等温扩增,存在“假阳性”的Bug?
等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术,从诞生之日起就不断受到研究者的青睐,但也少不了质疑,甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是,在建立方法或者实际样本检测的过程中,等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高,使得其实际应用范围变窄,未能真正显示出其检测优势。因此,推出这经验篇来回答“当等温扩增出现假阳性时应该如何应对?”。01假阳性现象 假阳性是指检测阴性材料得到阳性结果。如果一次实验中的几个阴性对照中出现一个或几个阳性结果,提示本次实验中其它标本的检测结果可能有假阳性。实验中设立的阴性对照可提示有无假阳性结果出现。02造成假阳性的原因 样品间交叉污染:样本污染主要有收集样本的容器被污染,或样本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有样本而造成相互间交叉污染;样本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导至标本间污染; 2. ......阅读全文
医生“料不到”的尿妊娠试验假阳性原因
文:丁香园检验版版主 xxll2006绒毛膜促性腺激素(hCG)是由胎盘绒毛膜滋养层细胞产生的一种具有促性腺发育的糖蛋白激素,由α和β两个亚基组成。其中α亚基与垂体分泌的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和促甲状腺激素(TSH)的α亚基相似,β亚基则是特异的,因此一般用β-hCG 抗体来测定标
PCR假阳性的原因分析及解决办法
假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。产生的原因有:①引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行 PCR 扩增时,扩增出的 PCR 产物为非目的序列;②靶序列太短或引物太短;③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有:操作轻柔,防止
梅毒血清反应假阳性的分类及处理
梅毒血清反应假阳性的分类:1.技术性假阳性反应由于标本的采集或保存不当(如细胞污染或溶血)、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。2.生物学假阳性反应是由于患者有其他疾病或生理状态发生变化,使梅毒血清试验出现阳性。(1)急性生物学假阳性反应很多非梅毒螺旋体感染性疾病,如风疹、水痘、传染性单核细胞
化学发光假阳性本底产生的原因分析
近期收到有小伙伴提问,关于如何解决发光试剂盒研发过程中的本底偏高和假阳性问题。解决问题最重要的是了解问题产生的原因,本微信平台分类汇总了化学发光试剂产生假阳性本底的原因,由于问题本身并没有很具体的描述,因此本文也只广泛的汇总,不包含具体的项目或者方法学方面的内容。希望对大家的工作有所帮助。抗原/抗体
再讨论“胎心监护”的假阳性问题
胎心监护出现于上世纪九十年代,距今已有进三十年的历史,胎心监护仪也由最初的简单型到目前的无线多探头、自动分析、多功能型发展,监护水平也有了很大提高。胎心律反应胎儿神经系统机能及胎儿宫内健康状况,胎儿中枢神经系统对内环境最缺少储备能力,即对缺氧耐受性最差,对胎心律的监护,也就是即时胎心律的变化情况,可
3分钟读懂环介导等温扩增(LAMP)那些事儿
什么是LAMP? 环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是Notomi等人于2000年提出来的一种新的核酸扩增技术。针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,在链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)作用下,可以在
无创产前检测须注意假阳性结果
无创产前检测技术已经成为筛查胎儿缺陷的一种重要手段。但美中研究人员在美国新一期《新英格兰医学杂志》上撰文提醒说,无创产前检测技术尽管准确率很高,但并不能完全避免假阳性结果,因此出现阳性结果后还要结合超声波等其他检测进一步确认。 所谓假阳性,是指胎儿正常但检测结果错误地显示不正常。 参与研
梅毒血清检查会出现假阳性吗
会有假阳性的可能,RPR试验,即为检测类脂质抗体的实验;而TPHA则为直接检测梅毒螺旋体的实验。因RPR是检测类脂质抗体,而不是直接检测抗梅毒螺旋体抗体的实验,因而无特异性,凡能导致产生类脂质抗体的疾病,均能使RPR阳性。
高白细胞计数造成hCG检测假阳性
hCG是妇科最常见的检查项目,由于其对妊娠状况以及妇科肿瘤的诊治具有极为重要的价值,因此临床对其检测准确程度要求较高。然而,现实的情况是hCG的检测性能并不尽如人意。近两年来的Clinical Chemistry刊登了多篇关于hCG检测假阳性和假阴性的论文,提醒广大实验室医学工作者注意hCG检测
酶免法检测HBeAg假阳性原因分析
我们在应用酶免法检测乙型肝炎病毒血清学标志物时,发现有时会出现单项HBeAg(+)或HBeAg(+)、抗-HBs(+)等罕见模式。为慎重起见再将标本离心后复检 HBeAg, 结果为阴性。为此我们特做如下实验。取10份 HBeAg 阴性的献血员的不抗凝血液,每份分两管,一管静置0.5h、1h、2h;另
HCG假阳性可能导致不恰当临床决策
临床中罕见显著的人绒毛膜促性腺激素(hCG)的假阳性实验室结果。但是某些个体血清中存在循环因子(例如,嗜异性抗体或无活性型hCG)可与hCG抗体相互作用,导致异常或意料外的试验结果。假阳性和假阴性试验结果可出现于任何样本,当临床表现与实验室结果不相符时需要警惕。排除干扰出现的方法包括采取尿检,用连续
梅毒血清反应的假阳性的检查过程
梅毒以外其他原因造成的RPR阳性有一个特点,滴度一般较低,小于1:8。RPR实验容易出现假阳性,医生常同时做特异性较强的TPHA实验来证实梅毒诊断。值得一提的是,TPHA等直接针对梅毒螺旋体的特异性实验,在一般人中也有1%的假阳性。国内曾报道某医院内科住院患者中,TPHA阳性者竟有一半是假阳性。
梅毒血清反应的假阳性的临床意义
异常结果:除梅毒外,患上呼吸道感染、肺炎、活动性肺结核、风湿性心脏病、亚急性细菌性心内膜炎、传染性肝炎、肝硬化、慢性肾炎、钩端螺旋体病、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及海洛因成瘾等,都可导致RPR阳性。 需要检查的人群:临床上医生怀疑有梅毒感染的患者,是梅毒确诊,鉴别的检查,也可作
梅毒血清反应的假阳性的临床意义
异常结果:除梅毒外,患上呼吸道感染、肺炎、活动性肺结核、风湿性心脏病、亚急性细菌性心内膜炎、传染性肝炎、肝硬化、慢性肾炎、钩端螺旋体病、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及海洛因成瘾等,都可导致RPR阳性。 需要检查的人群:临床上医生怀疑有梅毒感染的患者,是梅毒确诊,鉴别的检查,也可作
梅毒血清反应的假阳性的注意事项
梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要依据,但不是唯一依据。诊断梅毒,除依据化验结果外,更重要的依据是详细了解患者的生活史和既往病史,以及详细的体查。综合分析后慎重作出判断,才能避免梅毒化验结果假阳性造成的误诊。 不合宜人群: 没有 检查前禁忌:注意正常的生活饮食习惯,注意个人卫生。禁止不洁性交。
梅毒血清反应的假阳性的检查过程
梅毒以外其他原因造成的RPR阳性有一个特点,滴度一般较低,小于1:8。RPR实验容易出现假阳性,医生常同时做特异性较强的TPHA实验来证实梅毒诊断。值得一提的是,TPHA等直接针对梅毒螺旋体的特异性实验,在一般人中也有1%的假阳性。国内曾报道某医院内科住院患者中,TPHA阳性者竟有一半是假阳性。
PCR反应假阴性,不出现扩增条带的原因分析
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶抑制剂,③模板中蛋白质没有消 化除净,特别是染色体中的组蛋白,④在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚。⑤模 板核酸变性
微流控漫谈系列之环介导等温扩增(LAMP)检测技术
图解环介导等温扩增(LAMP)微流控检测技术基于微流控芯片的核酸扩增检测系统是微流控技术最具前景的应用方向之一,它简化了核酸扩增检测中繁琐的样品前处理和扩增产物检测步骤。在多种检测方法当中,环介导等温扩增技术(LAMP)与微流控检测技术结合的核酸扩增检测系统非常适合于应用于POCT(床边检测)。根据
环介导等温扩增反应(LAMP)-基因诊断技术及产品简介
PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。 2000年日本学者Notomi在Nucle
环介导等温扩增反应(LAMP)-基因诊断技术及产品简介
PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。 2000年日本学者Notomi在Nucle
防癌筛查中的“过度诊断”和“假阳性”问题
什么是"过度诊断"? 过度诊断是指医生对于个体(患者)的诊断是准确的,没有问题的,但是对于该患者所患的疾病,即便医生没有诊断出来、患者也没有接受相关治疗,该疾病也不会在该患者的有生之年出现症状或者对患者的生命造成威胁。由于疾病本身的复杂性,过度诊断在临床上是无法避免的,只能尽可能的降低过度
醋酸白试验的假阳性问题是什么
虽然醋酸白试验检测临床和亚临床HPV感染敏感性较好,但是这种方法特异性有时不太理想,一些慢性炎症,例如尿道炎和龟头包皮炎,上皮增厚或擦破外伤中可以出现假阳性反应。区别在于,同真阳性结果相比较时,假阳性结果中的变白现象显得界线不清和不规则,有时候甚至不明显。
尿液分析仪检测出现假阳性的原因
假阳性。即尿液分析仪潜血反应阳性,镜检阴性,其常见原因有: (1)血红蛋白(Hb) 尿液分析仪潜血反应既能与完整的RBC发生阳性反应,也可与RBC溶解释放的Hb发生阳性反应,而显微镜只能检出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量极微,定性为阴性。疾病时,尿中Hb有两个来源:一是发生血管内溶血,血
Trust试验如何避免误差和假阳性结果的出现?
严格控制实验条件:包括温度、时间和pH值等,以确保实验结果的准确性和可靠性。 使用高质量的试剂盒:选择正规厂家生产的试剂盒,并注意保存条件和有效期。 避免交叉污染:在操作过程中要注意避免样品之间的交叉污染,使用干净的移液器和试管等器具。 对实验结果进行严格的解读和分析:根据凝集程度判断是否
哪些原因可致HBsAg检测出现假阳性?
哪些原因可致HBsAg检测出现假阳性?:乙型肝炎病毒HBsAg检测假阳性原因分析目前国内临床多采用ELISA 法检测乙型肝炎血清标志物,它以免疫学反应为基础,将抗原抗体的特异性反应与www.med126.com酶对底物的高效催化作用相结合,通过洗涤除去多余游离反应物,以保证实验结果特异性和稳定性,但
被指出具“假阳性”报告,和合诊断表示否认
据财经报道,针对合肥核酸检测实验室被指出具“假阳性”报告一事件,涉事公司和合诊断予以否认;和合诊断总经理刘志刚否认了自家实验室出具“假阳性”报告,其表示,2022年该实验室在合肥只碰到过两例阳性样本,后经确认均为确诊病例,“我们正在向政府进行申诉”;针对“严重超时”的指控,刘志刚认为,旗下实验室
elisa-法检测HIV为什么总是出现假阳性
造成ELISA检测HIV假阳性的原因主要有3个:1.试剂影响因素,可能与试剂盒包被抗原组合不同有关。目前第3代双抗原夹心法试剂的质量优于第2代间接法试剂,具有更好的敏感性和特异性,尤其对感染早期的弱阳性标本,主要包被的抗原的种类及比例,纯度有关系。2.患者自身情况的影响, 患者体内特有的内源件物质可
为何B型钠尿肽(BNP)检测出现假阳性?
案例经过 61岁的林大伯平时无烟酒嗜好,喜好散步。近4个月来,林大伯每于饭后自感胸闷,平时常感头晕。在省城大医院就诊时,查血压140/92mmHg,患者一般病史及临床检查都可,查血液心肌酶谱、肌钙蛋白I、血液生化和凝血指标均正常,仅D-二聚体轻度增高,甘油三酯(TG)195mg/dl。
注意:异嗜性抗体造成血hCG假阳性
所谓异嗜性抗体,就是指体内存在的可以识别动物抗体的抗体。尽管其在人体内并不会引起任何不适,但其却是免疫学检测的一块“心病”:因为其可以干扰很多免疫学检测过程,造成结果假阳性或假阴性。最近,Clinical Biochemistry就刊登了一则异嗜性抗体干扰HCG检测的病例,笔者进行了一些概括和总结,
为什么梅毒化验会出现假阳性呢?
梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种性病。感染梅毒后,人体内会产生两类抗体,一类是直接针对梅毒螺旋体的抗体,另一类则是针对类脂质的抗体。针对类脂质的抗体因不直接针对梅毒螺旋体,因此无特异性,除感染梅毒外,患另外一些疾病以及生理状况的改变,体内也可能产生低滴度的抗类脂质抗体。诊断梅毒时,所做的梅毒血清学检查