通过图位克隆调控基因WFZPD利于作物高产
面包小麦(Triticum aestivum L.)的产量在很大程度上是由花序结构决定的。藏734(Z734)是西藏特有小麦品种,具有罕见的三小穗(TRS)表型,每穗小穗/小花数显著增加。然而,这种特殊的穗形态背后的分子基础是完全未知的。 近日,中国农业大学倪中福教授团队在New Phytologist发表了题为FRIZZY PANICLE defines a regulatory hub for simultaneously controlling spikelet formation and awn elongation in bread wheat的研究工作,发现WFZP基因抑制小穗形成但促进芒伸长的分子机制,是高产作物育种的有利基因。 本研究,通过图位克隆,分离了藏734中TRS性状的调控基因。发现WFZP-A的无义突变和WFZP-D的缺失共同导致了藏734的TRS性状。进一步遗传学分析表明,WFZP-A的无义突......阅读全文
克隆经验—帮助新手快速做出克隆4
9. 在一新1.5mL 离心管中加入 900μL 预冷 无水乙醇、20μL 3M的醋酸钠。将步骤8的上清小心加入本步骤离心管中。颠倒数次混匀。12000rpm 4℃ 离心15分钟。(提示 吸取步骤8中的上清时,千万不要将有机相吸入,宁可放弃一些上清,否则影响后面的连接反应。 另外,本方法
克隆经验:帮助新手快速做出克隆2
(提示 关于酶量的问题。通常的内切酶效价在10U/μL左右,3μL内切酶相当于30U,足够切10μL的质粒。因为通常小提质粒的浓度在200-600ng /μL,一般浓度达不到1μg/μL。根据1U酶切1μg质粒的原则,这一酶量是足够的。)1%琼脂糖回收胶回收(碎胶、酚氯仿抽提法)1. 酶切产物加入1
克隆经验—帮助新手快速做出克隆5
1. 连接产物10μL、5×KCM溶液10μL、双蒸水30μL,(共50μL)混匀,置冰上。2. 从-70℃冰箱中取 1支感受态细胞,置冰上。融化后立即取50μL,加入步骤1中的混合液中,轻轻吹打数次混匀(不可用力过大,不可涡旋), 立即置冰上。3. 冰上放置20 分钟。4. 室温放置10分钟。5.
PCR扩增产物的克隆——TA克隆法
实验方法原理TA克隆 系统由Invitrogen公司(San Diego,CA)发展而来的商业性试剂盒,它用于PCR 产物的克隆 和测序。其原理是利用Taq酶能够在PCR 产物的3'末端加上一个非模板依赖的A,而T载体是一种带有3'T突出端的载体,在连接酶作用下,可以快速地、一步到位
我科学家克隆到新型抗条锈病基因
日前,山东农业大学教授付道林领衔的小麦生物育种团队建立了快速基因克隆技术体系——性状关联突变体测序技术,在小麦中克隆到一个新型抗条锈病基因YrNAM。这一重要科研成果20日在《自然·通讯》在线发表,将为小麦抗病机理研究、生物育种和种质创新提供重要的基因资源及技术支撑。 小麦条锈病是世界范围内严
我国科学家克隆到新型抗条锈病基因
日前,山东农业大学教授付道林领衔的小麦生物育种团队建立了快速基因克隆技术体系——性状关联突变体测序技术,在小麦中克隆到一个新型抗条锈病基因YrNAM。这一重要科研成果20日在《自然·通讯》在线发表,将为小麦抗病机理研究、生物育种和种质创新提供重要的基因资源及技术支撑。 小麦条锈病是世界范围内严
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP -巯基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 连接缓冲液 T4DNA 连接酶
核糖克隆实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液DNA 缓冲液(TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素(Sigma)四环素Ticarcil
多克隆抗体
Making Antibody· Production of Polyclonal Antibody in Rabbit (Walter Steffen)Provides detailed protocol for immunizatioin, bleeding procedure,
核糖克隆实验
这个方案只是用 RNA 酶处理 PCR 产物的一种方法。有很多可选择和有效的途径来纯化 PCR 产物以除去引物,接着用酶处理 PCR 产物,然后再除去酶。值得注意的是用 PCR仪设置温浴程序是很方便的。可以在加热步骤完成后选择加上“冷却”步骤,即在冷模块中放置 5 min 甚至过夜。本实验来源于 P
miRNA--克隆实验
实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达,还有一部分则起着调控基因表达的作用。实验材料 寡核
miRNA克隆实验
实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因
什么是克隆?
“克隆”这个词听上去并不陌生,在我们的日常生活中也会经常用到它。比如,每当春暖花开时,有人喜欢进行植物扦插的试验。从一棵植株上剪下的植条,通过扦插而形成许多遗传物质的组成完全相同的植株就是克隆;又比如有一种样子像苹果,但滋味像梨的水果——梨苹果就是采用树嫁接培育而成的。嫁接形成的产物也是克隆;还有将
定位候选克隆
当前,人类基因组研究的重心正在由“结构”向“功能”转移,一个以基因组功能研究为主要内容的所谓“后基因组时代”(post-genomics),也即功能基因组(functional genomics)时代,即将到来。如何获取基因的功能信息,即与人类重大疾病和重要生理功能相关的基因信息,就摆在了我们面前。
靶向克隆法
靶向克隆法是一种新的基因克隆方法,该克隆方法的特点是:在基因克隆过程中不使用已有的DNA Ligase,而是使用新开发的靶向克隆酶。靶向克隆酶能够使末端序列相同的双链DNA(14bp-18bp)同源重组,从而达到克隆基因的目的。LP Recco酶,中文名:靶向克隆酶,无需传统基因克隆所需要的限制性内
制备克隆实验
试剂、试剂盒ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱水浴箱实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇(可选择)IPTG(100 mmol/L
PCR产物克隆
克隆方法:1. 平端连接 通常情况下,PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接,但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性,能在两6条DNA链的3''''末端加上一个多余的碱基,使合成的PCR产物成为3'''
克隆的种类
1.由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系(每个基因彼此相同)。2.先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的受体卵细胞中,利用微电流刺激等使两者融合为一体。(与提供细胞者基因相同)
PCR产物克隆
克隆方法:1. 平端连接 通常情况下,PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接,但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性,能在两6条DNA链的3''末端加上一个多余的碱基,使合成的PCR产物成为3''突出一个碱基的DNA分子。这种DN
核糖克隆实验
—、材料1. 缓冲液、溶液和试剂.10XATEN 缓冲液0.5mol/LTris-HCl,pH7.92.5mol/L 氯化钠0.25mol/L Na4EDTA,pH7.9甜菜碱(SigmaB-2629)蓝色葡聚糖(bluedextran)(SigmaD
PCR产物克隆
PCR克隆主要有TA克隆法, 限制性酶切与连接法,杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。但因为TA克隆法操作最简单,快速和高效的原因,成为Taq聚合酶PCR产物的最佳克隆方法。TA克隆法由Invitrogen发明,并拥有全球TA Cloning商标的ZL权。TA克隆方法(Original TA Cl
核糖克隆实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液DNA 缓冲液(TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA 蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液 RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素(Sigma)四
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材 FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱 水浴箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇(可选择)IPTG(100 mm
miRNA克隆实验
在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达,还有一部分则起着调控基因表达的作用。本实验来源「RNA 实验指导手册」主
分子克隆介绍
各位小伙伴,大家还记得当初进实验室的时候接触到的一个实验技能是什么呢?没错,是 PCR 扩增。小编曾经也是,看着自己亲自配比 PCR 克隆扩增的每个组分,亲眼看着琼脂糖凝胶在紫外透光台上发出的幽绿色的荧光,也是深深被迷住。但总不可能成天就对着这个邪魅的荧光发呆,对吧?看久了,她会爱上你的眼
细胞克隆染色
做克隆形成率的染色非常非常简单,因为克隆产生的细胞集落非常清晰,大的甚至肉眼可辩.对染色方法只有一个基本要求,染细胞不染培养容器就可以了.非常多的染料可以用作此用途.像是一楼所说的结晶紫也可以.
多国合作编纂“小麦字典”:六倍体小麦基因测序完成
一本小麦基因组学“字典”就此诞生了。 8月17日,《科学》在线发布了一项历时13年的研究:完整版六倍体小麦“中国春”的基因组图谱。这一成果由国际小麦基因组测序联盟(IWGSC)牵头,署名作者来自20余个国家的70多家机构。 这本“字典”能干吗?小麦倒不倒伏、耐不耐旱、种子是大还是小、营养价值
玉米小麦容重器分析小麦容重与粒度完善度的关系
小麦的定等指标在国家标准中以容重值作参考,而不完善粒等指标是小麦质量限制指标,这 在收购过程中对其质量等级的判断有着十分重要的作用。一般来说,籽粒成熟饱满、结构紧密、颗粒小、含水量低的样品,容重较大;反之,容重较小.小麦的容重 也受其籽粒粒度不完善的影响,这就需要采用玉米小麦容重器进行研究分析才能得
小麦容重器研究杂质类型与小麦容重的相关性
小麦的容重常常是作为粮食定等的一个重要指标,因此小麦容重器在粮食流通的过程中,应用非常广泛。而在使用小麦容重器的测定过程中,我们发现杂质类型与小麦容重存在一定的相关性。利用小麦容重器对15份农户样品和50份直属库样品进行容重、总杂质含量和各类型杂质含量的检测,结果发现,筛上物、筛下物、大麦、砂石、麦
小麦降落数值的测定以及与小麦发芽率的关系
当前,我国人民的生活已跨越基本的温饱型,向营养化、精细化、科学化的高品质生活转变,广大消费者和食品加工行业对小麦粉品质提出了更高的要求,面粉加工企业要生产具有良好的加工品质和食用品质的面粉,满足市场需求,就需要大量优质小麦。降落数值作为小麦品质的一项重要指标,因其能快速准确地反映出小麦的品质,已