mtSC:单细胞类型自动鉴定的新方法

单细胞测序技术有助于刻画细胞层面的异质性,为进一步探索细胞功能和内在作用机制等奠定了基础。在单细胞转录组测序数据的分析过程中,细胞类型鉴定是必须且重要的一步。常规的细胞类型鉴定依赖于细胞类型标记基因,这种方法费时费力且不稳定,可重复性差,易导致不同实验室的鉴定结果不可比较。随着单细胞测序技术的迅猛发展,众多科学家联名在2017年提出人类细胞图谱计划(The Human Cell Atlas),于2020年提出了人类癌症图谱计划(The Human Tumor Atlas),海量的已标注细胞类型的单细胞转录组测序数据越来越多,利用这些数据作为参考数据集(reference)来鉴定新测序的细胞(single cell assignment against the reference),正成为一种细胞注释的新思路。 2021年5月29日,同济大学生命科学与技术学院生物信息系刘琦教授课题组(段斌,陈绍奇,陈晓涵为文章共同第一作者)......阅读全文

细胞系错误鉴定:终结的开始(三)

交叉污染检测许多方法已被用来检测交叉污染,包括同工酶分析、核型分析、人类白细胞抗原(HLA)分型,免疫分型和DNA指纹识别。这些方法都可以鉴别出某一种细胞系,但是分辨能力各不一样。然而,这些方法在不同实验室所得到的数据却不尽相同,以致没有任何一种方法可以用来建立一个标准参考数据库。许多实验室利用ST

细胞株的污染鉴定、预防和处理

普通微生物污染:培养基浑浊,高倍镜观察有微生物污染;按规定弃用并全面严格灭菌。支原体污染:显微镜无法观察,依经验表现为细胞生长缓慢,有细胞漂浮等等,应通过PCR 等方法鉴定,如发现支原体污染,应按规定弃用,实验室要及时全面消毒灭菌,防止蔓延。(有些常规性细胞学实验不受支原体污染影响,可以继续使用细胞

黑素细胞的氨银法鉴定方法介绍

  主要用于鉴定黑色素颗粒和嗜银颗粒。黑色素是一种非脂溶性、非血色素性的色素颗粒,呈黑褐色,存在于头发、皮肤、视网膜、虹膜及中枢神经系统的某些部分。嗜银颗粒分布在类癌组织。染色后嗜银颗粒和黑色素均呈黑色,细胞核呈粉红色,细胞浆呈淡红色。

研究首次鉴定出诱导多能干细胞高效产生T细胞种子细胞

  日前,Cell Research专业学术刊物在线发表了中国科学院广州生物医药与健康研究院王金勇课题组及合作团队围绕T细胞再生长期技术攻关取得的重要研究成果。该研究首次鉴定出诱导多能干细胞高效产生T细胞种子细胞(T cell Precursors)的关键转录因子组合Runx1和Hoxa9,为再生T

未分化的牙髓干细胞DPSCs和乳牙干细胞SHEDDE鉴定

实验方法原理 STRO-I是MSC的早期细胞标志分子之一,可用于鉴定DPSCs和SHED的未分化状态。STR0-1的单克隆抗体首先是作为能与人骨髓CFU-F细胞表面高表达的分子作用的试剂被大家所认识的。DPSC和SHED中含有大约10%〜20%的STRO-I阳性细胞。非常值得注意的一点,体外扩增后的

食管癌细胞系中干细胞样SP细胞的分离鉴定实验

实验材料 人食管癌细胞系试剂、试剂盒 胰酶RNA酶碘化丙啶四甲基偶氮唑盐小牛血清DMEMDMSOK2HPO4Na2HPO4NaCI仪器、耗材 无菌分选管400目细胞筛水浴锅离心机酶标仪电泳仪显微镜PCR仪实验步骤 一、材料准备1.  青霉素储存液(1)将青霉素小瓶中的80万单位的干粉充分溶解于8 m

血型鉴定Rh血型鉴定

Rh血型鉴定介绍: Rh血型鉴定一般指Rh系统中D抗原的检测,根据病人红细胞是否带有D抗原,分为Rh阳性和Rh阴性。Rh血型鉴定正常值: Rh血型分为Rh阳性、Rh阴性。Rh血型鉴定临床意义: (1) 我国汉族人的Rh阴性率为0.34%,绝大多数人为Rh阳性,故由Rh血型不合引起的输血反应相对较AB

原位鉴定细胞或组织内生物大分子

原位鉴定细胞或组织内生物大分子、观察细胞及亚细胞形态结构:检测核酸、检测蛋白质细胞定位、检测细胞凋亡、细胞器的观察及测定、检测细胞融合、观察细胞骨架、检测细胞间缝隙连接通讯、检测细胞内脂肪;

科学家发现并鉴定新免疫细胞亚群

  日前,中科院生物物理所范祖森团队发现并鉴定了一类新的免疫细胞亚群:自然杀伤样B细胞(NKB cell)。相关成果发布于《免疫》。  免疫细胞亚群的细分和鉴定已成为当代免疫学发展呈现的新特点和新趋势,不同微环境赋予细胞亚群独特的免疫特性与功能,并介导不同免疫应答和病理,但不同细胞亚群间相互调节机制

传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察!

1、标本采集在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带, 挤出脐带血管中的血液,放入装有含青链霉素的PBS液瓶中,2h之内行脐静脉内皮细胞培养。双抗:青霉素100u/ml; 链霉素100μl/mlPBS:KCl 0.2 g/L, KH2PO4 0.24 g/L, NaCl 8.0g/L, Na

细胞爬片的免疫组化染色鉴定

实验概要本实验介绍了细胞爬片的免疫组化染色鉴定操作流程及注意事项。主要试剂PBS,0.5%Triton X-100(DPBS配),3%H2O2,封闭血清 (5%正常二抗血清DPBS液),一抗(PBS配,滴度1:200,湿盒),二抗工作液(湿盒),C液(湿盒),DAB显色液,苏木素,树胶主要设备20m

微生物鉴定与细胞表型芯片分析系统

  微生物鉴定与细胞表型芯片分析系统是一种用于基础医学、临床医学、预防医学与公共卫生学领域的分析仪器,于2013年7月23日启用。  技术指标  鉴定板使用96孔鉴定板,GN和GP细菌可实现在一块鉴定板上完成鉴定;加样操作:由系统自带的八道电动排枪内置程序完成;鉴定符合率:采用动态数据库,符合率≥8

传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察!

  2020-07-02作者:百欧博伟浏览次数:148 来源:北京百欧博伟生物技术有限公司   传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察!   1、标本采集   在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带, 挤出脐带血管中的血液,放入装有含青链霉素的PBS液瓶中,2h之内行脐静脉内皮细胞培养。

传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察!

  1、标本采集   在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带, 挤出脐带血管中的血液,放入装有含青链霉素的PBS液瓶中,2h之内行脐静脉内皮细胞培养。   双抗:青霉素100u/ml; 链霉素100μl/ml   PBS:KCl 0.2 g/L, KH2PO4 0.24 g/L, Na

简述造血干细胞移植的植活鉴定

  植活标准:回输造血干细胞后,血细胞持续下降然后再回升,当中性粒细胞连续3天超过0.5×109/L,为白细胞植活;在不进行血小板输注的情况下,血小板计数连续7天大于20×109/L为血小板植活。  植活鉴定:可根据供、受者之间性别、红细胞血型和HLA的不同,分别通过细胞学和分子遗传学(FISH技术

转化子DNA的快速鉴定—快速细胞破碎法

目的:1、掌握用细胞破碎液裂解菌体细胞,并通过电泳的方法细胞中不同分子量质粒的方法;2、从实验六的氨苄青霉素抗性转化子中筛选仅含一个拷贝目的基因的重组载体。原理:挑选8~10个白菌落接于平板过夜培养。利用破碎细胞缓冲液中的十二烷基硫酸纳(SDS)在37℃溶解膜蛋白,使细胞破裂,然后高速离心,将含有质

传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察!

在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带, 挤出脐带血管中的血液,放入装有含青链霉素的PBS液瓶中,2h之内行脐静脉内皮细胞培养。双抗:青霉素100u/ml; 链霉素100μl/mlPBS:KCl 0.2 g/L, KH2PO4 0.24 g/L, NaCl 8.0g/L, Na2HPO4•7H

细胞爬片的免疫组化染色鉴定

实验概要本实验介绍了细胞爬片的免疫组化染色鉴定操作流程及注意事项。主要试剂PBS,0.5%Triton X-100(DPBS配),3%H2O2,封闭血清 (5%正常二抗血清DPBS液),一抗(PBS配,滴度1:200,湿盒),二抗工作液(湿盒),C液(湿盒),DAB显色液,苏木素,树胶主要设备20m

传代细胞株体外培养、鉴定与形态观察

1. 标本采集 在无菌条件下于健康产妇分娩后立即取新生儿脐带, 挤出脐带血管中的血液,放入装有含青链霉素的PBS液瓶中,2h之内行脐静脉内皮细胞培养。双抗:青霉素100u/ml; 链霉素100μl/mlPBS:KCl 0.2 g/L, KH2PO4 0.24 g/L, NaCl 8.0g/L, Na

黑素细胞的Dopa染色法鉴定方法介绍

  黑色素的合成是以酪氨酸为底物,在酪氨酸酶的作用下,经过羟化变成多巴,进而氧化成多巴醌,进一步变成黑色素。MC中存在特异性的酪氨酸酶,细胞培养时加入外源性左旋多巴,会在酪氨酸酶的作用下合成较多的色素颗粒使细胞在镜下呈现黑色。

间充质干细胞(MSC)如何培养与鉴定

相比于胚胎干细胞或神经干细胞,MSC具有易获取、易体外培养、传代稳定性、低免疫原性等优势,在体外经过多次传代后仍具有多向分化和自我复制的潜能,且MSCs多来自于成年的组织,研究过程的道德和伦理学问题较小。MSC的大小与形状具有异质性,即不同种属或不同组织的MSC具有不同的生长形态,例如三极形、长梭形

未分化的牙髓干细胞DPSCs和乳牙干细胞SHEDDE鉴定1

体内/外DPSCs的成牙和成骨分化实验方法原理STRO-I是MSC的早期细胞标志分子之一,可用于鉴定DPSCs和SHED的未分化状态。STR0-1的单克隆抗体首先是作为能与人骨髓CFU-F细胞表面高表达的分子作用的试剂被大家所认识的。DPSC和SHED中含有大约10%〜20%的STRO-I阳性细胞。

未分化的牙髓干细胞DPSCs和乳牙干细胞SHEDDE鉴定2

体外DPSCs的成脂分化实验方法原理尽管在牙髓中没有脂肪细胞,DPSCs和SHED能够在合适的诱导条件下分化为胞浆中大量脂滴聚集的脂肪细胞。这些成簇的脂滴很容易在显微镜下进行鉴定,还可以在成脂诱导后几周通过油红染色检测。此外,RT-PCR检测脂肪细胞相关的基因(PPARr2和LPL)上调。实验材料D

未分化的牙髓干细胞DPSCs和乳牙干细胞SHEDDE鉴定3

神经分化实验方法原理牙髓的发育与神经嵴细胞密切相关,推测DPSCs和SHED可能具有向神经细胞分化的潜能,,事实上,在特殊的体外诱导条件下,DPSCs和SHED能够向神经细胞分化,形成狭长的细胞突触。神经分化的鉴定包括形态学观察和神经特异性分子的表达检测,其中神经特异性分子包括GFAP、巢蛋白(ne

食管癌细胞系中干细胞样SP细胞的分离鉴定—细胞培养技术

细胞培养技术实验材料人食管癌细胞系试剂、试剂盒胰酶RNA酶碘化丙啶四甲基偶氮唑盐小牛血清DMEMDMSOK2HPO4Na2HPO4NaCI仪器、耗材无菌分选管400目细胞筛水浴锅离心机酶标仪电泳仪显微镜PCR仪实验步骤一、材料准备1.  青霉素储存液(1)将青霉素小瓶中的80万单位的干粉充分溶解于8

细菌鉴定系统的鉴定原理

由于细菌的理化性质不同,分解底物导致 pH 改变而产生不同的颜色。经光电比色法测定来判断反应结果。每张卡上有32项生化反应,采用终点判读法,培养4h 或24h 待反应完成后,由读数仪判读结果。具体为根据所要鉴定的目标菌选取21种典型生化试验,并把生化反应的结果转换为一个8进制数,通过提供的标准数据库

ABO血型鉴定的鉴定原理

  常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗体,依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有:①正向定型:用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。②反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定:凡红细胞出现凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴性。

细菌鉴定仪的鉴定原理

  Biolog公司独创的碳源利用方法,利用微生物对不同碳源代谢率的差异,针对每一类微生物筛选95种不同碳源,配合四唑类显色物质(如TTC、TV),固定于96孔板上(A1孔为阴性对照),接种菌悬液后培养一定时间,通过检测微生物细胞利用不同碳源进行新陈代谢过程中产生的氧化还原酶与显色物质发生反应而导致

痕迹鉴定的足迹鉴定法

足迹是人们在站立和行走时,与地面或其他承受面接触形成的脚掌或鞋、袜等形象痕迹。足迹是刑事案件调查中经常使用的一种重要物证。足迹有两大类特征:一是足迹的形象特征,即单个足迹所反映的赤脚、鞋或袜外表结构特征;一是足迹的步伐特征,即单个或成趟足迹,反映人的行走习惯规律的特征,这些特征是经过长期练习和反复实

ABO血型鉴定的鉴定方法

  生理盐水凝集法  ①玻片法:操作简单,适于大量标本检查,但反应时间长;被检查者如血清抗体效价低,则不易引起红细胞凝集,因此,不适于反向定型。  ②试管法:由于离心作用可加速凝集反应,故反应时间短,而且,借助于离心力可以使红细胞接触紧密,促进凝集作用,适于急诊检查。  红细胞亚型抗原性弱,如抗A抗