“一锅法”，Cy5合成策略
近红外菁染料Cy5因光谱峰宽小、光稳定性强、背景吸收低等优点在分子示踪、生物成像等领域应用广泛。然而，包括Cy5在内的绝大多数荧光染料分子，主要被用作外源性有机分子，在活细胞内的原位合成受到合成条件（如空气、水、pH、温度、浓度、催化剂）和生物安全性等因素的极大限制。国内外近年来有机光化学研究的迅速发展为解决细胞环境中外源性染料分子合成的问题提供了重要机会。 近日，南京大学的冯福德教授和中国科学院化学研究所的王树研究员合作，发现染料中间体1-(3-氨丙基) -2,3,3-三甲基-3-氢-吲哚（TMI）具有特殊的光敏性质，能够在加热和白光诱导下转化为Cy5染料，提出了“一锅法”的Cy5合成策略，并阐释了Cy5共轭骨架与TMI侧基之间的结构关联、氢原子转移和迈克尔加成反应等参与的化学机制。 非常有意义的是，Cy5的光控合成在活细胞胞内环境中也可以实现。光照时间依赖性以及在特定细胞器（溶酶体）的高定位性，表明Cy5原位合成......阅读全文
免疫荧光细胞化学染色方法1
一、标本制作可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 （一）直接法 1．染色 切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等），
荧光染料CFSE活细胞标记的特点
荧光染料CFSE(CFDA-SE)，是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞。其基本原理如下：CFSE能够轻易穿透细胞膜，在活细胞内与胞内蛋白共价结合，水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中，它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强
荧光细胞分析仪功能特点介绍
荧光细胞分析仪功能特点介绍荧光细胞分析仪将细胞计数和细胞分析两种功能集于一身，并且能通过能荧光和亮光两种方式进行细胞成像，因此可以广泛的用于活细胞成像、细胞迁移测定、细胞培养质量控制等方面。荧光细胞分析仪还可以通过新式分析软件对荧光细胞进行全面分析，使得出芽增殖分析，活细胞计数等数据更加可靠，这一仪
细胞支原体污染的荧光检测方法
DNA荧光染色法：1.原理：利用荧光染剂（bisbenzimide, Hoechst 33258）侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域，因为支原体之DNA中A-T含量占多数（55～80%），所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染
gfp质粒转染细胞后多久发荧光
6个小时以上
用什么染料可以实现全细胞荧光
顾名思义，就是整个细胞都可以荧光。染料：亲脂性羰花青染料或吖啶橙就可以原理：当用一种波长的光(如紫外光)照射某种物质时，这种物质会在极短的时问内发射出较照射波长为长的光(可见的光)，这种光就称为荧光。有些生物材料受到紫外线照射后能直接发出荧光称自发荧光(或直接荧光)；有的生物材料受紫外线照射后并不发
如何分析细胞免疫荧光的结果
细胞免疫荧光（Immunofluorescence, IF）是一种常用的技术，用于检测细胞内特定蛋白质或其他分子的分布和表达情况。分析细胞免疫荧光的结果涉及多个步骤，包括图像采集、图像处理、定量分析和数据解释。以下是详细的步骤和方法：1. 图像采集显微镜选择：使用荧光显微镜（如共聚焦显微镜）进行图像
荧光染料CFSE活细胞标记的特点
荧光染料CFSE(CFDA-SE)，是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞。其基本原理如下：CFSE能够轻易穿透细胞膜，在活细胞内与胞内蛋白共价结合，水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中，它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强
细胞骨架的荧光探针标记方法
细胞骨架主要有微管(micmtuble, MT)，微丝(microfilament, MF)，中间丝(intermediate filament, IF三种类型。它们分别由不同的蛋白单体组装而成，其中微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是细胞骨架的重要组
如何分析细胞免疫荧光的结果
细胞免疫荧光（Immunofluorescence, IF）是一种常用的技术，用于检测细胞内特定蛋白质或其他分子的分布和表达情况。分析细胞免疫荧光的结果涉及多个步骤，包括图像采集、图像处理、定量分析和数据解释。以下是详细的步骤和方法：1. 图像采集显微镜选择：使用荧光显微镜（如共聚焦显微镜）进行图像
细胞爬片免疫荧光实验步骤
第一天：1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次，每次3min；2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min， PBS浸洗玻片3次，每次3min；3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min（细胞膜上表达的抗原省略此步骤）；4. PBS浸洗玻片3次，每次3 min
如何分析细胞免疫荧光的结果
细胞免疫荧光（Immunofluorescence, IF）是一种常用的技术，用于检测细胞内特定蛋白质或其他分子的分布和表达情况。分析细胞免疫荧光的结果涉及多个步骤，包括图像采集、图像处理、定量分析和数据解释。以下是详细的步骤和方法：1. 图像采集显微镜选择：使用荧光显微镜（如共聚焦显微镜）进行图像
荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具
荧光显微镜(Fluorescencemicroscope)：荧光显微镜是以紫外线为光源，用以照射被检物体，使之发出荧光，然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。 荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质
荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具
荧光显微镜(Fluorescencemicroscope)：荧光显微镜是以紫外线为光源，用以照射被检物体，使之发出荧光，然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。 荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本
纳米流式分析法肾结石高通量无创检测新方法
肾结石是泌尿外科最常见的的疾病之一，是一种全球性疾病。中国是世界上肾结石患者最多的国家之一。近年来，肾结石在我国的发病率有逐渐上升趋势，大约5%-15%的人群一生中会罹患肾结石。肾结石严重影响患者的身体健康，如果肾结石得不到及时诊断和治疗,可能会造成尿路阻塞,排尿疼痛和肾积水，严重者甚至可能造成尿毒
活细胞荧光染色后细胞形态变圆是什么原因
不固定直接染色，细胞就会变圆，因为染色液的渗透压和细胞质不一样可以选择用CFSE染色后，铺板。过夜，等细胞重新贴壁后，再用PI染色，你应该是要看双染的效果，这个比较合适。用荧光显微镜观察的时候可以先观测拍照再固定，避免甲醇影响了细胞状态让它贴的不牢，或者不固定直接拍照，PI染色效果一个小时影响不大。
Western－Blot实验（二）
小巧的体格，却一应俱全，可以灵活控制多种应用程序，包括化学发光，荧光，DNA/蛋白胶。可以满足对实验室各种样品成像的要求。是目前市面上唯一的一款既可进行Cy3, Cy5, Cy2 多色荧光LED成像，又可在700和800nm处进行近红外激光定量荧光western 成像系统。这达到对成像最完美
荧光成像与生物发光成像技术的优缺点对比
一、荧光成像技术优点 数据来源：使用FOBI整体荧光成像系统对荧光染料Cy5标记的药物进行观察 相比生物发光成像，荧光成像技术的优势主要表现在： 1 荧光蛋白及荧光染料标记能力更强 荧光标记分子种类繁多，包括荧光蛋白、荧光染料、量子点标记等，可以对基因、蛋白、抗体、化合药
真菌/酵母样品细胞细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细胞
真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）红色荧光 流式细胞分析试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途 YIJI真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶（PROPIDIUM IODIDE）红色荧光流式细胞分析试剂是一种旨在通过细胞流式仪测定真菌/酵母细胞中D
定量分析晚期细胞凋亡中DNA片段的直接方法
多细胞生物是由高度组织化的细胞群落组成的，为了这个细胞群落的茁壮成长，重要的是1.通过复杂的细胞过程，如细胞增殖和凋亡，2.建立稳态。这两个过程中任何一个过程的不适当转变都会导致疾病。例如，神经元凋亡活性的增加是各种神经退行性疾病如阿尔茨海默氏症和帕金森氏症的根源。相反，凋亡机制的丧失会导致细胞过度
流式细胞仪主要构造和工作原理（二）
信号检测系统 当测定标本在鞘流液约束下细胞成单行排列依次通过激光检测区时产生散射光和荧光信号,散射光分为前向角散射（Forward Scatter, FS）和侧向角散射或900散射（Side Scatter, SS）,散射光是细胞的物理参数与细胞样本的制备（如染色）无关;荧光信号也有两种,一种是细胞
间接染色步骤（细胞表面染色）
实验概要间接标记需要两个孵育步骤，先与一抗再与合适的第二抗体孵育，二抗（不是一抗）结合了荧光染料（FITC、PE、Cy5 等）。请注意这是一个普遍的程序，您可以根据自己的使用情况进行调整。实验步骤1. 收集并洗涤细胞，然后确定细胞总数。细胞通常在聚苯乙烯的圆底 12 x 75 mm2 Falcon
凝胶成像系统分类
普通凝胶成像分析系统： 适用于对蛋白凝胶电泳(考马斯染色，银染)等可见光样品，以及DNA/RNA（EB、TLC plates、SYBR Green、gelred）等紫外样品。 化学发光成像分析系统 ： 适用于化学发光/荧光/可见光凝胶成像分析系统。如ECL、ECL PLUS、Souther
人－NK－T－细－胞－的－分－离－和－扩－增
实验步骤基本方案 1 NK T 细胞的鉴定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培养基，含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可选）流 式 细 胞 缓 冲 液（flow cytometry buffer， FCbuffer
超微量全光谱分光光度计的应用范围
MicroSpectro紫外-可见光全光谱分光光度计突破传统检测限制，允许使用者只用1μl的上样体积即可得到高度准确的结果以及良好的重复性。ZL的光纤样本拉伸设计，无须使用比色皿或毛细管等传统容器，操作极为方便，节约耗材费用，也避免了每次测量清洗比色皿的繁琐。宽广的线性范围，减少了样本稀释的繁琐
基因芯片实验操作流程图
芯片实验操作流程包括样本DNA或RNA制备、标记、杂交及洗涤等步骤基因芯片实验操作流程图 1．样本DNA或RNA制备 芯片实验中核酸的抽提没有特殊之处，参照常规的分子生物学实验手册就可以。但对于RNA样本，由于RNA的稳定性很差，在活体内的半衰期也很短，因此取材一定要新鲜，取材后
荧光成像与生物发光成像技术的优缺点比较
上次，我们对比了荧光成像和生物发光的基本原理。那针对自己的课题，生物发光和荧光成像哪个好？什么情况下选择生物发光，什么情况下选择荧光成像？今天为大家解答关键问题：荧光成像和生物发光成像的优缺点是什么？一、荧光成像技术优点数据来源：使用FOBI整体荧光成像系统对荧光染料Cy5标记的药物进行观察相比生物
DNA结合染料对细胞核的多色标记技术的多种应用
DNA结合染料对细胞核的多色标记技术 细胞核是动物细胞器中最大的。在哺乳动物细胞中，核的平均直径约为6μm，约占总细胞体积的10％。核包含细胞的大部分遗传物质，组织成多个长线性DNA分子，与多种蛋白质（例如组蛋白）复合形成染色体。这些染色体内的基因是细胞的核基因组。核的功能是维持这些基因的完整性，并
细胞调亡的研究方法：用荧光激活的细胞分类仪
用荧光激活的细胞分类仪检测调亡细胞1）原位缺口翻译检测裂解的DNA片段1．取106经促调亡物质处理的细胞，用1％ BSA-PBS洗涤细胞后加入0.1ml FITC标记的抗CD4或抗CD8单克隆抗体，4℃ 20分钟。用1％ BSA-PBS洗涤细胞。置冰上。2．加入0.1ml 1％多聚甲醛，置冰上5分钟
使用CytoFLEX流式细胞仪+荧光染料CFSE检测细胞增殖
荧光染料CFSE(CFDA-SE)，是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞。其基本原理如下：CFSE能够轻易穿透细胞膜，在活细胞内与胞内蛋白共价结合，水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中，它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强