腺病毒载体疫苗的制备与分离

通常来说,开发一种新型疫苗需要经过数年的艰苦过程,包括完整的生产工艺确定。这样的模式没办法对一些爆发性的传染疾病做出快速响应,而且面对一些商业潜力比较小的区域性疾病或者是某些定制化疫苗也是力有不逮。 在病毒载体家族里面,腺病毒的应用非常广泛,它具有诱导抗体和T细胞组合反应的潜能。虽然人群中广泛存在的先天免疫可能会使人源腺病毒疫苗载体的效果大打折扣,但是如果采用灵长类动物来源的腺病毒或者人源稀有型腺病毒就可以克服这一障碍,保证安全的同时免疫原性也大大提升,采用腺病毒平台的埃博拉疫苗已经在中国上市,而且很多项目处于临床阶段和临床前,针对的疾病包括疟疾、中东呼吸综合症(MERS)、呼吸道合胞病毒和多种癌症。 腺病毒(Adenovirus)是一种没有包膜的直径为70~90nm的颗粒,由252个壳粒呈廿面体排列构成。 图片来源:https://www......阅读全文

腺病毒载体综述

腺病毒的一般特性    腺病毒的形态是特征性的二十面体病毒壳体(Stewart et al., 1993)。其病毒壳体含有三种主要的蛋白:六邻体(II),五邻体基底(III)和纤突(IV),还有多种其他的辅助蛋白VI,VIII,IX,IIIa和Iva2(Fig. 1)。腺病毒基因组是一个线性的双链D

腺病毒载体的分类

第一代腺病毒载体:一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体,此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应,纯化后可以安全使用,体内表达周期可达4周。第二代腺病毒载体:E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性方面有所

腺病毒载体综述2

其他疗法    随着高龄人口的增加,对于人神经退化疾病如帕金森氏病的治疗提出了一个重要的挑战。腺病毒,因其可以感染有丝分裂后的细胞,同时具有潜在的高转导效率和在中枢神经系统免疫特惠区(immunologically privileged site)中的低病原性,因此是进行神经疾病基因治疗的有效载体。

腺病毒载体有什么缺陷

它的优点体现在转基因效率高,通过体外实验检测结果显示,它能达到将近100%的转导效率,能转到不同类型的人组织细胞。它的缺点体现在:第一,基因组不能整合到宿主基因组上。第二,感染范围较广,缺乏明显的靶向性,有可能会让人的正常组织细胞被感染,产生一定不良反应。第三,它跟机体靶向细胞结合的同时会对异己抗原

腺病毒载体的分类介绍

  第一代腺病毒载体:一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体,此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应,纯化后可以安全使用,体内表达周期可达4周。  第二代腺病毒载体:E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性

腺病毒载体有什么缺陷

它的优点体现在转基因效率高,通过体外实验检测结果显示,它能达到将近100%的转导效率,能转到不同类型的人组织细胞。它的缺点体现在:第一,基因组不能整合到宿主基因组上。第二,感染范围较广,缺乏明显的靶向性,有可能会让人的正常组织细胞被感染,产生一定不良反应。第三,它跟机体靶向细胞结合的同时会对异己抗原

腺病毒载体的应用优势介绍

  腺病毒载体转基因效率高,体外实验通常接近100%的转导效率;可转导不同类型的人组织细胞,不受靶细胞是否为分裂细胞所限;容易制得高滴度病毒载体,在细胞培养物中重组病毒滴度可达(10E+11)/ml;进入细胞内并不整合到宿主细胞基因组,仅瞬间表达,安全性高。因而,腺病毒载体在基因治疗临床试验方面有了

概述腺病毒载体的作用机制

  典型的腺病毒载体系统如:穿梭质粒pCA13/腺病毒基因组质粒pBHG11/包装细胞293细胞。pCA13/的HCMV IE启动子-多克隆位点-SV40 AN(poly A)构成外源基因的表达盒,该表达盒的插入使腺病毒E1基因缺失,但是保留其两端侧翼序列(左侧的1~3bp的ITR,右侧从3.5kb

腺病毒载体的基本信息介绍

  腺病毒是无包膜的线性双链DNA病毒,在自然界分布广泛,至少存在100种以上的血清型。其基因组长约36kb,两端各有一个反向末端重复区(ITR),ITR内侧为病毒包装信号。基因组上分布着4个早期转录元(E1、E2、E3、E4)承担调节功能,以及一个晚期转录元负责结构蛋白的编码。早期基因E2产物是晚

病毒包装技术——腺病毒载体的制备

1 菌液的准备1.1. 取含目的质粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上,37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落,挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液,则需取库存质粒进行转化,然后挑单克隆摇菌。1.2. 将单克隆接种于5ml氨苄

腺病毒载体疫苗的制备与分离

通常来说,开发一种新型疫苗需要经过数年的艰苦过程,包括完整的生产工艺确定。这样的模式没办法对一些爆发性的传染疾病做出快速响应,而且面对一些商业潜力比较小的区域性疾病或者是某些定制化疫苗也是力有不逮。 在病毒载体家族里面,腺病毒的应用非常广泛,它具有诱导抗体和T细胞组合反应的潜能。虽然人群中广泛存在的

重组新冠疫苗(腺病毒载体)的介绍

  重组新冠疫苗(腺病毒载体)是一种表达SARS-CoV-2刺突糖蛋白(S蛋白)的复制缺陷Ad5载体疫苗。疫苗使用一种减毒的普通感冒病毒(腺病毒,易感染人类细胞,但不致病)将编码SARS-CoV-2刺突(S)蛋白的遗传物质传递给细胞。随后这些细胞会产生S蛋白,并到达淋巴结,免疫系统产生抗体,识别S蛋

灭活疫苗与腺病毒载体疫苗的区别

一、制备方法不同1、灭活疫苗:将培养扩增的活病毒通过理化方法,灭活以后经过系列纯化技术制备的疫苗。2、腺病毒载体疫苗:采取5型腺病毒作为载体,导入新冠病毒抗原基因,通过生物反应器制成活载体疫苗。二、特点不同1、灭活疫苗:主要特点是疫苗的成份和天然的病毒结构是比较相似的,是最接近。通常免疫应答也比较强

噬神经元的腺病毒载体的构建

实验概要腺病毒载体,广泛用于外源基因转移到神经胶质细胞,具有细胞毒性。利用腺病毒载体转染神经细胞已经盛行,因为腺病毒载体除了感染细胞后有限的细胞毒性,还利于长期表达转基因。主要试剂人类胚胎肾(HEK)293T细胞腺病毒转移载体质粒腺病毒包装载体PLP1,pLP2(之前),PLP / VSVGDMEM

病毒包装技术5——腺病毒载体的制备介绍

  1 菌液的准备   1.1. 取含目的质粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上,37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落,挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液,则需取库存质粒进行转化,然后挑单克隆摇菌。   1.2. 将单

Science-|-为腺病毒载体疫苗设计提供新策略

  Science | 为腺病毒载体疫苗设计提供新策略——黏膜相关恒定T(MAIT)细胞激活显著增强腺病毒载体诱导的T细胞反应  黏膜相关恒定T(MAIT)细胞是一类非常规的T细胞,可以识别微生物衍生的维生素B2生物合成代谢产物,如5-(2-氧代氧亚丙基氨基)-6-(d-核糖胺基) 尿嘧啶(5-OP

基本方案-运用-AdEasy-方法产生重组腺病毒载体

实验材料感兴趣的基因试剂、试剂盒具有卡那霉素抗性的 LB 培养基限制性内切核酸酶穿梭载体 DNA乙酸铵苯酚 氯仿 异戊醇乙醇电促感受态 BJ5183 细胞感受态 DH10B 细胞HBSS 或灭菌的 PBS仪器、耗材铺有卡那霉素抗性的 LB 固体培养基皿琼脂糖凝胶脂质转染 AMINE 试剂Opti-M

腺病毒载体非洲猪瘟疫苗新策略研究获进展

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504755.shtm

广州生物院在腺病毒载体疫苗领域取得新成果

  最近,中科院广州生物医药与健康研究院特聘研究员陈凌博士带领其研究组成员孙彩军博士、冯立强博士等研发了一种可克服体内腺病毒中和抗体的新技术AVIP,并在恒河猴模型中利用腺病毒载体艾滋病疫苗进行了概念验证。相关成果发表于国际病毒学权威期刊《病毒学杂志》(J Virol. 2012,86

广州生物院研究证实腺病毒载体疫苗的安全性

  近日,国际著名疫苗学期刊Vaccine杂志发表了中国科学院广州生物医药与健康研究院陈凌博士(客座研究员)指导的课题组的研究成果Epidemiology of adenovirus type 5 neutralizing antibodies in healthy people an

《科学》子刊:腺病毒载体疫苗让免疫治疗“战力爆棚”!

  腺病毒(Ad)载体疫苗近些年频繁出现在大众的视野当中,是抗击新冠肺炎的主力军。其实,Ad疫苗的“业务范围”很广,它在肿瘤治疗中同样扮演着举足轻重的角色。  此前已有研究证实,编码肿瘤新生抗原的Ad载体疫苗与PD-1抑制剂联合使用,在小鼠模型中对肿瘤的抑制效果良好[1]。然而,这种联合治疗肿瘤的作

我国研发可用于5型腺病毒为载体埃博拉病毒疫苗

  埃博拉病毒可引发严重的出血热疾病,致死率极高。2014年非洲埃博拉疫情大爆发造成上万人死亡,今年四月以来刚果地区又爆发了埃博拉疫情,并有扩大传播的趋势。疫苗是埃博拉疫情防控的最有效工具。中国科学院广州生物医药与健康研究院冯立强研究员领导的团队探索了一种利用2型腺病毒为载体的埃博拉病毒疫苗,6月6

陈薇团队开发的腺病毒载体疫苗获我国首个新冠疫苗ZL

  据国家知识产权局消息,由军科院军事医学研究院陈薇院士团队及康希诺生物联合申报的新冠疫苗ZL申请,已被授予ZL权,这是我国首个新冠疫苗ZL。  该疫苗的申请名称为“一种以人复制缺陷腺病毒为载体的重组新型冠状病毒疫苗”,就是此前陈薇院士团队开发的腺病毒载体疫苗(Ad5-nCoV疫苗)。根据ZL摘要,

继腺病毒载体、灭活疫苗后,又一类新冠疫苗进入临床

   6月19日,国家药品监督管理局批准了中国科学院微生物研究所(以下简称“微生物所”)和安徽智飞龙科马共同研发的新冠重组蛋白疫苗进入临床试验。这是继腺病毒载体疫苗和灭活疫苗两种类型的疫苗进入临床试验之后,又一种新的技术路线研制的新冠疫苗进入临床试验阶段。I期临床试验将重点测试疫苗在人体的耐受性和安

柳叶刀:这种腺病毒载体新冠疫苗的重症保护率达96%

  近日,国际权威医学期刊《柳叶刀》发布了中国首个腺病毒载体疫苗—康希诺生物重组新型冠状病毒疫苗(5型腺病毒载体)克威莎的全球多中心Ⅲ期临床试验最终有效率和期中安全性分析结果。  该数据显示,接种14天后,重症保护率为96.0%,总体保护率为63.7%,达到世界卫生组织建议的新冠疫苗保护率标准,无一

基于腺病毒载体的COVID19疫苗诱导免疫性血小板减少症

  在一项新的研究中,来自加拿大麦克马斯特大学的研究人员发现使用腺病毒载体的COVID-19疫苗究竟如何引发一种罕见但有时是致命性的凝血反应,即疫苗诱导的免疫性血小板减少症(vaccine-induced immune thrombotic thrombocytopenia, VITT)。这些发现将

腺病毒简介

腺病毒载体的优点:1. 宿主范围广, 对人致病性低腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,因此在大多哺乳动物细胞和组织中均可用来表达重组蛋白。特别需要指出的是:腺病毒具有嗜上皮细胞性,而人类的大多数的肿瘤就是上皮细胞来源的。另外,腺病毒的复制基因和致病基因均已

scaleX生物反应器系统在慢病毒和腺病毒载体生产中...2

细胞分布  我们之前比较了iCELLis Nano生物反应器高压缩固定床(4m2)和低压缩固定床(2.67m2)中的细胞分布,发现在低压缩中,细胞分布更加均衡。在高压缩固定床中,细胞分布有较大的差异,取决于计数的细胞来自哪一层(相比顶部,底部的细胞量要高3到4倍)。尽管在低压缩固定床中,差异性较

scaleX生物反应器系统在慢病毒和腺病毒载体生产中...1

我们之前在Pall iCELLis®固定床生物反应器中,以小规模和商品化规模,进行了病毒载体(慢病毒、腺病毒以及腺相关病毒)的生产。最近,一家名为Univercells的比利时公司推出了一种新型固定床生物反应器,其具有相同的细胞生长表面基质材料,但固定床结构与iCELLis生物反应器所使用的结构

什么是腺病毒

腺病毒是一种无外壳的双链dna病毒,基因组长约36kb,衣壳(capsid)呈规则的20面体结构,直径约80-110nm。衣壳含有240个六联体(hexon)、12个五联体(penton)及12根纤毛(fiber),除此之外还有其他一些小蛋白,如vi、viii、ix、iiia和iva2等。六联体是形