6年免疫组化经验总结
做过病理实验的人都知道，实验看似容易，但真想把它做好，还是需要花上很长一段时间去积累和摸索经验。我从事病理实验已有 6 年多了，在这段时间里，我做过许许多多病理相关实验，刚开始啥也不懂，一味按照网上操作流程来做，但做的结果往往并不是十分理想，最终结果未能达到预期的效果。经过一段时间的浏览和学习，在论坛内学习、请教，并结合实践操作，我经历了初级——查找资料和摸索方法；中级——问题求助和不断总结；高级——难题解答和经验分享这三个阶段，也学到了不少知识，积累了很多宝贵经验，与大家一起分享。 一、石蜡切片和冰冻切片的比较？ 1.要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果组织的抗原性较稳定，则可作石蜡切片；但是要求做石蜡切片的，可作冰冻切片。 2.冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步......阅读全文
6年免疫组化经验总结
做过病理实验的人都知道，实验看似容易，但真想把它做好，还是需要花上很长一段时间去积累和摸索经验。我从事病理实验已有 6 年多了，在这段时间里，我做过许许多多病理相关实验，刚开始啥也不懂，一味按照网上操作流程来做，但做的结果往往并不是十分理想，最终结果未能达到预期的效果。经过一段时间的
6年免疫组化经验总结
做过病理实验的人都知道，实验看似容易，但真想把它做好，还是需要花上很长一段时间去积累和摸索经验。我从事病理实验已有 6 年多了，在这段时间里，我做过许许多多病理相关实验，刚开始啥也不懂，一味按照网上操作流程来做，但做的结果往往并不是十分理想，最终结果未能达到预期的效果。经过一段时间的浏览和学习，在论
免疫组化的经验总结（1）－常见问题
免疫组织化学的概念： 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。免疫组化实验所用的组织和细胞
免疫组化的经验总结（2）－操作规程
（一）、仪器设备 1）450px不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉； 2）水浴锅（二）、试剂 1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。 2）0.0
免疫组化的经验总结（3）－操作要点和技巧
1． 固定：最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定
PCR经验总结（一）
(首先声明，此文不如分子克隆第三版权威与分子克隆相背处，请信分子克隆)增加PCR的特异性1. primers design 这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的一些条件a 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的引物同
PCR经验总结（二）
5. touchdown PCR 原理很简单,但的确是一个很有用的方法。举个例子就OK, ANNEALING TEMP. 55度94 5min 94 30s 60 30s 72 1min 2cycles 94 30s 59 30s 72 1min 2cycles 94
细胞消化经验总结！
一、酶消化法1、胰酶。这是用得多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液，否则影响活性。保存
细胞消化的经验总结
一、酶消化法1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25% 的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液，否则影响活
RtPCR经验总结
Rt-PCR实验步骤一、实验器具与材料：1、移液枪：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸头：1ml、200μl、20μl3、匀浆管：5ml4、吸头台：放置1ml吸头的一个，放置20μl吸头的一个5、EP管：1.5ml、0.2ml、100μl6、试剂瓶：2个60ml的棕色试剂瓶（广口，
急诊科医生经验总结
1.对发热伴颈部淋巴结肿大的青少年患者，如抗生素治疗无效，要想到坏死增生性淋巴结病的可能。 2.对中老年昏厥患者，要优先考虑心源性的（冠脉或恶性心律失常），不管既往有无类似发作史。 3.以消化道症状为主诉的中青年患者，要想到急性重症心肌炎的可能。 4.老年纳差的，会不会是吞咽困
western－blot实验经验总结（一）
做了很久的WB（western blot），走了很多弯路，其实发现WB想要做好并不难，总结了WB实验中可能会遇到的问题，分析了可能的原因及对应的解决方案，希望能成为你实验成功的基石。 问题1：转膜不充分(1)膜没有完全均匀湿透使用100% methanol浸透膜。(2)靶蛋白分子量小于10 000选
western－blot实验经验总结（二）
问题4：有阳性条带，但条带比较弱（1）抗体染色不充分增加抗体浓度，延长孵育时间。（2）酶活性降低直接将酶和底物进行混合，如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物。（3）标本中靶蛋白含量太低增加标本上样量。（4）洗膜过度缩短洗涤时间。（5）HRP抑制剂所用溶液和容器中避免含有叠氮化钠。
有机合成操作的经验总结
选择玻璃仪器和搅拌子：（1）均相反应：物料不超过容器体积的2/3；（2）非均相、回流或者产生气体的反应：物料不超过容器体积的小于1/2，无水无氧的反应时更应注意。搅拌装置的选择：（1）机械搅拌：物料体积>2 L的非均相体系；（2）强力搅拌：物料体积>3 L的均相反应和250 mL~2 L的非均相体系
western－blot失败经验总结1
我做了很久的WB，最大的一个难点感觉在于样品制备上！蛋白的降解有些时候是你想象不到的，可能出奇的糟糕，也可能完全没事~~如果单独做WB的话，感觉以“快速彻底裂解，先变性后保存”的原则比较有效，尽量选择足够强的裂解液，甚至直接给loading buffer裂解，然后取出部分蛋白定量，其余加入loadi
尿沉渣检验的经验总结
尿常规检验是明确患者是否患有泌尿系统疾病的常用方法。如果尿液沉渣检验的操作条件和程序不一致,即使是同一患者的同一尿液标本,亦可出现不同的检验结果,影响临床诊断。为了探讨尿液沉渣检验的常见影响因素,提高临床诊断水平,我们对同一患者的尿液沉渣做了不同条件下的实验测定。现报告如下。1．材料与方法1.1 标
western－blot失败经验总结2
我就跑胶和转膜谈一点儿自己的体会1、跑胶 电泳Buffer重复利用的时候要注意，不能混浊，有时候能用个3－4次，有时候第二次都不行了，事先前预电泳一下，看看气泡的均匀度；Buffer一定要淹过梳子孔，否则就会发现今天的蛋白不会跑；跑的时候先用低电压跑过浓缩胶，再换高电压跑分离胶，不要追求速度，慢慢跑
川芎嗪应用经验总结
川芎嗪是从中药川芎中提炼出来的，是川芎的主要有效成分。目前，川芎嗪作为现代用药，用作静脉注射剂，被较多地应用于缺血性脑血管病，如：脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞等。 经过临床表明：川芎嗪的作用还远不止这些。只要我们深入认识它的性能，全面把握它的功用，在辨证论治的基础上，灵活地应用它，就
有机合成后处理经验总结
在有机合成中，后处理的问题往往被大多数人所忽略，认为只要找对了合成方法，合成任务就可以事半功倍了，这话不错，正确地合成方法固然重要，但是机合成的任务是拿到相当纯的产品， 任何反应没有 100％产率的， 总要伴随或多或少的副反应，产生或多或少的杂质，反应完成后，面临的巨大问题就是从反应混合体系中分离出
NBS溴化反应经验总结
NBS溴化试剂与溴化反应 今天下午蒸NBS 溴化后的产物，结果以下午都是眼泪鼻涕一起流，终于证实：所得产物并非溴代的2-ph-toluene，而是一个很奇怪的对眼睛和鼻子具有强烈刺激性的红褐色液体，很失败!弄得今天已下午心情都不好。起初还以为是乙醚或者CCl4，后来一想不太可能阿，乙醚或
手性柱的使用经验总结
手性分离重要的是选择一根好的手性柱，做手性分析的都知道，大赛璐的手性柱目前市场占有率高，根据用途分为多种不同的型号，大家熟悉的可能是OD-H。大赛璐公司初有四种填料，结构类似，对应的色谱柱分别是 OD、AD、OJ 和 AS，粒径10um，后来填料粒径变为5um，就是卖的多、使用范围广的柱子，号称四大
免疫组化
一，免疫组织化学简介免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应炕原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚
免疫组化
一，免疫组织化学简介免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应炕原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚
免疫组化
免疫组织化学又称免疫细胞化学，可以用于：（1）显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应；（2）是对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。实验方法原理带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的
ELISA试剂盒操作经验总结
对于elisa试剂盒操作，有的人经过多年的实践获得了丰富的经验，操作起来得心顺手；有的实验新手只掌握了理论概况，在实践方面有时却不知从何下手；今日，上海劲马要为大家总结elisa试剂盒的操作经验，希望对大家有所帮助。1、实验步也是*重要一步必须戴手套穿好工作衣，严格执行消毒隔离制度保证自己的人身安全
13年的－Bug－调试经验总结
在《Learning From Your Bugs》一文中，我写了关于我是如何追踪我所遇到的一些最有趣的bug。最近，我回顾了我所有的194个条目（从13岁开始），看看有什么经验教训是我可以学习的。下面是我总结的最重要的经验教训，包括编码，测试和调试三个方面。 编码 下面这些都是我经历过
细胞增殖检测：MTT实验经验总结
MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-（4，5）-dimethylthiahiazo （-z-y1）-3，5-di- phenytetrazoliumromide， MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用
SDSPAGE的个人经验总结
前些日子做SDSPAGE，做了两天，犯了一大堆错误，写出来供大家借鉴：1。听有人说琼脂粉可以做封底胶，一试，漏了，还是用琼脂糖吧。2 AP用别人旧的，结果胶不干 3 A液，B液用旧的，不干。结论：不要用别人的，一定要自已配，别怕浪费。4 前后Tris 的PH值搞错，结果不凝5 电泳时长板接负极，反了
顶空分析仪使用经验总结
1、带有一定真空度(负压)的包装，取样不成功，表现为分析仪报警，影响测试数据。 2、玻璃容器类包装，取样针头无法刺入，表现为无法检测。 3、包装内顶空气体容量太小，一般
新PCB板调试方法和经验总结
对于一个新设计的电路板，调试起来往往会遇到一些困难，特别是当板比较大、元件比较多时，往往无从下手。但如果掌握好一套合理的调试方法，调试起来将会事半功倍。对于刚拿回来的新PCB板，我们首先要大概观察一下，板上是否存在问题，例如是否有明显的裂痕，有无短路、开路等现象。如果有必要的话，可以检查一下电源