港台科研人员近期两项重要研究成果
9月，来自香港大学的范上逵教授在《PNAS》上发表了肝脏肿瘤的最新研究成果。另外，来自台湾中研院的王惠钧副院长和同事也在国际知名学术杂志上发表了有关DNA损伤修复和重组酶的重要文章。 港大范上逵教授等《PNAS》文章 在9月4日的《PNAS》杂志的网络版上公示了一篇由香港大学外科学系和肝病研究中心的范上逵教授、Siu Tim Cheung教授与来自美国加州大学和斯坦福大学的同事联合发表的一篇有关肝脏肿瘤研究的最新成果，论文题为“Distinct pathways of genomic progression to benign and malignant tumors of the liver”。 在这项研究中，研究组在小鼠模型中利用通常与人类肝脏肿瘤相关的遗传损伤重构了肝细胞癌和腺癌的genetic progression。研究人员通过原癌基因MET转基因或水动力转染MET和其他一些基因到成熟小鼠肝脏中，从而触发肿瘤的形......阅读全文
港台科研人员近期两项重要研究成果
9月，来自香港大学的范上逵教授在《PNAS》上发表了肝脏肿瘤的最新研究成果。另外，来自台湾中研院的王惠钧副院长和同事也在国际知名学术杂志上发表了有关DNA损伤修复和重组酶的重要文章。 港大范上逵教授等《PNAS》文章 在9月4日的《PNAS》杂志的网络版上公示了一篇由香港大学外科学系和肝病研究中
DNA重组（DNA－recombination）技术：工具酶
一、限制性内切酶限制性内切酶（restriction endonucleases，RE）是其中最重要的工具酶之一。它是一类核酸水解酶，能识别和切割双链DNA分子中的特定核苷酸序列。（一）命名原则限制性内切酶大多从细菌中发现，根据来源进行命名，限制酶的第一个字母（大写，斜体）为宿主菌的属名，第二、第三
DNA重组技术－酶切
实验概要 通过酶切获得可进行体外重组的载体和外源DNA实验原理 DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开，经分离纯化后，用链接酶将其连接，构成新的DNA分子。 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上，并切割双链DN
关于重组修复的简介
重组修复是DNA修复机制之一，即双链DNA中的一条链发生损伤，在DNA进行复制时，由于该损伤部位不能成为模板，不能合成互补的DNA链，所以产生缺口，而从原来DNA的对应部位切出相应的部分将缺口填满，从而产生完整无损的子代DNA的这种修复现象。这种修复现象最初是在大肠杆菌中发现的，对修复能力缺乏的
DNA重组技术：酶切、连接
实验原理: DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开，经分离纯化后，用链接酶将其连接，构成新的DNA分子。限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。 5’…G↓A
简述SOS应答的工作原理
SOS应答机制最早发现于原核生物细胞中。具体而言，是大肠杆菌对致死性DNA损伤的应答。当细胞内出现过长的单链DNA（ssDNA）时，细胞内的RecA（最早发现的参与大肠杆菌同源重组的蛋白）与之形成一种特殊的RecA-ssDNA复合体。RecA拥有蛋白水解活性，但并不是传统意义上的蛋白水解酶。它可
中科院生态中心DNA损伤修复研究取得进展
日前，中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室汪海林研究组在DNA损伤修复方面取得重要进展，相关研究成果近日在线发表于《细胞发现》杂志。 具有活性的RecA/Rad51核蛋白丝的结构及其介导的链交换过程，一直以来是DNA修复研究的热点和难点。 汪海林研究组设想，在生理条件下
关于DNA损伤修复的重组修复方法介绍
重组修复从 DNA分子的半保留复制开始，在嘧啶二聚体相对应的位置上因复制不能正常进行而出现空缺,在大肠杆菌中已经证实这一DNA损伤诱导产生了重组蛋白,在重组蛋白的作用下母链和子链发生重组,重组后原来母链中的缺口可以通过DNA多聚酶的作用,以对侧子链为模板合成单链DNA片断来填补,最后也同样地在连
拟南芥叶绿体基因组DNA双链断裂修复的全新分子机制
2021年6月16日，清华大学生命学院/清华-北大生命科学联合中心孙前文实验室在Nucleic Acids Research杂志在线发表题为“RNase H1C与单链DNA结合蛋白WHY1/3和重组酶RecA1在拟南芥叶绿体中协作完成DNA损伤修复 (RNaseH1C collaborates
PNAS：研究发现氧基损伤DNA修复新途径
据美国物理学家组织网11月9日报道，美国研究人员发现了一种修复氧基损伤DNA（脱氧核糖核酸）的新途径。论文的第一作者、加州大学戴维斯分校化学教授彼得·比尔称该法为细胞氧化损伤的修复提供了可能。相关研究论文发表在本周出版的美国《国家科学院院刊》上。 比尔的同事、希拉·大卫教授介绍说，作
SOS修复系统修复DNA损伤的介绍
是SOS反应的一种功能。SOS反应是DNA受到损伤或脱氧核糖核酸的复制受阻时的一种诱导反应。在大肠杆菌中,这种反应由recA-lexA系统调控。正常情况下处于不活动状态。当有诱导信号如 DNA损伤或复制受阻形成暴露的单链时，recA蛋白的蛋白酶活力就会被激活，分解阻遏物lexA蛋白,使SOS反应
生态中心在同源重组分子机制研究方面取得进展
近日，中国科学院生态环境研究中心研究员汪海林团队在同源重组分子机制研究方面取得进展，相关研究成果以Flanking strand separation activity of RecA nucleoprotein filaments in DNA strand exchange reaction
聚合酶链反应构建重组DNA
实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE无水乙醇DNA聚合酶CTP仪器、耗材 电泳仪离心机PCR仪实验步骤 1. 制备模板DNA，如DNA不是经氯化铯梯度纯化的，100℃煮沸10 min 以灭活核酸酶。 2. 制备寡核苷酸引物，若PCR产物要进行平端克隆，就应该对引物的5’端羟基进行磷酸化处理。 图一
聚合酶链反应构建重组DNA
基本方案 实验方法原理 利用聚合酶链式反应（PCR），任何两个DNA片段可连接成一个新的重组DNA分子。通过在PCR引物中引入的额外非同源的核苷酸，可在连接处
聚合酶链反应构建重组DNA
2016年09月12日 15:27 来源:上海江林生物科技有限公司>>进入该公司展台 实验材料DNA试剂、试剂盒TE无水乙醇DNA聚合酶CTP仪器、耗材电泳仪离心机PCR仪实验步骤1. 制备模板DNA，如DNA不是经氯化铯梯度纯化的，100℃煮沸10 min 以灭活核酸酶。 2. 制备寡核苷
秦叔逵教授：击破“癌王”僵局，免疫之春破晓而来
近年来，肿瘤免疫治疗方兴未艾。其中，免疫检查点抑制剂作为肿瘤免疫治疗当仁不让的“明星”，在多个瘤种的研究探索令人欣喜。在肝癌治疗领域，基于CheckMate 040研究，美国食品与药物管理局（FDA）批准纳武利尤单抗用于肝癌二线治疗。 今年更新的欧洲肿瘤内科学会（ESMO）肝细胞癌（HCC）的
什么是RecA蛋白？
RecA蛋白是一种形如纤维，每次通过最初形成单体进行伸长和收缩活动的蛋白，在修复受损DNA的过程中发挥重要作用。是recA基因的产物，分子量约38000D，为含4个亚基的四聚体。即使DNA分子有断裂或“空隙”，两个DNA分子也不一定重组。必须有推动重组反应的酶存在，重组才能进行。在这些酶中最主要
DNA重组
目的：简单介绍了DNA重组技术的一些方法。包括重组质粒、PCR等。包括细胞结构、DNA，DNA如何改点等。
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体2
二、噬菌体载体作为细菌寄生物的噬菌体，大多数具有编码多种蛋白质的基因，能利用宿主细胞的蛋白质合成体系，进行生长和增殖。构建的噬菌体载体，以λ噬菌体、M13和粘粒最为常用。㈠ λ噬菌体载体野生型λDNA是一种基因组为4.8 kb的线性双链DNA，全部序列已知，共编码50多个基因。其中约一半基因参与
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定1
重组DNA是在体外用限制性内切酶，将不同来源的DNA分子进行特异地切割，获得的目的基因或DNA片段与载体重新连接，从而组成一个新的DNA杂合分子。重组的DNA分子能够通过一定的方式进入相应的宿主细胞，在宿主细胞中进行无性增殖，获得大量的目的基因或DNA片段，此过程称基因克隆。重组的DNA分子也能够在
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体1
载体（vector）是携带靶DNA（目的DNA）片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。常用的载体是通过改造天然的细菌质粒、噬菌体和病毒等构建而成。目前已构建成的载体主要有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等多种类型，亦可根据其用途不同分为克隆载体和表达载体二类。载体的构建和选择应考虑以下
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组的载体3
在作为载体时，这些噬菌体有一个很大的优点，即克隆到M13mp载体的外源DNA片段（双链），在子代噬菌体便成为了单链形式。故应用M13mp进行克隆，可方便地分离到大量含有外源DNA某一单链的DNA分子。这种单链DNA可在下列工作中作模板：①主要用作双脱氧链终止法进行DNA序列测定的模板；②制备仅有一条
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定2
（1）CaCl2处理以后的转化: 当细菌处于0℃、二价阳离子（如Ca2+、Mg2+等）低渗溶液中时，细菌细胞膨胀成球形，处于感受态；此时转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面，重组DNA在42℃短时间热冲击后吸附在细胞表面，在丰富培养基中生长数小时后，球状细胞恢复原
DNA重组（DNA－recombination）技术：DNA重组与鉴定3
当多克隆位点有外源DNA片段插入时，破坏此酶的N端阅读框架，产生无α互补功能的N端片段，因此在带有外源DNA片段的细菌在含有IPTG/X-gal的培养基上呈白色，见图7-11 。如果外源DNA插入片段相当短，不破坏β-半乳糖苷酶的氨基端氨基酸序列的阅读框，有时产生的重组体菌落不呈白色而是呈浅蓝色。4
DNA重组的作用机制
遗传重组由许多不同的酶催化。重组酶是DNA重组过程中催化链转移步骤的关键酶。 RecA是在大肠杆菌中发现的主要重组酶，负责修复DNA双链断裂（DSBs）。在酵母和其它真核生物中，修复DSB需要两种重组酶。 RAD51蛋白是有丝分裂和减数分裂重组所必需的，而DNA修复蛋白DMC1对减数分裂重组具有特异
简述DNA重组的机制内容
遗传重组由许多不同的酶催化。重组酶是DNA重组过程中催化链转移步骤的关键酶。 RecA是在大肠杆菌中发现的主要重组酶，负责修复DNA双链断裂（DSBs）。在酵母和其它真核生物中，修复DSB需要两种重组酶。 RAD51蛋白是有丝分裂和减数分裂重组所必需的，而DNA修复蛋白DMC1对减数分裂重组具有
DNA的诱导修复的相关介绍
DNA严重损伤能引起一系列复杂的诱导效应,称为应急反应,包括修复效应、诱变效应、分裂抑制及溶原菌释放噬菌体等。细胞癌变也可能与应急反应有关。应急反应诱导切除和重组修复酶系,还诱导产生缺乏校对功能的DNA聚合酶,加快修复,避免死亡,但提高了变异率。单链DNA诱导重组蛋白A,可水解Lex A蛋白,使
DNA修复技术诱导修复过程介绍
DNA严重损伤能引起一系列复杂的诱导效应，称为应急反应，包括修复效应、诱变效应、分裂抑制及溶原菌释放噬菌体等。细胞癌变也可能与应急反应有关。应急反应诱导切除和重组修复酶系，还诱导产生缺乏校对功能的DNA聚合酶，加快修复，避免死亡，但提高了变异率。单链DNA诱导重组蛋白A，可水解Lex A蛋白，使一系
实体肿瘤检测XRCC2基因介绍
该基因编码reca/rad51相关蛋白家族的一个成员，参与同源重组以维持染色体稳定性和修复dna损伤。该基因通过同源重组参与dna双链断裂的修复，并在功能上与中国仓鼠irs1互补，irs1是一种修复缺陷突变体，对多种不同的dna损伤剂表现出超敏反应。This gene encodes a membe
XRCC2基因编码的功能和结构描述
该基因编码reca/rad51相关蛋白家族的一个成员，参与同源重组以维持染色体稳定性和修复dna损伤。该基因通过同源重组参与dna双链断裂的修复，并在功能上与中国仓鼠irs1互补，irs1是一种修复缺陷突变体，对多种不同的dna损伤剂表现出超敏反应。This gene encodes a membe