形形色色的蛋白标签(二)
体内标记 对于in vivo标记,人们通常用化学标记的营养物喂养细胞,让它们掺入新合成的蛋白、核酸或代谢物。之后收获细胞,分离出这些分子,从整体上查看细胞行为,或利用抗体或其他捕获试剂来研究某个蛋白。 蛋白质组研究人员常用的方法是SILAC,即细胞培养中氨基酸的稳定同位素标记。两组细胞同时培养,A组是在包含正常氨基酸(light)的培养基中;B组的培养基则含有“重型(heavy)”的氨基酸,即稳定同位素标记的氨基酸。然后将两组细胞混合,提取出蛋白质组,并交给质谱去测定,从而评估两种条件下的蛋白丰度差异。生物通之前对此技术有详细介绍,请看《定量蛋白质组学之SILAC技术》。 而非质谱研究人员则使用所谓的生物正交(bioorthogonal)化学反应。在生物正交系统中,人们使用带有化学基团的分子来喂养细胞,这些化学基团与天然的生物活性基团(如胺基或羧基)不起反应。外源化合物(包含该基团的反应partner)......阅读全文
串联质谱方法属于临床哪个专业组
蛋白质结构分析方法:X射线晶体衍射分析和核磁共振x 射线衍射法的分辨率可达到原子的水平,使它可以测定亚基的空间结构、各亚基间的相对拓扑布局,还可清楚的描述配体存在与否对蛋白质的影响。多维核磁共振波谱技术已成为确定蛋白质和核酸等生物分子溶液三维结构的唯一有效手段。NM R技术最大的优点不在于它的分辨率
串联质谱的分类和主要串联方式
空间串联和时间串联。空间串联是两个以上的质量分析器联合使用,两个分析器间有一个碰撞活化室,目的是将前级质谱仪选定的离子打碎,由后一级质谱仪分析。而时间串联质谱仪只有一个分析器,前一时刻选定-离子,在分析器内打碎后,后一时刻再进行分析。本节将叙述各种串联方式和操作方式。 质谱-质谱的串联方式很多
液质联用中的质谱——串联质谱篇(中)
本文举几例常见的串联质谱仪,篇幅较长分为上、中、下三篇。 线性离子阱LIT/FTICR和LIT/Orbitrap QqQ和QTOF都是串联两个“离子束”型分析器,近年来还有一种趋势是串联两个离子捕获型分析器,线性离子阱LIT/FTICR是此类最早的类型,由于维护困难,近年来慢慢被LIT/Or
液质联用中的质谱——串联质谱篇(上)
在连接了前面的离子源、离子传输后,质谱的质量分析器还可以空间或时间的方式进行串联分析(MS/MS或MSn)。此时,第一个质量分析器用于选择与分离母离子(Parent Ion,又称前体离子Precursor Ion),被选择的母离子碎裂后产生子离子(Daughter Ion,又称产物离子Produ
液质联用中的质谱——串联质谱篇(下)
本文举几例常见的串联质谱仪,篇幅较长分为上、中、下三篇。 串联质谱扫描方式 串联质谱的扫描方式包括以下几种: 1、子离子扫描/产物离子扫描/碎片离子扫描(Product Ion Scan/Fragment Ion Scan): 选择某一质量的母离子进入碰撞室,与碰撞室内的碰撞气体发生解离
串联质谱的工作原理
为了得到更多的有关分子离子和碎片离子的结构信息,早期的质谱工作者把亚稳离子作为一种研究对象。所谓亚稳离子(metastable ion)是指离子源出来的离子,由于自身不稳定,前进过程中发生了分解,丢掉一个中性碎片后生成的新离子,这个新的离子称为亚稳离子。 这个过程可以表示为: m1+m2+ +
质谱和蛋白质组学:击中目标
Nature Methods - 5, 741 - 747 (2008) 作者:Nathan Blow 分析测试百科 译 近年来,质谱仪大幅提高了动态范围和灵敏度,使研究者们在疾病生物标志物的发现和验证方面,更从容地面对挑战。 在2008年6月的美国质谱大会(ASMS)
2025蛋白质组学大会之非质谱蛋白质组学专场
2025年10月14日上午10点10分,第12届AOHUPO大会暨第8届AOAPO大会暨π-HuB国际大科学计划第三届全球峰会暨第13届CNHUPO大会“非质谱蛋白质组学” (Proteomics Beyond Mass Spectrometry) 分会场于广州白云国际会议中心岭南B厅拉开序幕。
液相色谱质谱联用仪包括串联质谱吗
液相色谱质谱联用仪(LC-MS)通常包括液相色谱(LC)和质谱(MS)两部分组成。在LC部分,目标化合物被分离并分解成小分子物质,然后进入MS部分,产生一系列离子化质谱片段,揭示样品的结构信息。联用LC-MS可以为复杂混合物的分析提供更高的分辨率和灵敏度。因此,联用质谱仪是一种非常强大的分析仪器,能
什么是串联质谱筛查
串联质谱筛查:两个或更多的质谱连接在一起,称为串联质谱(MS-MS)。最简单的串联质谱由两个质谱串联而成,其中第一个质谱仪(MS1)作为分离器,第二个质谱仪(MS2)作为分析仪来对混合物直接进行分析。串联质谱技术可以应用于其他领域:疾病生物标记物(Biomarker of Diseases),临床
什么是串联质谱筛查
串联质谱筛查:两个或更多的质谱连接在一起,称为串联质谱(MS-MS)。最简单的串联质谱由两个质谱串联而成,其中第一个质谱仪(MS1)作为分离器,第二个质谱仪(MS2)作为分析仪来对混合物直接进行分析。串联质谱技术可以应用于其他领域:疾病生物标记物(Biomarker of Diseases),临床
什么是串联质谱筛查
串联质谱筛查:两个或更多的质谱连接在一起,称为串联质谱(MS-MS)。最简单的串联质谱由两个质谱串联而成,其中第一个质谱仪(MS1)作为分离器,第二个质谱仪(MS2)作为分析仪来对混合物直接进行分析。串联质谱技术可以应用于其他领域:疾病生物标记物(Biomarker of Diseases),临床
串联质谱及应用技术
1 串联质谱 两个或更多的质谱连接在一起,称为串联质谱。最简单的串联质谱(MS/MS)由两个质谱串联而成,其中第一个质量分析器(MS1)将离子预分离或加能量修饰,由第二级质量分析器(MS2)分析结果。MS/MS 最基本的功能包括能说明 MS1 中的母离子和 MS2 中的子离子间的联系。 MS/MS
分析串联质谱的优、缺点
所谓的串联质谱就是两个或者更多的质谱仪连接在一起,进行分析样品的技术。两个质谱串联而成的质谱联用技术是简单的,通常个质量分析器(ms1)将离子预分离或加能量修饰,由第二级质量分析器(ms2)分析结果。三级四极杆串联质谱是常用的串联质谱,级和第三级四极杆分析器分别为ms1和ms2,第二级四极杆分析器所
什么是串联质谱筛查
串联质谱筛查:两个或更多的质谱连接在一起,称为串联质谱(MS-MS)。最简单的串联质谱由两个质谱串联而成,其中第一个质谱仪(MS1)作为分离器,第二个质谱仪(MS2)作为分析仪来对混合物直接进行分析。串联质谱技术可以应用于其他领域:疾病生物标记物(Biomarker of Diseases),临床
全信息串联质谱MSE-简介
未知物的(一级)母离子与(二级)碎片离子数据是对其进行质谱分析所必须的信息。除了具备DDA串联质谱采集方法外,沃特世质谱更提供了独有的全信息串联质谱(MSE)技术。那么MSE技术是如何获得串联信息,并做到信息收集的最优化与最大化呢? 全信息串联质谱(MSE)能提供什么样的信息?1. 未知分析物的定性
华盈视角:蛋白质组学——质谱技术
蛋白质作为功能的直接执行者,在生物医学领域中有着重要意义,检测蛋白质表达、修饰、互作等有助于我们理解生命机体的各类机制和活动规律,为疾病的治疗、诊断,药物的开发、优化等提供有力的支持。质谱技术作为检测蛋白质组学的主流技术,有必要了解其核心原理,才能更好的服务于科学问题的解决。1.质谱的原理: 质谱是
Orbitrap质谱蛋白质组沙龙在京举行
【导语】使用质谱仪器进行蛋白质组研究中有三个关键环节,第一个是样品的处理阶段,这是最简单,也是最重要的一个步骤。第二个阶段是仪器的操作部分,使用液相、质谱等仪器把蛋白质进行分离、分析。主要涉及仪器参数的优化调整。第三步是生物信息学分析部分,这也是最难的部分。本期沙龙中中科院生物物理所的
利用纳升级液相色谱--串联质谱进行蛋白质鉴定实验
实验材料 修饰胰蛋白酶试剂、试剂盒 消化缓冲液萃取液清洗液脱色液仪器、耗材 多通道移液枪Eppendorf Repeater 分液器Combitips 分液管实验步骤 3.1 胶内蛋白的水解和多肽的提取(一天的实验方案)对于从 SDS-PAGE,2D-PAGE,BN-PAGE 电泳(经考马斯亮蓝
利用纳升级液相色谱-串联质谱进行蛋白质鉴定实验
实验材料:修饰胰蛋白酶试剂、试剂盒:消化缓冲液 萃取液
利用纳升级液相色谱-串联质谱进行蛋白质鉴定实验
实验材料修饰胰蛋白酶试剂、试剂盒消化缓冲液萃取液清洗液脱色液仪器、耗材多通道移液枪Eppendorf Repeater 分液器Combitips 分液管实验步骤3.1 胶内蛋白的水解和多肽的提取(一天的实验方案)对于从 SDS-PAGE,2D-PAGE,BN-PAGE 电泳(经考马斯亮蓝 G-250
AB-串联质谱联用仪共享应用
仪器名称:串联质谱联用仪仪器编号:10020328产地:中国生产厂家:AB公司型号:API3200出厂日期:201007购置日期:201012所属单位:环境学院>环境化学研究所>新兴污染物研究组放置地点:中意环境楼地下B102固定电话:固定手机:固定email:联系人:李玉清(010-6277163
什么是全信息串联质谱(MSE)?
MS E 是在一次液质分析中同时获得高精确的母离子及碎片离子信息的串联质谱方法。 2. MS E 由“无碰撞能”与“高碰撞能”两种扫描交替构成,分别记录母离子及碎片信息。 3. MS E 通过母离子与其碎片离子具有相同色谱行为的特性进行母-子离子的关联归属。
定量蛋白质组学质谱采集技术进展(一)
摘要 质谱是定量蛋白组学的主要工具。近年来随着定量蛋白质组学研究的深入,传统质谱定量技术面临着复杂基质干扰、分析通量限制等诸多问题。而最近一系列质谱新技术的发展,包括同步母离子选择(SPS)、质量亏损标记、平行反应监测(PRM)、多重累积(MSX)和多种全新数据非依赖性采集(DIA)等,为解决目前蛋
定量蛋白质组学质谱采集技术进展(四)
无论是相对定量还是绝对定量方法,DIA很好地克服了DDA鸟枪法和SRM目标监测的种种不足, 在定量蛋白质组学中具有良好的应用前景。然而,目前DIA 方法的循环时间仍然较长,只能与纳流液相联用,并使用较长的梯度以获得足够的色谱峰宽,限制了DIA 的应用范围。这也是DIA 技术下一步需要解决
定量蛋白质组学质谱采集技术进展(二)
同步母离子选择(Synchronous precursor selection, SPS)技术的出现彻底解决了MS3 响应弱的问题。SPS 技术利用多频切迹的选择波形电压(MultiNotch) [27] ,在线性离子阱中实现一次选择同时获得多个离子,最多可同时选择15 个(图2A)。利用这一原理,
定量蛋白质组学质谱采集技术进展(三)
然而PRM 的分析通量不如SRM。PRM 能同时监测最多10 ~15 个母离子,而SRM 能同时监测上百个离子对,因为高分辨质谱的有效扫描速度通常只有10 ~15 Hz,远慢于SRM 的有效扫描速度。但是这一问题正逐步得到解决,多重累积(Multiplexing, MSX)技术的发展和使用有
蛋白质组质谱新方法一览
2003年人类基因组精细图绘制完成,是人类科学史上一个里程碑式的事件。后基因组时代的研究重点自然落在了蛋白质头上。为啥?因为中心法则告诉我们,基因的产物——蛋白质,是生命活动的最终执行者。与基因组类比,研究生物体内全套蛋白质的科学,就是蛋白质组学。基因组计划完成的同年,人类蛋白质组计划启动,令人激动
《自然》子刊专题:蛋白质组学中的质谱
涉及到蛋白质组学分析的研究人员都知道蛋白质组学研究的技术路线有两条,一条是以双向电泳加生物质谱的方法鉴定生物体系中各种蛋白的表达谱以及各蛋白表达程度的相对变化,另一条路线就是多维色谱与生物质谱相结合的称之为鸟枪法的技术路线。其中质谱分析技术(Mass spectrometry,MS)是蛋白质组学常用
质谱技术在蛋白质组研究中的分析方法
2003年人类基因组精细图绘制完成,是人类科学史上一个里程碑式的事件。后基因组时代的研究重点自然落在了蛋白质头上。为啥?因为中心法则告诉我们,基因的产物——蛋白质,是生命活动的最终执行者。与基因组类比,研究生物体内全套蛋白质的科学,就是蛋白质组学。基因组计划完成的同年,人类蛋白质组计划启动,令人激动