叶绿体和线粒体基因组变异检测获突破

  近日,《公共科学图书馆―综合》发表了中国农业科学院油料作物研究所博士后曾长立与合作导师伍晓明研究建立的能高通量检测叶绿体和线粒体基因组遗传变异的新方法。   据曾长立介绍,叶绿体和线粒体基因组作为植物细胞质基因组,对光合作用、呼吸作用等重要生命过程具有重要意义。   研究叶绿体和线粒体基因组

关于抗线粒体2型抗体检测的简介

  抗线粒体抗体(AMA)是一种无器官特异性也无种属特异性的自身抗体,其靶抗原是线粒体膜上的多种蛋白,成分复杂,现知有M1~M99种亚型。M2是原发性胆汁性肝硬化患者血清中抗线粒体抗体反应的主要成分,本质是线粒体内膜上的丙酮酸脱氢酶和α-酮酸脱氢酶的复合体。