HPLC异常峰峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题解析

高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法,这些方法在使用的过程中往往会遇到诸如鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题,如何解决这些问题呢? 1.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移,有时发生快速变化,原因何在?如何解决? 关于漂移问题: ①温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定; ②流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等; ③柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡; 关于快速变化问题 ①流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定; ②泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出; ③流动相不合适,解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合; 2.液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么? ①筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子;......阅读全文

关于色谱保留时间的锁定

时间的主要有三个方面的因素:组分性质、固定液及柱条件和仪器操作条件。对于特定的组分和色谱仪器系统以及色谱柱子,前两个方面的因素通常是不变的,容易调整的则只有操作条件,如:载气压力、流速、柱温等。对于特定的目标组分,方法柱前压为p1时,保留时间为,在其它影响因素不变的条件下,在p1的某个范围内选择6个

色谱理论保留时间的理论

保留时间是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间,不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间,因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一。保留时间由物质在色谱中的分配系数决定:tR = t0(1 + KVs / Vm)式中tR表示某物质的保留时间,t0是色谱系统的死时间,即流动

气相色谱的保留时间

什么叫保留时间?从进样开始至每个组分流出曲线达极大值所需的时间,可作为色谱峰位置的标志,此时间称为保留时间,用 t 表示。 

保留时间漂移的故障排除

保留时间不重现有两种不同的情况:即保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化,而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如,保留时间的漂移往往由柱老化引起;而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上,保留时间漂移的多半原因是不同机理的

相对保留时间如何计算

某组分的校正保留时间与相应标样的校正保留时间之比。相对保留时间,即杂质的保留时间与主成分保留时间的比值,通常在质量标准中作为杂质的定位。结合各国药典的实用案例,相对保留时间与化合物的结构及分离原理相关,其关键因素为固定相的填料及流动相的组成,在进行分析方法耐用性验证中应记录相对保留时间的敏感度,同时

相对保留时间如何计算

某组分的校正保留时间与相应标样的校正保留时间之比。相对保留时间,即杂质的保留时间与主成分保留时间的比值,通常在质量标准中作为杂质的定位。结合各国药典的实用案例,相对保留时间与化合物的结构及分离原理相关,其关键因素为固定相的填料及流动相的组成,在进行分析方法耐用性验证中应记录相对保留时间的敏感度,同时

气相色谱鬼峰及其形成原因追溯(一)

1概述之前介绍了在反相液相色谱应用的时候,经常遇到的鬼峰现象,与之相同,在气相色谱使用过程中,鬼峰出现的概率更大,来源更多,原因查找与排除更加困难。与液相色谱不同的是,气相色谱的载气选择范围有限且没有泵,不存在由于泵的机械原因而导致的假峰现象,但是载气流路上发生的脉冲波动依然也会形成一些鬼峰,但这种

气相色谱鬼峰及其形成原因追溯(二)

1概述前文【气相色谱鬼峰及其形成原因追溯(一)】简单介绍了载气、管路以及进样口及其各部件可能引起的鬼峰。除此之外,如进样小瓶,隔垫,配样时佩戴的橡胶手套,进样针,洗针液以及色谱柱的流失等亦会导致鬼峰的出现。2气相色谱峰来源2.1 进样小瓶与瓶盖引入的鬼峰一般地,对于新的未被使用过的进样小瓶与瓶盖是不

保留时间扣去死时间后剩余的时间叫什么

保留时间和死时间这是气相色谱法的常用术语。死时间:从进样到惰性气体峰出现极大值的时间,以td表示。保留时间:从进样到出现色谱峰最高值所需的时间,以tr表示。保留时间与死时间之差称校正保留时间。以Vd表示。

实验室分析仪器HPLC-常见故障保留时间变化-的原因分析

1.柱温变化 柱恒温 2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱 3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液4.柱污染 每天冲洗柱 5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相 6.柱快达到寿命 采用保护柱 

实验室分析仪器HPLC-常见故障保留时间缩短的原因分析

1.流速增加 检查泵,重新设定流速2.样品超载 降低样品量 3.键合相流失 流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向 4.流动相组成变化 防止流动相蒸发或沉淀 5.温度增加 柱恒温 

实验室分析仪器HPLC-常见故障保留时间延长的原因分析

流速下降 管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡 2.硅胶柱上活性点变化 用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱 3.键合相流失 同前二3 4.流动相组成变化 同前二4 5.温度降低 同前二

色谱柱的使用寿命延长方法

(1)正确的安装和操作  气相色谱柱一旦受到损伤之后,想恢复其分离效能往往是极其困难的,因此要使一根气相色谱柱能够获得更长的使用寿命,zui根本的是在于能够正确的安装和操作,形成良好的使用和维护习惯。    把毛细管柱安装在色谱仪上时,需要将其两端分别与进样口和检测器相连接。一般仪器所用的接头有两种

液相色谱仪的选型(2.2)

2.停流进样。可避免在高压下进样。但在HPLC中由于隔膜的污染,停泵或重新启动时往往会出现鬼峰;另一缺点是保留时间不准。在以峰的始末信号控制馏分收集的制备色谱中,效果较好。

ODS柱保留时间不能重现问题

这是因为被分析物可能具有形成氢键的能力,尽管过去几年来,填料的制造技术有了极大的提高,但不同的厂商的ods填料表面硅醇基的浓度不同。正是这些硅醇基可能与样品发生相互作用。因此,同一被分析物中的各组分在不同牌号的ods柱上的相对保留时间就可能不同。在流动相中加入少量竞争物,如,三乙基胺(tea),将会

色谱保留时间漂移的故障排除

保留时间不重现有两种不同的情况:既保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化,而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如,保留时间的漂移往往由柱老化引起;而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上,保留时间漂移的多半原因是不同

色谱保留时间漂移的故障排除

经营:气体发生器,色谱仪维修,气相色谱仪,液相色谱仪,色谱柱保留时间不重现有两种不同的情况:既保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化,而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如,保留时间的漂移往往由柱老化引起;而柱老化不可能引起保留

调整保留时间与什么有关

一般来说液相的操作不会导致保留时间的变化。首先你得保证流动相是同一个。如果换过流动相就没有可比性了,因为配制过程会有误差的。第二,你得保证平衡。有的时候色谱柱和缓冲液平衡相对较慢。通常半小时平衡好的,但是有的时候需要一小时。如果没有平衡好就进样了,那么保留时间就会不准确。最好再连续进样几次,看看保留

不同物质为什么保留时间相同

这个属于物理学中的热传递问题,只要物体之间或同一物体的不同部分之间存在温度差,就会有热传递现象发生,并且将一直继续到温度相同的时候为止。发生热传递的唯一条件是存在温度差,与物体的状态,物体间是否接触都无关。

甲醇的保留时间与什么有关

你需要明白两件事情。 第一,气相色谱和液相色谱,同一个物质,保留时间应该相同(也就是说同一个物质在同一个时间出峰) 第二,同一个物质峰面积和浓度成正比。也就是说,同样是甲醇,浓度越高,峰面积越大。 首先,这里面应该有一个对照品。其...

保留时间的决定因素介绍

保留时间是由色谱过程中的热力学因素所决定,在一定的色谱操作条件下,任何一种物质都有一确定的保留时间,有着类似于比移值相同的作用,可作为色谱定性分析的依据。

色谱理论关于保留时间的理论

保留时间是样品从进入色谱柱到流出色谱柱所需要的时间,不同的物质在不同的色谱柱上以不同的流动相洗脱会有不同的保留时间,因此保留时间是色谱分析法比较重要的参数之一。保留时间由物质在色谱中的分配系数决定:tR = t0(1 + KVs / Vm)式中tR表示某物质的保留时间,t0是色谱系统的死时间,即流动

调整保留时间与什么有关

一般来说液相的操作不会导致保留时间的变化。首先你得保证流动相是同一个。如果换过流动相就没有可比性了,因为配制过程会有误差的。第二,你得保证平衡。有的时候色谱柱和缓冲液平衡相对较慢。通常半小时平衡好的,但是有的时候需要一小时。如果没有平衡好就进样了,那么保留时间就会不准确。最好再连续进样几次,看看保留

在连续进样过程中,样品峰的保留时间不一致

检查一下泵和溶剂混合装置,确认泵是否正常工作,观察基线流动相比例是否稳定,有这类问题可以去仪路通网站答疑解惑板块。

为什么可以利用色谱峰的保留时间进行色谱定性分析

答:因为在相同的色谱条件下,同一物质具有相同的保留值,当用已知物的保留时间与未知祖坟的保留时间进行对照时,若两者的保留时间相同,则认为两者是相同的化合物。色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,当两相做相对移

液相色谱谱图常见问题解析汇总

你在液相色谱使用过程中是不是会遇到各种各样的问题,别担心,本文针对色谱图的异常问题进行了整理,并给出解决方法,供大家参考。一个峰或几个峰是负峰解决方法:流动相吸收本底高;进样过程中进入空气;样品组分的吸收低于流动相。 所有峰均为负峰解决方法:信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒;光学装置尚未达到平衡

高效液相色谱故障及应急处理办法汇总

高效液相色谱在使用过程中常会出现一些影响分析结果的问题,如果使用人员了解常见问题及其成因和相关解决方法,就能做到早预防勤维护,使分析结果保持较好的稳定性与较高的精确性。高效液相色谱仪系统组成:液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言,柱子、泵和检测

液相标品和样品峰的保留时间不一致怎么办

由于仪器状态不同 保留时间不可能完全一致 相差小于0.2min可以认为是随机误差 如果不放心的话可以做加标验证一下

液相标品和样品峰的保留时间不一致怎么办

由于仪器状态不同 保留时间不可能完全一致 相差小于0.2min可以认为是随机误差 如果不放心的话可以做加标验证一下