数字PCR在取样困难病人的血浆粪便尿液等复杂样本新冠...
数字PCR在取样困难病人的血浆粪便尿液等复杂样本新冠病毒检测的应用截止目前,针对疫情相关人群做新冠肺炎筛查时,主要采用鼻咽拭子核酸检测,原因是方便快捷,适合大规模筛查。但是,对于一些无症状感染者或轻症感染者来说,感染后病情恢复得很快,可能3至5天咽部核酸就检测不到了。通过研究发现,一部分感染者粪便或肛拭子核酸阳性的持续时间比上呼吸道持续时间更长。因此,增加肛拭子等复杂样本的核酸检测能够提高感染者检出率,减少漏诊。日前,湖南省疾控研究人员对已经确诊的3例新型冠状病毒肺炎患者不同时间的全血、尿液、粪便标本同时进行qPCR和Naica数字PCR(cd-PCR)的核酸检测,并比较了两种方法检测各类样本中2019-nCoV的差异性,提出改进2019-nCoV核酸检测的综合策略,为核酸检测阴性患者提供更多诊断支持。本实验中数字PCR在病例发病早、中、晚期标本中均能检测到阳性微滴,而qPCR漏检了发病小于5天的标本,检测到的阳性核酸均以中晚期......阅读全文
Naica数字PCR技术对NSCLC患者血浆中EGFR相关突变检测的应用
非小细胞肺癌(NSCLC)肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,已成为我国城市人口恶性肿瘤死亡原因的第一位。其中,非小细胞肺癌约占所有肺癌的80%,约75%的患者发现时已处于中晚期,5年生存率很低。而非小细胞肺癌中最常见,且有针对性靶向药物的突变就是“表皮生长因子受体”(EGFR)突变。表皮生长因子受体
数字PCR在甲基化含量鉴定的应用
作为表观遗传学研究中重要的一个研究方向——甲基化程度分析,现阶段有不同的方法或技术来进行研究:如传统的亚硫酸氢盐处理后的克隆测序法、抗体检测法、定量PCR检测法等受限于方法学的问题,不能获得甲基化程度的精确定量,而数字PCR系统通过对样品的微液滴处理及目标分子的绝对拷贝数定量,为甲基化程度的精确定量
数字PCR在糖尿病治疗中的应用
数字PCR技术目前在糖尿病中的研究热点,通过定量检测非甲基化DNA的水平,对I型糖尿病β细胞死亡进行定量,从而监控病情发展。
数字PCR在-药物基因组检测的应用
能够通过PCR技术实现药物基因组的检测,提高合理用药水平,具有通量较高,操作简单,仪器设备易普及等优点。 数字PCR冷知识:胎儿性别不是只有B超可以看出来,一只精通数字PCR的科研狗,也可以测出来。
数字PCR在无创产前筛查的应用
无创伤的产前诊断, 如21号染色体为3倍体的唐氏综合征、已知父母基因型的胎儿地中海贫血或胎儿遗传性耳聋基因检测等。目前无创检测标本来源主要为孕妇血液,而待检测的胎儿DNA受到母体DNA的干扰,影响了检测的准确性。数字PCR技术可以作为二代测序法的补充来进行无创伤产前诊断,从而提高工作效率、降低检测
数字PCR的原理
数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应,部分这些反应包含了靶标分子(阳性),而其他不包含(阴性)。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多。 在扩增期间,TaqMan® 化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。 当不存在任何靶标序列时,没有信
数字PCR的原理
数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应,部分这些反应包含了靶标分子(阳性),而其他不包含(阴性)。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多。 在扩增期间,TaqMan® 化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。 当不存在任何靶标序列时,没有信
数字PCR的优势
数字PCR是生命科学领域最引人瞩目的创新之一。与其他传统分子诊断技术相比,数字PCR技术的优势在于: 高灵敏度,可实现单分子级检测dPCR本质上将一个传统的PCR反应变成了数万个PCR反应, 在这数万个反应单元中分别独立检测目的序列,从而大大提高了检测的灵敏度。 高精度,可检测微
【中标】海南疾控发布新冠防控384万公告-涉PCR、核酸提取等
海南政采招投标有限公司受海南省疾病预防控制中心的委托,就“新冠疫情防控能力建设项目”项目(项目编号:HNZC2020-002-002)组织采购,内容设计实时荧光定量PCR仪、医用低温冰箱、全自动核酸提取仪、迷你离心机、涡旋振荡器、移液器等。现评标工作已经结束,中标结果如下: 一、项目信息 项
宜宾疾控中心紧急采购公示-涉新冠肺炎检测试剂盒、PCR等
分析测试百科网讯 近日,宜宾市疾病预防控制中心关于新型冠状病毒肺炎疫情期间紧急采购公示(第二次),采购一批新型冠状病毒肺炎疫情相关产品,包括新型冠状病毒检测试剂盒(双重),新型冠状病毒核酸提取试剂,全自动核酸提取仪,实时荧光定量PCR仪,台式低速离心机等仪器产品。 以下是公告全文:宜宾市疾病预
数字PCR技术在DNA甲基化检测中的应用
DNA甲基化是目前研究最多的表观遗传修饰之一,发生于CpG二核苷酸序列C5位置的胞嘧啶上,多发生于CpG岛上,研究发现,DNA甲基化参与调节多种细胞过程,包括胚胎发育,转录,X染色体失活,基因组印迹、染色体稳定性等。许多研究发现,DNA甲基化在一系列的疾病(如癌症等)起到十分重要的作用。在癌症患者中
李兰娟院士:最怕的不是病人多,而是漏了病人
中国工程院院士、国家卫健委高级别专家组成员李兰娟17日在武汉接受中新社记者专访时表示,只要把传染源100%找出来且有效控制、对已发现病人采取针对性治疗、把感染者进行隔离,感染人数就应该会降下去、外界就是安全的。图片来源于网络 “除湖北以外各省,我认为(疫情形势)逐渐出现了好转。”李兰娟说,湖
关于尿液分析试纸的样本要求介绍
1)尿液分析试纸— 原则上用新鲜尿,检查时应将尿充分搅拌,应在2小时以内对尿液进行检测。尿胆原和胆红素因不稳定,请用一小时以内采集的尿 2)尿液分析试纸— 冷冻或冷藏的尿标本,应恢复到室温,充分搅拌后再检查 3)尿液分析试纸— 容器经洗涤剂、消毒剂处理后应以清水冲洗干净 4)尿液分析试纸—
尿液和粪便标本应该怎么留取?
生活中、工作中,总是不乏听到一些叹息声,有的来自患者,有的来自学生,有的更是来自于我们自己。生活本不该如此,除了抱怨和叹息声,我们更有着梦想和远方。真实场景再现患者:医生你为啥不让我验大便,不就时间长了一点吗,我之前在人家医院放了一天人家二话没说就给我验了,你们是不是故意刁难我?实习生:老师你整天让
PCR干扰实验的设计思路
之前一系列的文章已经涵盖了荧光定量PCR的检测试剂评价、提取试剂评价和PCR仪器的评价(检测系统评价系列)。但是这仍然解决不了临床上遇到的所有问题,干扰试验也是大家比较关心的一个热点。我试着根据已有的标准来分享下我对于PCR干扰实验的设计思路。一、PCR试验的干扰物1.内源性干扰物 endogeno
数字PCR简介
1985年美国科学家Kary Mullis发明PCR方法以后,PCR已经成为生命科学研究领域中最常规的实验方法之一。PCR是用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,可看作是生物体外的特殊DNA复制。PCR的最大特点,是能将微量DNA大量扩增。最传统的一代PCR采用琼脂糖电泳的方式对PCR产物进
数字PCR技术
数字PCR作为第三代PCR技术,它是将分子生物学与现代微机电、微纳制造等工程技术相结合的典范。数字PCR以聚合酶链式反应的理论和技术体系为基础,结合现代微机电和光学检测技术,实现单分子水平的核酸精确定量检测。数字PCR的核心思想是将核酸样品平行划分为大规模单分子水平的微反应单元,然后对众多微反应单元
新冠抗原抗体检测
疫情动态 根据世卫组织最新实时统计数据,截止小编撰稿,目前全球确诊新冠肺炎2248654例。世卫组织发言人玛格丽特·哈里斯14日表示,疫情尚未到达顶峰,就单个国家而言,目前美国的新冠疫情是全球最严重的,美国新冠肺炎确诊病例已超过73万,意大利确诊病例累计175925例,西班牙确诊病例达1944
数字PCR在传染性疾病的检测的应用
数字PCR技术因起高精密度、耐受能力强、高灵敏度等优点,逐渐被用于病毒载量分析的相关研究。如HIV抗逆转录病毒治疗过程中病毒残留量的监控;HBV耐药突变的检测;HCV的分子分型;抗甲氧西林金黄色葡萄球菌的院内感染监控;环境微生物不同功能基因之间的连锁分析等等。
尿液生成和样本采集及处理
尿液生成肾单位没有集合管,近曲小管重吸收 全部重吸葡萄糖,肌酐几乎不被吸 抗利尿激素调节远曲小管集合管 最终实现浓缩和稀释尿液标本种类晨尿:血细胞、上皮细胞、病理细胞、管型等有形成分,以及人绒毛膜促性腺激素(hCG)随机尿:门诊及急诊检查计时尿:3h尿,1h尿排泄率检查 餐后尿,病理性糖尿、蛋白尿或
新冠病毒感染肺炎的零号病人有什么医学意义
“零号病人”指的是第一个得传染病,并开始散播病毒的患者。在流行病调查中,也可叫“初始病例”或“标识病例”,正是他造成了大规模的传染病暴发。 零号病人的医学意义 1. 能够锁定传染源,比如是否接触了什么动物? 2. 锁定传播方式,比如跟动物是如何接触的? 3. 了解流行病史,了解到病毒在人
将新冠病人手术延后七星期可减死亡风险
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2021/3/454937.shtm 中新社香港3月23日电 (记者 韩星童)香港中文大学(中大)23日公布,中大与海外外科专家联合研究发现,新冠肺炎确诊病人若于确诊后六星期内接受手术,会增加术后的死亡风险,研究建议
新冠肺炎患者的血液|大小便样本的处理和检测
目前的资料表明:经呼吸道飞沫传播是2019-nCoV的主要传播途径,亦可通过接触传播(如手-口途径、粪-口途径)。因此来自2019-nCoV感染病人的非呼吸道样本也具有潜在的感染性,应尽量避免暴露环节(如不开盖的血常规检测模式)以及避免产生气溶胶(离心后静置)。不可避免的暴露性操作(如开盖等)应在生
【招标】郑州市医院发布新冠疫情招标-涉PCR-流式细胞仪等
近日,郑州市第六人民医院发布新冠肺炎疫情防控应急医疗设备采购项目(0315-1)-采购公告。 根据新型冠状病毒感染肺炎防疫工作的需要,按照《财政部办公厅关于疫情防控采购便利化的通知》(财办库【 2020】 23号)、《河南省财政厅关于切实加强疫情防控期间政府采购活动管理有关事项的通知》(豫财购
应对新冠疫情防控-中国疾控中心传染病所紧急采购PCR等
分析测试百科网讯 为应对新型冠状病毒感染肺炎疫情防控工作,中国疾控中心传染病所紧急采购实时荧光定量PCR仪和半自动热封仪。参照竞争性磋商的评选方式,邀请合格供应商就本项目提交采购响应文件。实质性响应只有一家供应商的,可直接进行单一来源谈判。谈判时间是2020年02月25日,下午13:30。谈判响
【招标】南平市某医院采购新冠防控设备,涉PCR、安全柜等
分析测试百科网讯 近日,南平市某医院发布应急采购防控医疗设备项目公告,计划采购生物安全柜、涡旋震荡仪、荧光定量PCR仪、低温高速离心机等设备,预算金额近70万。具体详情如下: 项目名称:南平市某医院应急采购防控医疗设备项目 项目编号:HKZ(南)20006 项目联系方式: 项目联系人:沈
数字PCR在临床和预后融合基因检测的应用
众所周知,融合基因检测对临床诊断及预后指导都具有十分重要的意义。那么究竟什么是融合基因呢?融合基因的发现始于上个世纪60年代,它是指染色体断裂后又重新拼接。如果恰巧拼接时发生了错误,使两个不同基因互相融合,大多数情况下,它会造成某些序列或功能异常的蛋白表达,亦或者是某些基因表达失调,从而促进肿瘤的发
数字PCR在精准医学领域的十大应用
数字PCR是一种新的核酸检测和定量方法,借助微液滴或微坑,通过单个模板分子的PCR扩增,可实现不依赖于标准曲线和参照样本的准确、绝对定量。数字PCR使得反应更灵敏、结果更可靠、展示更直观,尤其适用于微量或痕量DNA检测与定量。下面我们就目前已经比较明确的数字PCR应用方向做个介绍。基因表达差异研究数
数字PCR在拷贝数变异(CNV)研究的应用
微滴化的样品处理及检测,这种摆脱Ct值的计算方法而直接获取目标基因的绝对拷贝数,为拷贝数变异的研究提供了绝对的检测精度。是其他诸如二代测序、芯片杂交等平台无法达到的。采用数字PCR能够有效对二代测序(NGS)和微阵列比较基因组杂交(aCGH)等实验结果进行验证,并具有检测周期短、成本低、样本通量高等
新型冠状病毒(2019nCoV)核酸实验室检测要点
2020庚子之春,突如其来的新冠病毒疫情,又一次将PCR推在疫情防控的前沿,使核酸检测成为热搜。那么,什么是核酸检测?它在新冠肺炎的诊断中起什么作用?如何发挥作用?如何在检测中保护检测人员安全、避免交叉传染和二次污染?为了帮助更多人了解这个熟悉而陌生的名字,带着诸多问题,让我们从实验室角度走近201