等温扩增，存在“假阳性”的Bug？
等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术，从诞生之日起就不断受到研究者的青睐，但也少不了质疑，甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是，在建立方法或者实际样本检测的过程中，等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高，使得其实际应用范围变窄，未能真正显示出其检测优势。因此，推出这经验篇来回答“当等温扩增出现假阳性时应该如何应对？”。01假阳性现象 假阳性是指检测阴性材料得到阳性结果。如果一次实验中的几个阴性对照中出现一个或几个阳性结果，提示本次实验中其它标本的检测结果可能有假阳性。实验中设立的阴性对照可提示有无假阳性结果出现。02造成假阳性的原因 样品间交叉污染：样本污染主要有收集样本的容器被污染，或样本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有样本而造成相互间交叉污染；样本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导至标本间污染； 2. ......阅读全文
如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果？
【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假 ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域，是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中，ELISA操作的各方面均对结果产生影响，如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外，一些非主观因
最杰出的等温扩增方法之一——解旋酶依赖性扩增HDA
解旋酶依赖性扩增技术（helicase-dependent amplification，HDA）于2004年发明，是模拟动物体内DNA的复制机制的一种体外恒温基因扩增技术。随着技术的发展，在反应速度、特异性和灵敏度上也不断被提升，至少有三代HAD技术，整个系统比较简单，高效。 系统核心组成：解旋酶，
现行Hp检测可能出现的假阳性
现行Hp检测可能出现的假阳性是检验技师考试中所包含的内容。医学教育网收集整理了部分相关信息供学员参考。 意大利Brandi等报告，在低酸患者胃液及胃黏膜中发现非幽门螺杆菌（Hp）尿素酶阳性细菌。该结果表明，在临床上对低酸患者采用胃黏膜快速尿素酶试验（RUT）及尿素呼气试验（C-UBT）诊断Hp
导致尿HCG假阳性的原因分析
HCG检测应以血β-HCG检查为准。尿妊娠试验有时候受其他的因素影响，比如其他的一些激素，比如LH激素有时就可与试纸反应，导致假阳性;还有甲状腺系列的激素也有可能对它有影响。有时候无法确定到底是什么干扰因素导致的假阳性。总之尿试纸条检测的干扰因素要比血β-HCG要多一些。 HCG是胎盘绒毛膜滋养层细
血培养假阳性的原因及对策
色原法血培养系统采用比色计传感器和反射光原理，监测溶于培养基中的二氧化碳（CO2）的产生和存在状况。样本中存在的微生物在新陈代谢或分解糖类过程中产生CO2导致培养基酸碱度（PH）改变，从而导致培养瓶底部的半透硅胶材料（Liquid Emulsion Sensor ， LES）颜色变浅，通过
导致PCR假阳性的污染源
PCR反应的特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。一、标本交叉污染源：收集标本的容器：标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；吸样枪：标本核酸模板在提取过程中，由于污染导致标本间污染；气溶胶：zui可能
血培养假阳性的原因及对策
色原法血培养系统采用比色计传感器和反射光原理，监测溶于培养基中的二氧化碳（CO2）的产生和存在状况。样本中存在的微生物在新陈代谢或分解糖类过程中产生CO2导致培养基酸碱度（PH）改变，从而导致培养瓶底部的半透硅胶材料（Liquid Emulsion Sensor ， LES）颜色变浅，通过照射感应器
导致尿HCG假阳性的原因分析
HCG检测应以血β-HCG检查为准。尿妊娠试验有时候受其他的因素影响，比如其他的一些激素，比如LH激素有时就可与试纸反应，导致假阳性;还有甲状腺系列的激素也有可能对它有影响。有时候无法确定到底是什么干扰因素导致的假阳性。总之尿试纸条检测的干扰因素要比血β-HCG要多一些。 HCG是胎盘绒毛膜滋
导致尿HCG假阳性的原因分析
应以血HCG检查为准。尿妊娠试验有时候受其他的因素影响，比如其他的一些激素，比如LH激素有时就可与试纸反应，导致假阳性;还有甲状腺系列的激素也有可能对它有影响。有时候无法确定到底是什么干扰因素导致的假阳性。总之尿试纸条检测的干扰因素要比血B-HCG要多一些。 HCG是胎盘绒毛膜滋养层细胞产生的一种具
尿妊娠试验假阳性原因分析
绒毛膜促性腺激素（hCG）是由胎盘绒毛膜滋养层细胞产生的一种具有促性腺发育的糖蛋白激素，由α和β两个亚基组成。 其中α亚基与垂体分泌的卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）和促甲状腺激素（TSH）的α亚基相似，β亚基则是特异的，因此一般用β-hCG 抗体来测定标本中的β-hCG。 尿妊
等温扩增技术LAMP和CPA的“孪生兄弟相”
想了很久，还是决定将LAMP和CPA放在一起进行介绍。主要是因为两者的引物设计都相对比较复杂，但却有着比较相似的工作原理，有异曲同工之妙。 背景：LAMP，loop-mediatedisothermal amplification，环介导等温扩增技术LAMP是Notomi等于2000年首先提出来的一
深圳先进院首创CRISPR等温扩增基因检测技术
近日，中国科学院深圳先进技术研究院博士周文华等在CRISPR等温扩增基因检测技术领域取得新进展。相关工作“A CRISPR-Cas9-triggered strand displacement amplification method for ultrasensitive DNA detecti
快检革命前夜：等温扩增－vs－胶体金
不知道作者是不是故意放漏洞，引导大家讨论。既如此，我就发表一下个人观点，给读者参考。首先优思达的家用快检Cov19-FluA-FluB三合一的确是个好设计。展会上看到让人眼前一亮。性能不知道，有待考察。下面讲下我反对的地方。文中观点一：它是第一款宣传自测核酸的概念产品并非如此。2020年已经有报道杭
PCR产物的假阳性的相关问题介绍
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。 引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行PCR扩增时，扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染：这种污染有两种原因：
Nature社论：困扰干细胞疗法的假阳性
人们一直希望能够利用患者自身的干细胞对疾病进行治疗，其中用成体干细胞治疗心脏疾病被寄予了厚望。日前，伦敦的一个研究团队对相关临床试验进行了仔细审查。他们发现得出正面结论的都是有漏洞的试验，而完全无误的试验显示这种治疗并无效果。这项研究一经发表就引起了广泛的关注，本期Nature杂志也发表社论对此
新冠病毒抗体假阳性引发的恐慌
4月25日，一位来自妇科的中老年妇女的新冠抗体结果，引发了我们的内心的恐慌。该患者新型冠状病毒特异性IgM抗体阳性（南京诺维赞），换用另一厂家（唐山英诺特）的新型冠状病毒抗体检测试剂盒进行比对，复查结果一致（图1）。在这个全球新冠肺炎爆发时期，这样的一个抗体检测结果还是引发了内心一阵紧张。速查看患者
酶促重组等温扩增（ERA）的原理和核心技术
酶促重组等温扩增技术(ERA技术)是一种等温核酸扩增技术,它是利用抗体制药领域先进的Molecular Design、Directed Evolution、Affinity Maturation 等技术手段,将来源于细菌,病毒和噬菌体的特定工具酶进行改造突变并筛选其功能,通过不同的核酸扩增反应体系进
PCR－反应出现假阳性结果原因
1 ) 引物设计不合适： 选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而，在进行PCR扩增时，扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出现假阳性。需重新设计引物。 2 ) 靶序列或扩增产物的交叉污染： 这种污染有两种原因： 一是整个基因组或大片段的交叉污染，导致假
菌落pcr会出现假阳性结果吗
最近做酶切连接转化，最后做鉴定时，以菌落为模板进行PCR时可以见到有目的条带;当把菌落接种到LB液扩菌后，以菌液为模板进行PCR时却什么东东都没有?请问会是什么原因啊?多多指教啊!建议重新以菌落为模板进行PCR检测，再重新以菌液为模板进行PCR检测，因为菌落或者菌液PCR假阳性的几率还是比较高的。但
丙肝抗体假阳性是怎么回事
丙肝抗体假阳性是怎么回事,有些朋友在去检查的时候，被医生告知是丙肝抗体阳性，但是再次确诊的时候又得出丙肝抗体假阳性的结果，这是怎么回事?丙肝抗体假阳性是怎么回事?自己到底有没有感染丙肝病毒呢?现丙肝抗体假阳性不代表是慢性或急性丙肝患者。丙肝抗体假阳性结果主要是多种纤维蛋白原对试剂的影响所造成的。
环介导等温扩增反应(LAMP)－基因诊断技术及简介
PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用，其灵敏度高、特异性好，是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂，对仪器和人员要求比较高，不适合基层或现场快速诊断，因此在国内的推广速度并不是很快。2000年日本学者Notomi在Nucleic Aci
探讨两种方法检测HBsAg假阳性和假阴性的影响因素
目前HBsAg的检测方法很多，但是在临床实验室检测HBsAg的方法最常用的主要是金标法和酶联免疫吸附试验（ELISA）。常常会有患者及其他工作人员反映HBsAg检验结果与其他医疗单位不一致，为此常会发生医疗纠纷。因此，提高HBsAg检测的准确性，避免假阳性和假阴性所造成的不良社会影响，是我们临床检验
HBsAg假阳性和假阴性原因分析之ELISA法和金标法
ELISA法ELISA法假阴性原因1、标本用肝素或EDTA等抗凝处理易造成HBsAg检测结果假阴性，肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷,能吸附酶标记物不易洗脱有关；EDTA、酶抑制剂可抑制ELISA系统中的辣根过氧化物酶活性，造成假阴性。2、标本保存不当,在冰箱内保存过久的标
再讨论“胎心监护”的假阳性问题
胎心监护出现于上世纪九十年代，距今已有进三十年的历史，胎心监护仪也由最初的简单型到目前的无线多探头、自动分析、多功能型发展，监护水平也有了很大提高。胎心律反应胎儿神经系统机能及胎儿宫内健康状况，胎儿中枢神经系统对内环境最缺少储备能力，即对缺氧耐受性最差，对胎心律的监护，也就是即时胎心律的变化情况，可
梅毒血清学检查假阳性的原因
梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种性病。感染梅毒后，人体内会产生两类抗体，类是直接针对梅毒螺旋体的抗体，另一类则是针对类脂质的抗体。针对类脂质的抗体因不直接针对梅毒螺旋体，因此无特异性，除感染梅毒外，患另外一些疾病以及生理状况的改变，体内也可能产生低滴度的抗类脂质抗体。诊断梅毒时，所做的梅毒血清学检查即检
造成HBsAg检测出现假阳性的几种原因
造成HBsAg检测出现假阳性的原因可能会有以下几种： 1． 待测标本溶血或含有血细胞。 2． 待测标本长菌或其它原因混浊。 3． 洗板时洗涤液溢出，污染其它孔。 4． 洗板机内部管道有真菌生长。 5． 洗板机设置不当。 6． 手工洗板时，拍干用纸未更换。 7． 实验中，实际孵育时间过长
医生“料不到”的尿妊娠试验假阳性原因
文：丁香园检验版版主 xxll2006绒毛膜促性腺激素（hCG）是由胎盘绒毛膜滋养层细胞产生的一种具有促性腺发育的糖蛋白激素，由α和β两个亚基组成。其中α亚基与垂体分泌的卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）和促甲状腺激素（TSH）的α亚基相似，β亚基则是特异的，因此一般用β-hCG 抗体来测定标
PCR拖尾及假阳性的原因及对策
拖尾 现象：产物在凝胶上呈Smear状态。 原因： 1.模板不纯 2.Buffer不合适 3.退火温度偏低 4.酶量过多 5.dNTP、Mg2+浓度偏高 6.循环次数过多 对策： 1.纯化模板 2.更换Buffer 3.适当提高退火温度 4.适量用酶 5.适当降低dNTP
梅毒血清反应假阳性的分类及处理
梅毒血清反应假阳性的分类:1.技术性假阳性反应由于标本的采集或保存不当（如细胞污染或溶血）、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。2.生物学假阳性反应是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化，使梅毒血清试验出现阳性。(1)急性生物学假阳性反应很多非梅毒螺旋体感染性疾病，如风疹、水痘、传染性单核细胞
梅毒血清反应假阳性的分类及处理
梅毒血清反应假阳性的分类: 1.技术性假阳性反应 由于标本的采集或保存不当（如细胞污染或溶血）、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。 2.生物学假阳性反应 是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化，使梅毒血清试验出现阳性。 (1)急性生物学假阳性反应很多非梅毒螺旋体感染性疾病，如风疹、水痘