漫谈分子诊断技术50年(二)

二、核酸序列测定 测序反应是直接获得核酸序列信息的唯一技术手段,是分子诊断技术的一项重要分支。虽然分子杂交、分子构象变异或定量PCR技术在近几年已得到了长足的发展,但其对于核酸的鉴定都仅仅停留在间接推断的假设上,因此对基于特定基因序列检测的分子诊断,核酸测序仍是技术上的金标准。 (一)第1代测序 1975年Sanger与Coulson发表了使用加减法进行DNA序列测定的方法,随后Maxam在1977年提出了化学修饰降解法的模型,为核酸测序时代的来临拉开了序幕。 Sanger等[12]于同年提出的末端终止法(Sanger测序法)利用2'与3'不含羟基的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)进行测序引物延伸反应,ddNTP在DNA合成反应中不能形成磷酸二酯键,DNA合成反应便会终止。如果分别在4个独立的DNA合成反应体系中加入经核素标记的特定ddNTP,则可在合成反应后对产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacr......阅读全文

聚焦精准医疗之分子诊断技术

文章导读  分子诊断是精准医疗的技术基础,也是体外诊断增速最快的分支行业。近几年分子诊断产业以较快速度稳步增长。市场占有率还不高,处于行业成长初期,相对免疫诊断、生化诊断来讲,发展并不成熟,中国分子诊断行业年均增速达到25%。分子诊断简介  分子诊断技术是应用分子生物学如DNA、RNA和蛋白质等方法

漫谈热脱附技术(一)——何为热脱附技术

热脱附技术是指在真空条件下或通入载气时,通过直接或间接热交换,将土壤中的有机污染物加热到足够的温度,以使有机污染物从污染介质上得以挥发或分离,进入气体处理系统的过程。热脱附可通过调节加热温度和停留时间等方式有选择地将污染物从一相转化为另一相,在修复过程中并不出现对有机污染物的破坏作用。通过控制热脱附

分子蒸馏技术及应用推广(二)

  3设备类型   分子蒸馏技术自上世纪20年代问世以来,由于其分离机制和的分离效果而受到广泛重视。随着分子蒸馏技术应用领域的不断扩大,其设备尤其是分子蒸馏器也不断得到改进和完善。   (1)静止式分子蒸馏器   静止式分子蒸馏器是最早出现的一种简单、价廉的分子蒸馏设备。图1是一种典型的静止釜式分子

分子诊断3大技术分析:qPCR、二代测序NGS和数字PCR

分子诊断是将分子生物学技术应用于疾病诊断的医学分支学科,利用分子生物学技术研究人体内源性或外源性生物分子的存在、结构或表达调控变化,为疾病的预防、预测、诊断、治疗、预后和转归提供信息和决策依据。精准医疗的发展,将持续推动分子诊断的进步。目前常见核酸分子诊断技术涉及三个技术:荧光定量PCR技术(qPC

核酸分子诊断三大技术:qPCR、二代测序NGS和数字PCR

分子诊断是将分子生物学技术应用于疾病诊断的医学分支学科,利用分子生物学技术研究人体内源性或外源性生物分子的存在、结构或表达调控变化,为疾病的预防、预测、诊断、治疗、预后和转归提供信息和决策依据。精准医疗的发展,将持续推动分子诊断的进步。目前常见核酸分子诊断技术涉及三个技术:荧光定量PCR技术(qPC

分子诊断IVD设备的发展史(二)

托摩根核酸提取仪 MM96目前,现场分子诊断还存在诸多问题。免疫检测中可用试纸条等材料,检测方便,但是分子诊断没有这类材料可用,主要原因是样品前处理无法达到这种检测目的。当现场检测时,在很开放的环境下,如何提取纯化DNA,目前仍没有简易方法。现场检测的需求,目前在医院的临检中心还不大,对于基层的卫生

王大成院士漫谈生物大分子与生命现象

  郭桐兴:太精彩了!使整个人类产生一个革命性的变化,而且我们就身处在这个时代过程当中。请您给我们介绍一下目前生物大分子研究的前沿是什么。  王大成:大家知道,2000年6月,六国合作的人类基因组计划协作组在全球同时宣告:人类基因组的工作框架图已经绘制完成。以此为标志,在人类跨进历史新纪元之际,生命

细菌学诊断技术(二)

  5.核酸探针杂交技术原理  根据完成杂交反应所处介质的不同,分成固相杂交反应和液相杂交反应。固相杂交反应是在固相支持物上完成的杂交反应,如常见的印迹法和菌落杂交法。事先破碎细胞使之释放DNA/RNA然后把裂解获得的DNA/RNA固定在硝基纤维素薄膜上,再加标记探针杂交,依颜色变化确定结果,该法是

下一代分子诊断技术

自动化的高通量测序系统已经对生命科学研究产生了不可磨灭的影响。它们现在正准备革新分子诊断技术。CRISPR和下一代测序技术正在革新从传染病到早期癌症检测的分子诊断,这门科学可能引领什么?CRISPR基因编辑和下一代测序(next-generation sequencing, NGS)技术已经

分子诊断技术,先掌握这5种

据相关行业调研数据,截至日前,新型冠状病毒核酸检测试剂盒研发企业已超过120家,底层技术应用原理大都是以基因扩增技术打底。而这背后所折射出来的,其实就是分子诊断技术大家族。未来3-5年IVD行业最具发展潜力的产品线是什么?答案无疑是分子诊断。新型冠状病毒核酸检测试剂研发—分子诊断技术应用总的来讲,分

5大分子诊断技术解析

据相关行业调研数据,截至日前,新型冠状病毒核酸检测试剂盒研发企业已超过120家,底层技术应用原理大都是以基因扩增技术打底。而这背后所折射出来的,其实就是分子诊断技术大家族。未来3-5年IVD行业最具发展潜力的产品线是什么?答案无疑是分子诊断。新型冠状病毒核酸检测试剂研发—分子诊断技术应用总的来讲,分

一文读懂分子诊断常用技术

  基于分子构象的分子诊断技术  (一)变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)与单链构象多态性(single strand conformation polymorphism,SSCP)  1970~1980年间,Fischer等

分子诊断技术步入快速发展新时代

  21世纪的第一个10年是生命科学及其相关技术飞速发展的10年,以生物芯片为代表的一大批分子诊断技术日渐成熟,并正在以其巨大的优势和潜力成为保障人类健康最重要的生物技术之一。中国工程院医药卫生学部、中国医师协会检验医师分会、中华医学会检验分会等6月22日~24日在北京联合主办第一届

-BD携手Seegene开发多重分子诊断技术

  “我们非常高兴能与Seegene成为合作伙伴,把他们的创新ZL技术整合到我们的全自动化BD MAX™平台中,”BD全球副总裁兼诊断系统妇女健康业务总经理Doug White说道。“有了Seegene的多重试剂,一次试验能同时监测和识别各种类型的病原体,我们将继续扩展BD MAX™的技术组合。” 

漫谈北大发展与2011年院士增选(二)

  二、   回过头来看北大在本次院士增选中的成绩,6位当选院士当然可喜可贺。其实从本年伊始 ,北大就行显示了良好的态势:27位教授候选中国科学院院士,3位教授候选中国工程院 院士。无论是被提名人数或者是进入第二轮(中科院称为初步候选人)的人数都位居各 高校第一位。但鉴于北大历来在中科院院

一文读懂分子诊断技术、PCR技术、基因测序技术

  四、定量PCR(quantitative PCR,qPCR)  相比于其他分子诊断检测技术,qPCR具有2项优势,即核酸扩增和检测在同一个封闭体系中通过荧光信号进行,杜绝了PCR后开盖处理所带来扩增产物的污染;同时通过动态监测荧光信号,可对低拷贝模板进行定量。正是由于上述技术优势,qPCR已经成

分子诊断技术、PCR技术、基因测序技术的区别、原理(一)

分子诊断技术是指以DNA和RNA为诊断材料,用分子生物学技术通过检测基因的存在、缺陷或表达异常,从而对人体状态和疾病作出诊断的技术。其基本原理是检测DNA或RNA的结构是否变化、量的多少及表达功能是否异常,以确定受检者有无基因水平的异常变化,对疾病的预防、预测、诊断、治疗和预后具有重要意义。通俗简单

哈小克漫谈水质分析技术——夏日泳池检测

随着夏日似火骄阳,泳池成为了我们避暑消夏、锻炼身心的理想之地。然而,在享受泳池带来的乐趣之时,我们也不得不正视一个隐忧——泳池水中的尿素含量。尿素,主要来源于泳客的汗液、尿液等分泌物,其超标不仅会影响水质,还会与消毒剂中的氯反应生成氯胺,这种物质不仅带有刺激性气味,还可能对皮肤、眼睛及呼吸系统造成不

PCR技术应用二:-骨肿瘤诊断

  骨肿瘤较罕见,恶性骨肿瘤只占全身恶性肿瘤的1%,男多于女,性别比约为1.6 ∶1,均好发于10-30岁间,良性者以骨软骨瘤最多,依次为骨巨细胞瘤、内生软骨瘤 等,恶性者以骨肉瘤最多,依次为软骨肉瘤、纤维肉瘤等.骨恶性肿瘤的发生机理目 前认为是癌基因显性作用与抗癌基因失活的结果,是多种癌基因多阶段

分子生物学实验诊断技术

一、酸杂交技术检验方法建立的基本要素是特异性和灵敏度,在复杂的物体中,使无法感觉的特定物质进入人类的观察范围。核酸杂交检测技术就是利用核酸碱基严格配对的特异性,核酸标记物的灵敏度而建立的检测核酸结构与功能的方法。该法建立以来已有二十年,目前研究实验室用得多,临床实验室用得较少,除成本高外,关键是操作

一文读懂分子诊断常用技术(一)

分子诊断技术是指以DNA和RNA为诊断材料,用分子生物学技术通过检测基因的存在、缺陷或表达异常,从而对人体状态和疾病作出诊断的技术。其基本原理是检测DNA或RNA的结构是否变化、量的多少及表达功能是否异常,以确定受检者有无基因水平的异常变化,对疾病的预防、预测、诊断、治疗和预后具有重要意义。通俗简单

口蹄疫分子生物学诊断技术

近年来,由于分子生物学技术的迅速发展及其在FMD诊断中的应用,建立了各种FMD的分子生物学诊断技术,主要包括以下几种方法,核酸杂交、等电点聚焦电泳、寡核苷酸指纹图谱分析、聚丙烯酰胺凝胶电泳、聚合酶链式反应、单克隆抗体技术等。(1)核酸探针 核酸探针即应用FMD的cDNA克隆片段,用32P或生物素等标

5大类分子诊断技术全解析

随着基因组学、蛋白组学、代谢组学等新兴学科的发展,分子诊断的内涵已经从DNA/RNA拷贝、突变等检测,拓展到核酸与DNA片段、蛋白与多肽、抗原与抗体、受体与配体等生物大分子的检测。从目前市场分子诊断产品来看,基于核酸诊断技术的产品仍占主要。截止2019年3月,分子诊断产品获批数量达1197项。按照技

技术剖析|-分子诊断之争:LAMP-VS.-PCR

基于核酸扩增的分子诊断是通过引物介导特异性扩增目的基因以检测内源性(遗传或变异)或外源性(病原体)目的基因的存在与否,进而对疾病的诊断和治疗提供信息和决策依据。其主要的应用场景有传染病的诊断,血筛,肿瘤早期辅助诊断,肿瘤的分子分型,遗传病的诊断,产前诊断,组织分型等。其中在传染病的诊断和血筛方面,基

分子生物学实验诊断技术

一、酸杂交技术检验方法建立的基本要素是特异性和灵敏度,在复杂的物体中,使无法感觉的特定物质进入人类的观察范围。核酸杂交检测技术就是利用核酸碱基严格配对的特异性,核酸标记物的灵敏度而建立的检测核酸结构与功能的方法。该法建立以来已有二十年,目前研究实验室用得多,临床实验室用得较少,除成本高外,关键是操作

微流控技术助分子诊断大跨越

基于PCR的分子诊断是通过引物介导特异性扩增目的基因以检测内源性(遗传或变异)或外源性(病原体)目的基因的存在与否,进而对疾病的诊断和治疗提供信息和决策依据。其主要的应用场景有传染病的诊断,血筛,肿瘤早期辅助诊断,肿瘤的分子分型,遗传病的诊断,产前诊断,组织分型等。其中在传染病的诊断和血筛方面,基于

基因检测历史漫谈

基因检测历史漫谈 

细胞计数方法漫谈

“12345,上山打老虎”这是毛博小时候经常唱的一首童谣,也教会了我怎么数数字。这项技能很重要,多年以后毛博远渡重洋,在米国实验室打工的时候还要经常用到这项技能,那就是细胞计数吧。其实,细胞计数最关键的不是计数,而是计数活细胞。因为在那一大堆细胞里面,肯定有死有活的,只有活的才对我们的实验有意义,是

漫谈离子源

样品的离子化是进行质谱分析的重要步骤,如何高效地进行离子化对质谱仪的灵敏度、分辨率等有着重要的影响。 离子源是对样品进行电离的场所,离子源的主要功能是把中性的原子(或分子)电离成离子,并形成具有一定能量的离子束。不同的质谱仪根据分析用途的不同配备有不同的离子源,这些离子源由于电离方式不同,具有不同的