常用的分子生物学基本技术（一）
核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性，它已成为分子生物学中最常用的基本技术，被广泛应用于基因克隆的筛选，酶切图谱的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下（适宜的温室度及离子强度等）可按碱基互补原成双链。杂交的双方是待测核酸序列及探针（probe）,待测核酸序列可以是克隆的基因征段，也可以是未克隆化的基因组DNA和细胞总RNA。核酸探针是指用放射性核素、生物素或其他活性物质标记的，能与特定的核酸序列发生特异性互补的已知DNA或RNA片段。根据其来源和性质可分为cDNA探针、基因组探针、寡核苷酸探针、RNA探针等。固相杂交固相杂交（solid-phase hybridization）是将变性的DNA固定于固体基质（硝酸纤维素膜或尼龙滤膜）上，再与探针进行杂交，故也称为膜上印迹杂交。斑步杂交（dot hybridization）是道先将被测的D......阅读全文
常用基因诊断技术
当细胞的基因组DNA用特定的内切酶如Eco RⅠ切割时，凡有GAATTC的地方都被切开，得到许多长度一定但互不相等的片段，需要分析、分离的基因或DNA片段就在其中某一特定的的片段上。 然而许多长短不同的DNA片段混合在一起是很难分析的。因此首先必需将它们按大小（长短)分离开来，这可借助凝胶电
常用样品制备技术
色谱样品采集后要尽快的制备成适合色谱分析的样品，以便进行色谱分析。适合色谱分析的样品是指制备好的样品能满足：①所选用色谱柱的进样要求；②所选用色谱方法的分离能力（即能将欲测组分和其他组分分离开，如分离不开，则要进行预分离）；③所选用色谱方法的检测能力。样品制备就是采用一些物理化学的方法去处理采集到的
常用显带技术
1.G带这是目前使用最广泛的一种带型，操作简单，带纹清晰，标本可长期保存，重复性好。其方法是将染色体标本经胰蛋白酶、NaOH、柠檬酸盐或尿素等试剂处理后，再经吉姆萨染色，显示的深浅交替的横纹便是G带。染色体的G带在普通光学显微镜下即可观察。2.Q带是指染色体标本经氮芥喹吖因等荧光染料处理后显示的带。
常用显带技术
1.G带这是目前使用最广泛的一种带型，操作简单，带纹清晰，标本可长期保存，重复性好。其方法是将染色体标本经胰蛋白酶、NaOH、柠檬酸盐或尿素等试剂处理后，再经吉姆萨染色，显示的深浅交替的横纹便是G带。染色体的G带在普通光学显微镜下即可观察。2.Q带是指染色体标本经氮芥喹吖因等荧光染料处理后显示的带。
水处理常用技术
1.离子交换法 离子交换法是以圆球形树脂（离子交换树脂）过滤原水，水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透（RO）处理之前，先将水质硬度降低的一种前处理程序。软化机里面的球状树脂，以两个钠离子交换一个钙离子或镁离子的方式来软
液相色谱仪—膜分离技术常用膜分离过程的基本特点
常用膜分离过程的基本特点分离过程类型分离过程透过组分截流组分推动力传递机理膜类型样品和透过物的状态微滤（MF）溶液脱粒子，气体脱粒子溶液、气体0.02~10μm压力差（约100kPa）筛分多孔膜液体或气体超滤（UF）溶液脱大分子，大分子溶液脱小分子，大分子分级小分子溶液1～20nm溶质压力差（100
分子生物学实验室常用有毒试剂及应急处理
本文整合了分子生物学实验室常用有毒试剂及应急处理的方法及注意事项。中毒常见的症状包括：呼吸系统、循环系统、消化系统、泌尿系统、神经系统、血液系统。常见有毒试剂：溴化乙锭（C21H20N3Br，EB）【性质】：EB是分子生物学常用染料【毒性】：强诱变剂、中度毒性【注意】：通风橱中配制，接触时需戴手套，
分子生物学实验室常用有毒试剂及应急处理
本文整合了分子生物学实验室常用有毒试剂及应急处理的方法及注意事项。中毒常见的症状包括：呼吸系统、循环系统、消化系统、泌尿系统、神经系统、血液系统。 常见有毒试剂：溴化乙锭（C21H20N3Br，EB） 【性质】：EB是分子生物学常用染料 【毒性】：强诱变剂、中度毒性 【注
介绍一些常用的光谱分析技术的应用案例
常用光谱分析技术的应用案例：原子吸收光谱（AAS）环境监测：用于检测水样、土壤和空气中重金属元素（如铅、镉、汞等）的含量，以评估环境污染程度。食品分析：测定食品中矿物质（如铁、锌、钙等）的含量，确保食品的营养价值和安全性。原子发射光谱（AES）金属材料分析：分析钢铁、铝合金等金属材料中的各种元素成分
化学实验常用仪器的基本操作
1. 试管的握持 出错点：用手一把抓或将无名指和小指伸展开；位置靠上或靠下。 正确方法：“三指握两指拳”.即大拇指、食指、中指握住试管，无名指和小指握成拳，和拿毛笔写字有点相似。手指握在试管中上部。 2. 药品的取用 出错点：A.取粉末状药品，由于药匙大，加药品时不能深入容器内致使洒落或
通常用的水处理技术
1、磁化：利用磁场效应对于水的处理作用，称为水的磁化处理。2、矿化：是指在洁净的水中加入有益矿物质。特别需要指出的是：*，此水必须是经过严格精处理后的干净之水。因为水中杂质有时会与矿石发生反应而产生其它物质；第二，矿石必须经过严格筛选，并通过特殊工艺如高温蒸馏，脱碳去浊后方可使用。3、吸附净水技术主
质谱仪的常用进样技术
将样品导入质谱仪可分为直接进样和通过接口两种方式实现。 1、直接进样： 在室温和常压下，气态或液态样品可通过一个可调喷口装置以中性流的形式导入离子源。吸附在固体上或溶解在液体中的挥发性物质可通过顶空分析器进行富集，利用吸附柱捕集，再采用程序升温的方式使之解吸，经毛细管导入质谱仪。
临床常用的细菌检验技术
细菌的培养和分离技术微生物分离鉴定流程第一节 细菌的形态学检查工具：显微镜显微镜检查的目的：1.镜检可以了解标本中有无细菌及大致的菌量2.根据细菌形态、排列和染色性有助于对标本中的病原菌进行初步诊断，对临床早期诊断和治疗疾病有一定的参考意义方法：包括不染色标本检查法和染色标本检查法常用的显微镜（1）
常用的无损检测技术介绍
①射线照相检查。当穿透被测物体的每个部分时，通过利用强度衰减的差异，使用X射线或γ射线检测被测物体的缺陷。如果吸收的光线投射到X射线胶片上，则在显影之后，可以获得显示物体厚度变化和内部缺陷的照片。如果使用荧光屏而不是胶片，则可以直接观察被检物体的内部状况。 ②超声波测试。利用对象本身或缺陷的声
常用的破乳技术介绍
①加盐；②使用加热 - 冷却萃取容器；③通过玻璃棉塞过滤乳化液样品；④通过相过滤纸过滤乳化液样品；⑤通过离心作用；⑥加进少量的不同的有机溶剂。
水厂常用的水处理技术
反渗透，英文为Reverse Osmosis，是花费数亿美元并经过多年的精心研制而成的高科技水处理技术。这种薄膜分离技术，是依靠渗透膜在压力下使溶液中的溶剂与溶质进行分离的过程。渗透是一种物理现象。反渗透就是在有盐份的水中（如原水）施加比自然渗透压力更大的压力，使水由浓度高的一方渗透到浓度低的一方
常用单抗的标记技术
目前动物用单抗，在动物疫病诊断和检疫、妊娠检测、性别鉴定等方面有广泛的应用，大多以诊断试剂(盒)的形式提供，其中核心试剂为标记的单抗。下面将介绍最常用的几种标记技术。1．酶标记(1)辣根过氧化物酶(HRP)标记辣根过氧化物酶(HRP)标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基用
分子生物学课程教学讲义（一）
第一讲 序论 二、现代分子生物学中的主要里程碑 分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学，是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘，由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。当人们意识到同一生物不同世代之间的连续性是由生物体自身所
分子生物学实验诊断技术（二）
（三）Northern blot用于RNA分析，电泳条件与转膜方法与Southern blot不同外，RNA不必变性与中和，电泳时加电醛防止RNA发夹结构形成。其它步骤相同。为了防止RNase水解需分析的mRNA，尽可能将器皿在160-180℃干热灭菌8小时以上，也可加0.1％焦碳酸二乙酯（DEPC
猪丹毒分子生物学诊断技术
常规细菌培养检测猪丹毒至少要3天，鉴定血清型大约要lo天，而这种PCR法可在5h内完成。它使用两步扩增法，先用高度特异性引物组M0101-M0102进行初步扩增之后，再添加4种特异性寡核苷酸引物组对4种不同血清型猪丹毒的16SrRNA序列进行扩增。 rRNA基因簇包括16SrRNA、23
分子生物学实验小技术（二）
1 、 各供应商送货时往往会提供冰袋，在室温下将化冻的大冰袋平整的一面整齐地插入1.5ml 或0.5ml 、0.2ml 的废弃离心管；或将几个化冻后的小冰袋填料塞入一个小泡沫盒中压实，再插入各种大小的试管，放在-20 摄氏度下冻24小时后取出，拔出插入的废管（可加点热水以助拔管）即可做成一个
欣美生物：五种分子生物学常用贮存液的配制方法
1、30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml.用滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通
分子生物学方法鉴定系统的基本概念
分子生物学方法除了可用于初筛检测,由于其具有高特异性和敏感性,因此可直接用于微生物的鉴定。由美国杜邦公司的子公司“快立康(Qualicon)”公司研制开发的Ribo Printer 全自动细菌自动鉴别系统是采用基因“指纹”技术来鉴定和鉴别微生物,如下图所示。这一工作系统实际上将原来需要人工操作完成的
分子生物学技术诊断疟原虫的方法
PCR和核酸探针已用于疟疾的诊断，分子生物学检测技术的最突出的优点是对低原虫血症检出率较高。用核酸探针检测恶性疟原虫，其敏感性可达感染红细胞内0.0001%的原虫密度。国内学者采用套式PCR技术扩增间日疟原虫 SSU rRNA基因120bp的特定片段，其敏感性达0.1原虫/μl血。
生物技术常用技术有哪些
现代生物技术常用技术一般包括基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程和蛋白质工程。基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细
细胞培养基本技术概述（一）
无菌操作基本技术 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或
化学分析基本操作技术（一）
1.玻璃仪器的洗涤洗涤方法概括起来有下面几种：（1）用水刷洗：可以洗去可溶性物质，又可使附着在仪器上的尘土等洗脱下来。（2）用去污粉或合成洗涤剂刷洗：能除去仪器上的油污。（3）用浓盐酸洗：可以洗去附着在器壁上的氧化剂，如二氧化锰。（4）铬酸洗液：将8g研细的工业K2Cr2O7加入到温热的100mL浓
原代细胞基本实验技术小结（一）
A 原代细胞分离技术 取人或动物体内（或胚胎）的组织，将其剪碎至1mm3的组织块，再采用的如下方法进行分离培养： 一、悬浮细胞的分离方法 1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中，1000rpm/分钟离心5分钟。 2、去掉上清，离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟
分子生物学实验室常用仪器保养及使用方法
分子生物学操作中会涉及一系列仪器，使用不当导致实验失败、减少仪器使用寿命或损坏仪器。因此在进行操作前细致地了解各种仪器的使用方法及注意事项，是使后继实验事半功倍的一个必要准备。 一、冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生
分子生物学实验室常用仪器保养及使用方法
分子生物学操作中会涉及一系列仪器，使用不当导致实验失败、减少仪器使用寿命或损坏仪器。因此在进行操作前细致地了解各种仪器的使用方法及注意事项，是使后继实验事半功倍的一个必要准备。 一、冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中*的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及