多肽磷酸化修饰及检测方法

磷酸化影响着细胞生命的方方面面。在细胞中,大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关,如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质及多肽的研究可以帮助人们阐述上述过程的机理,进一步认识生命活动的本质。肽谷生物依据自身原料优势和技术优势,可以合成含有磷酸化丝氨酸(pSer)、磷酸化苏氨酸(pThr)、磷酸化酪氨酸(pTyr)的多肽,并可以提供含有一个,两个,三个,四个,五个磷酸化位点修饰的高质量多肽。1. 多肽磷酸化标记简介磷酸化多肽主要指肽链中的Ser、Tyr和Thr残基的侧链羟基被修饰成酸式磷酸酯多肽。磷酸化多肽是研究蛋白质磷酸化过程的必不可少的工具,因此研究蛋白质及多肽的磷酸化反应并确定成熟简便的合成路线就变得非常重要。目前,多肽的磷酸化修饰方法主要有两种: (1)将适当保护的磷酸化氨基酸直接引入到多肽序列中;&n......阅读全文

质谱沙龙第十九期活动报道

  2009年5月23日,质谱沙龙第十九期活动在清华大学生物医学测试中心举行。此次到会者除了来自二炮总医院、西苑医院、清华大学医学院、发酵研究院、中科院微生物研究所、空军总医院、天津博纳艾杰尔科技、AB公司等老朋友外,还有来自戴安公司、东西电子的新朋友。报告后的讨论一直洋溢着热烈的气氛。   

人用聚乙二醇化重组蛋白及多肽制品

1  概述  聚乙二醇(polyethylene,PEG)是一类由环氧乙烷聚合而成的化合物,具有一定分子量分布与亲水性特点,呈线性、分支型及其他特殊类型的分子形态。人用聚乙二醇化重组蛋白及多肽制品是通过聚乙二醇端基的活性基团与重组蛋白或多肽的氨基酸侧链基团、N端/C端的氨基或羧基发生共价反应,修饰而

甲基化检测方法(亚硫酸氢盐修饰后测序法)

甲基化是目前的研究热点,就我所做的一点工作并其中一点心得,与大家分享。希望能够对大家有所帮助。 第一部分 基因组DNA的提取。 这一步没有悬念,完全可以购买供细胞或组织使用的DNA提取试剂盒,如果实验室条件成熟,自己配试剂提取完全可以。DNA比较稳定,只要在操作中不要使用暴力,提出的基因组DNA应

引物修饰的常见类型及应用

  脱氧次黄嘌呤(deoxyInosine,dI):    脱氧次黄嘌呤是一个自然存在的碱基, 虽然不是真正意义上的通用碱基但当与其它碱基结合时会比其它碱基错配相对更稳定。 脱氧次黄嘌呤与其它碱基的结合能力为dI:dC > dI:dA > dI:dG > dI:dT. 在DNA聚合酶的催化下,脱氧

引物修饰的常见类型及应用

脱氧次黄嘌呤(deoxyInosine,dI):脱氧次黄嘌呤是一个自然存在的碱基, 虽然不是真正意义上的通用碱基但当与其它碱基结合时会比其它碱基错配相对更稳定。 脱氧次黄嘌呤与其它碱基的结合能力为dI:dC > dI:dA > dI:dG > dI:dT. 在DNA聚合酶的催化下,脱氧次黄嘌

多肽合成的研究及应用现状

  多肽合成的研究及应用现状   多肽是一种与生物体内各种细胞功能都相关的生物活性物质,它的分子结构介于氨基酸和蛋白质之间,是由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成的化合物。到现在,人们已在人体中发现和分离出一百多种肽类,关于多肽的研究与应用,也取得了巨大的进步,引发了空前的研究热潮。

多肽合成的研究及应用现状

一、前言    多肽类化合物是一类重要的生物活性分子。20世纪70年代生物技术在生命科学领域的应用,使多肽等生物技术药物的研究进展迅速;与此同时,随着多肽固相合成技术及高效液相色谱(HPLC)纯化、分析技术等的发展,合成多肽药物的开发也成为药物研究中的一个活跃领域。    采用化学合成方法制备多肽,

多肽合成的研究及应用现状

  多肽合成的研究及应用现状   多肽是一种与生物体内各种细胞功能都相关的生物活性物质,它的分子结构介于氨基酸和蛋白质之间,是由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成的化合物。到现在,人们已在人体中发现和分离出一百多种肽类,关于多肽的研究与应用,也取得了巨大的进步,引发了空前的研究热潮。

液相色谱质谱联用系统的其他应用

在生物、医药、农业、化学、精细化工等方面均可应用:1.蛋白质和多肽的研究(蛋白的分子量测定及序列分析,肽谱测定,巯基及二硫键定位,蛋白质翻译后修饰分析-磷酸化、糖基化或化学修饰位点的确认等);2.寡核苷酸和核酸的分析;3.多糖的结构的研究;4.中药活性组份和其它天然产物的分析、鉴定;5.药物代谢产物

多肽含量的测定有哪些方法

多肽含量的测定方法与有些蛋白质含量的测定方法相同,但并非所有蛋白质含量的测定方法都适用于多肽的含量测定,本文介绍了几种常见的多肽含量测定的方法:①双缩脲法;②Folin—酚试剂法;③OPA法(邻苯二甲醛法);④紫外吸收法,并且进行了比较。

多肽合成仪的操作方法

1、准备1mTU/HOBt溶液1)配制0.5mol/LHOBt的DMF溶液:称量13.5g无水HOBt(相对分子质量135.1),置于250ml烧杯中,加入DMF至200ml。2)配制0.45mol/LHBTU/HOBt溶液:将上述溶液倒人装有37.9gHBTU(0.1mM)的烧杯或烧瓶中。3)利用

关于多肽的合成方法介绍

  1、固相合成法、液相合成法  以氨基酸为原料定向合成某种单肽,属医药原料中间体,主要用于西药配方,以增强药效、增强人体对药的吸收速度和吸收率。  2、酸解法或碱解法  这种肽主要出现在日本。用酸解法生产的“大豆多肽”,属“食品添加剂”,主要用于老人和儿童食品,其目的是增强这两种人群对食品营养的吸

多肽的合成方法有哪些?

  1、固相合成法、液相合成法  以氨基酸为原料定向合成某种单肽,属医药原料中间体,主要用于西药配方,以增强药效、增强人体对药的吸收速度和吸收率。  2、酸解法或碱解法  这种肽主要出现在日本。用酸解法生产的“大豆多肽”,属“食品添加剂”,主要用于老人和儿童食品,其目的是增强这两种人群对食品营养的吸

植物所揭示糖基化和磷酸化修饰介导小麦春化作用新机制

  冬小麦开花需要长时间环境低温的诱导,该过程称之为春化作用。不同冬小麦品种的春化特性及其与冬春季气温适应程度会直接影响其产量。到目前为止,许多春化相关基因VRNs相继被克隆和研究,但人们对春化时间的衡量以及春化感知机制并不十分清楚,影响了冬小麦分子育种的开展。氧-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)

什么情况应该考虑用设计多肽做抗原?

如果氨基酸序列已知,但是由于基因克隆或表达等原因得不到抗原蛋白,或者仅需要得到针对抗原蛋白某几个特定表位的抗体,就可以采用多肽合成的方式得到抗原。例如仅需要生产针对蛋白质某个区域的特异抗体,比如研究蛋白质N端的前体物,可以设计N末端的多肽抗原。如果抗体的使用目的是识别修饰的氨基酸,如磷酸化的丝氨酸、

南京大学研究团队实现纳米孔蛋白质组学重大突破

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/9/509528.shtm蛋白质是生命活动的执行者,由20种天然存在的蛋白质氨基酸构成。与高歌猛进的DNA测序技术相比,高灵敏、高通量的蛋白质测序技术的发展严重滞后,目前仅Edman降解法和质谱法能做到蛋白质测

活性肽的主要应用

  1.功能性食品:具有一定功能的肽类食品,目前是国际上研究的热点。日本、美国、欧洲已捷足先登,推出具有各种各样功能的食品和食品添加剂,形成了一个具有极大商业前景的产业。  2.肽类试剂:纯度非常高,主要应用在科学试验和生化检测上,价格十分昂贵。  3.肽类药物。  活性肽分子结构复杂程度不一,可从

有哪些多肽纯度级别?如何选择?

Ontores(浙江鸿拓)有哪些多肽纯度级别?如何选择?Ontores(浙江鸿拓)提供的修饰肽,多肽纯度级别有:粗品肽,脱盐肽,75%,80%,>85%,>90%,>95%,>98%和>99%。一般根据研究应用的不同,建议分别选用如下级别:• >70%:肽微阵列,作为制备抗体的抗原,层析法,ELIS

大鼠磷酸化AKT蛋白(AKT)ELISA检测法

大鼠磷酸化AKT蛋白(AKT)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 AKT 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的AKT与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠AKT,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Str

蛋白磷酸化检测的注意事项

1、样本准备过程中防止蛋白质降解和保留翻译后修饰     样本准备过程中,细胞会释放蛋白酶和/或去磷酸化酶,为了减少这些酶的活性,处理样本的过程应在冰上进行,并预先冷却所有缓冲液,并且建议用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液。2、磷酸化特异性抗体的选择     选择磷酸化特异性抗体时,选择所要检测位

蛋白翻译后修饰的基金申请解析与研究注意点(一)

每年三月初,都是科研界的“高考”倒计时,因为距离国自然基金申请的截止日期已不到半月。纵观历年国自然申请情况,蛋白的翻译后修饰都是申请中重大研究方向之一。2018年国自然统计表明,磷酸化、泛素化、乙酰化等修饰的相关基金项目,总研究资助金额超过2亿。 继上周的肠道微生物研究方案解析

蛋白翻译后修饰的基金申请解析与研究注意点(一)

每年三月初,都是科研界的“高考”倒计时,因为距离国自然基金申请的截止日期已不到半月。纵观历年国自然申请情况,蛋白的翻译后修饰都是申请中重大研究方向之一。2018年国自然统计表明,磷酸化、泛素化、乙酰化等修饰的相关基金项目,总研究资助金额超过2亿。继上周的肠道微生物研究方案解析后(国自然冲刺:打通菌群

简述活性肽的主要应用

  目前对肽类物质的应用主要在以下三个方面:  1.功能性食品:具有一定功能的肽类食品,目前是国际上研究的热点。日本、美国、欧洲已捷足先登,推出具有各种各样功能的食品和食品添加剂,形成了一个具有极大商业前景的产业。  2.肽类试剂:纯度非常高,主要应用在科学试验和生化检测上,价格十分昂贵。  3.肽

甲基化检测方法(亚硫酸氢盐修饰后测序法)1

第一部分 基因组DNA的提取。这一步没有悬念,完全可以购买供细胞或组织使用的DNA提取试剂盒,如果实验室条件成熟,自己配试剂提取完全可以。DNA比较稳定,只要在操作中不要使用暴力,提出的基因组DNA应该是完整的。此步重点在于DNA的纯度,即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取过程中需使用蛋

甲基化检测方法(亚硫酸氢盐修饰后测序法)(2)

第三部分 修饰后DNA纯化回收EP管如无特别说明均为高压蒸汽灭菌的。1. 将移液器枪头伸入石蜡油层下,先轻轻加压使其中一小段石蜡油排出,然后吸取混合液至一洁净1.5mlEP管中。2:以下使用Promega Wizard Cleanup DNA纯化回收系统(Promega,A7280)1)70℃水浴预

甲基化检测方法(亚硫酸氢盐修饰后测序法)2

此步细节:1:在使用注射器时,一定要用力均匀且轻,如使用暴力,会将小柱内的薄膜挤破,失去作用。2:乙酸铵、糖原不需新鲜配制,糖原配好后放在-20度保存,乙酸铵室温即可,因为这样浓度的乙酸铵非常难溶,一旦放在4度,取出用时也会有很多溶质析出。3:异丙醇、70%乙醇都不需要新鲜配制,但如果用量大,现场配

什么是多肽和多肽定制?

多肽定制一般指人工多肽合成的一种服务,指根据客户的需要,如序列、纯度、分子量等的不同要求,进行加工合成的满足特定需要的多肽合成服务。通过质谱仪进行分子量的确认,确定粗品MS的正否与否,再将粗品通过高效液相色谱即HPLC纯化,得到精品肽。根据不同实验,可以选择不同的多肽纯度,原则上是纯度越高,价格越高

什么是多肽和多肽定制?

  多肽定制一般指人工多肽合成的一种服务,指根据客户的需要,如序列、纯度、分子量等的不同要求,进行加工合成的满足特定需要的多肽合成服务。通过质谱仪进行分子量的确认,确定粗品MS的正否与否,再将粗品通过高效液相色谱即HPLC纯化,得到精品肽。根据不同实验,可以选择不同的多肽纯度,原则上是纯度越高,价格

什么是多肽和多肽定制?

  多肽定制一般指人工多肽合成的一种服务,指根据客户的需要,如序列、纯度、分子量等的不同要求,进行加工合成的满足特定需要的多肽合成服务。通过质谱仪进行分子量的确认,确定粗品MS的正否与否,再将粗品通过高效液相色谱即HPLC纯化,得到精品肽。根据不同实验,可以选择不同的多肽纯度,原则上是纯度越高,价格

糖基化修饰调控阿尔茨海默病beta淀粉样蛋白病理性聚集

  在阿尔茨海默病(AD)进展中,存在beta淀粉样蛋白(β-Amyloid,Aβ)的积累。Aβ在受影响的脑组织区域形成病理性聚集,被认为与AD的发生、进展和表型密切相关。多种翻译后修饰(如磷酸化、硝基化、糖基化等)对Aβ的病理性聚集及体内生物活性具有重要且不同的调控作用。在AD患者脑内,多种病理相