一文读懂分子诊断常用技术
分子诊断技术是指以DNA和RNA为诊断材料,用分子生物学技术通过检测基因的存在、缺陷或表达异常,从而对人体状态和疾病作出诊断的技术。其基本原理是检测DNA或RNA的结构是否变化、量的多少及表达功能是否异常,以确定受检者有无基因水平的异常变化,对疾病的预防、预测、诊断、治疗和预后具有重要意义。通俗简单的讲所有基于分子生物学水平的方法学技术都属于分子诊断技术,比如PCR技术、基因测序技术等等。 PCR技术即聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,基本原理类似于DNA的天然复制过程,由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:模板DNA的变性,模板DNA与引物的退火(复性),引物的延伸。重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。由1983年美国Mullis首先提出设想,......阅读全文
分子杂交——Southern基因检测
实验概要将待检测的DNA样品固定在固相载体上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号。通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度。该项技术广泛被应用在遗传病检测、DNA指纹分析和PCR产物判断等研究中。但由于该技
分子杂交——Northern基因检测
实验概要Northern杂交采用琼脂糖凝胶电泳,将分子量大小不同的RNA分离开来,随后将其原位转移至固相支持物(如尼龙膜、硝酸纤维膜等)上,再用放射性(或非放射性)标记的DNA或RNA探针,依据其同源性进行杂交,最后进行放射自显影(或化学显影),以目标RNA所在位置表示其分子量的大小,而其显影强度则
分子杂交——Southern基因检测2
C.转移按凝胶的大小剪裁NC膜或尼龙膜并剪去一角作为标记,水浸湿后,浸入转移液中5min。剪一张比膜稍宽的长条Whatman 3mm滤纸作为盐桥,再按凝胶的尺寸剪3-5张滤纸和大量的纸巾备用。按下图所示进行转移。( 转移过程一般需要8-24hr,每隔数hr换掉已经湿掉的纸巾。转移液用20×S
分子图谱检测和基因检测的区别
(1)细胞周期是指连续分裂的细胞,从一次分裂完成时开始到下次分裂完成时为止,即甲图中f~l;细胞周期包括分裂间期和分裂期,乙图中各细胞都处于分裂期,还缺少分裂间期的细胞.(2)核仁逐渐解体,核膜逐渐消失发生在前期,即甲图中的bc(hi)段,对应于乙图中的B图.(3)染色体数目加倍发生在后期,即乙图中
分子检测和基因检测有什么区别
分子检测和基因检测的区别具体如下:分子检测通过分子生物学和分子遗传学的技术,直接检测出分子结构水平和表达水平是否异常,从而对疾病做出判断。基因检测是通过血液、其他体液或细胞对DNA进行检测的技术,基因检测可以诊断疾病,也可以用于疾病风险的预测,疾病诊断是用基因检测技术检测引起遗传性疾病的突变基因,目
检测癌症分子“指纹”可改进早期诊断
《分子细胞》杂志11日发布了一项研究,指出不同类型的癌症拥有独特的分子“指纹”,这些特征可以在疾病早期被检测到。这项由巴塞罗那基因组调控中心进行的研究发现,利用小型便携式扫描仪只需几个小时,就能以极高的精度获取这些“指纹”,为开发新的非侵入性诊断测试铺平了道路。这种测试能够比现有方法更快、更早地识别
基因检测和基因诊断有什么区别
基因检测和基因诊断的区别如下:基因检测是通过血液、其他体液或细胞对DNA进行检测的技术,基因检测可以诊内断疾病,也可以用于疾病风险的容预测,疾病诊断是用基因检测技术检测引起遗传性疾病的突变基因,目前应用最广泛的基因检测是新生儿遗传性疾病的检测、遗传疾病的诊断和某些常见病的辅助诊断。基因诊断又称DNA
流感诊断“金标准”-分子检测取代病毒培养
宾夕法尼亚州大学儿科及病理学教授、费城儿童医院临床病毒科主任Richard L. Hodinka博士提出分子检测是流感诊断的“金标准”,理由是常用的流感快速诊断检测准确性极低,而较新型分子检测在灵敏度、特异性以及速度方面远远优于原有的金标准——病毒培养。 Hodinka博士指出,分子技术领域的
基因诊断的分子生物学基础(一)
基因诊断操作的对象为基因或其片段。基因是遗传学上的一个概念,是在染色体上占有一定的位置,表现一定功能的基本单位。基因的物质基础是脱氧核糖核酸(DNA)(有些病毒的基因是核糖核酸,RNA)。原核细胞(如细菌和病毒)的基因单位较小,其排布一般是连续的。真核细胞的基因一般较大,其排布是不连续的,它被称为插
基因诊断的分子生物学基础(二)
三、RNA分子结构 (一)RNA类型 细胞内含有三类主要的RNA,即核蛋白体RNA(Ribosomal RNA, rRNA)、转运RNA(Transfer RNA,tRNA)及信使(Messenger RNA,mRNA)。 1.rRNA。是核蛋白体的组成部分,含量最多,约占细胞内全部RNA
丹纳赫重视分子诊断市场-展出Veris分子诊断平台
2015年1月12日-15日,第33届JP摩根健康投融资大会在美国旧金山举行。大会上,各家公司都派出重量级阵营,公布上年度经营业绩,发布最新产品。 丹纳赫公司新任总裁兼CEO Thomas Joyce在大会上展示贝克曼库尔特公司最新的Veris分子诊断平台,该产品定于今年下半年在欧洲推向市场
一文读懂分子诊断技术、PCR技术、基因测序技术
四、定量PCR(quantitative PCR,qPCR) 相比于其他分子诊断检测技术,qPCR具有2项优势,即核酸扩增和检测在同一个封闭体系中通过荧光信号进行,杜绝了PCR后开盖处理所带来扩增产物的污染;同时通过动态监测荧光信号,可对低拷贝模板进行定量。正是由于上述技术优势,qPCR已经成
分子诊断技术、PCR技术、基因测序技术的区别、原理(二)
二、核酸序列测定 测序反应是直接获得核酸序列信息的唯一技术手段,是分子诊断技术的一项重要分支。虽然分子杂交、分子构象变异或定量PCR技术在近几年已得到了长足的发展,但其对于核酸的鉴定都仅仅停留在间接推断的假设上,因此对基于特定基因序列检测的分子诊断,核酸测序仍是技术上的金标准。 (一)第1代
分子诊断技术、PCR技术、基因测序技术的区别、原理(一)
分子诊断技术是指以DNA和RNA为诊断材料,用分子生物学技术通过检测基因的存在、缺陷或表达异常,从而对人体状态和疾病作出诊断的技术。其基本原理是检测DNA或RNA的结构是否变化、量的多少及表达功能是否异常,以确定受检者有无基因水平的异常变化,对疾病的预防、预测、诊断、治疗和预后具有重要意义。通俗简单
分子诊断设计思考
背景相比于药的研发周期长,体外诊断试剂盒更像是手游市场,是一个快速变革的红海市场。比如说从ibrutinib到Acalabrutinib,同一个靶点的二代产品要做完整个临床试验,证明安全性有效性才可以申请上市。而未来随着科学发展,某一天新的靶点与某种癌症的关系得到学界的共识,也许从试剂盒设计而言就是
分子诊断工具介绍
因分子技术具有内在准确性、敏感性、特异性和周转迅速的特点,带来了分子诊断行业的快速发展。此外,因为分子诊断技术具有准确性、敏感性和特异性,实验室人员能够从很小量的样本中就可获得有效的结果。这对法医检测领域来说是非常有用的,但同时该技术也可以检测到目标物质的极低浓度,从而使临床医生在极早期阶段就能检测
带分子诊断“下乡”
传统分子诊断因仪器精密、价格昂贵、对中央实验室要求高而只限于高等医院,优思达正努力将其带入偏远村庄。 在今年“创新中国DEMO CHINA”医疗健康专场中,最耀眼的莫过于在专场总决赛拔得头筹的杭州优思达生物技术有限公司(下简称“优思达”)了。这是一家研发、生产快速分子诊断试剂和设备的高
分子诊断发展简史
沃森和克里克提出DNA双螺旋结构,“生命之谜”被打开,经过PCR技术、生物芯片技术、DNA测序技术之后分子诊断正在快速成为人类疾病诊断的最有效方式之一。分子诊断发展四阶段第一阶段:利用分子杂交技术进行遗传病基因诊断:通过婴儿胚胎期进行产前诊断,超早期预知某些疾病发生、发展和预后。1978年著名没计划
HIV的分子诊断
确定病毒载量的分子技术的发展和基因型耐药性的发展,使HIV病治疗发生了根本的改变。商业上可获得的病毒载量检测技术有许多,从逆转录PCR到分支链DNA扩增等不同方法。这些检测的局限性在于没有一个国际标准来比较不同方法测定的病毒载量,以及由于HIV的不同分化枝的差异性引起某些患者样本检出低下或未被检出。
肿瘤分子诊断概述
二十一世纪的今天,恶性肿瘤仍然是严重危害人类生命健康的重大疾病。从世界范围内看,肿瘤的发生、发展不容乐观。随着人口逐渐老龄化、吸烟、感染、环境污染、膳食结构等问题的存在,肿瘤诊断所面临的形势极为严峻。一、肿瘤生物标志物的发现肿瘤发生、发展的有迹可循,促使人们投放了更多的精力于发现新标志物。自从184
什么是分子诊断
分子诊断:应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出诊断的技术,称为分子诊断。分子诊断是预测诊断的主要方法,既可以进行个体遗传病的诊断,也可以进行产前诊断。分子诊断的材料包括DNA、RNA和蛋白质。分子诊断主要是指编码与疾病相关的各种结构蛋白、酶、抗原抗体、免疫活性分子基因的
幽门螺杆菌抗生素耐药基因的分子检测及分子对接分析
Abstract 摘要Aim: To explore the mutation characteristics of H. pylori resistance-related genes to antibiotics of clarithromycin (CAM), levofloxaci
基因诊断
医生需要综合患者的病史,症状,及各种检查的结果作出临床诊断。随着人们对疾病的病因及发病机理的认识的不断深入,临床检查的手段也在不断进步。目前看来,绝大多数疾病的发生,发展都与患者遗传背景或者其改变有关,所以临床上越来越有必要检查这种变化。这种用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的水平或结构变化而
食品检测转基因成分及分子生物学检测
转基因成分及分子生物学检测随着人民生活水平的提高,食品中的转基因成分渐渐移入大众视野,越来越多地引起了人们的关注。项目名称检测内容食品中转基因植物成分水稻抗虫转Bt基因,大豆转基因成分,主要食用菌中转基因成分,小麦转基因成分,玉米转基因成分,油菜籽转基因成分,芹菜转基因成分动物性成分检测动物性成分(
布鲁克收购传染病分子诊断公司Hain-扩展分子诊断产品
分析测试百科网讯 近日,布鲁克表示已签署最终协议,获得传染病分子诊断公司Hain Lifescience的多数股权。据布鲁克表示,总部位于德国的Hain将增加结核病和分枝杆菌,以及病毒学和人类遗传学的能力检测。 布鲁克计划收购Hain的80%股权,其余20%的股权可以在2021年之后行使。布鲁
转基因植物的分子检测与鉴定方法(四)
4.2 试纸条技术与ELISA原理相似,不同之处是以硝化纤维膜代替聚苯乙烯反应板为固相载体。先将特异性抗体吸附在膜上,将膜放入混有样品的溶液中,蛋白质随着液相扩散,遇到抗体,发生抗原-抗体反应,通过阴性对照筛选阳性结果,并给出转基因成份含量的大致范围。试纸条方法是一种快速简便的定性检测方法,将试纸条
转基因植物的分子检测与鉴定方法(二)
1.1.2.2 降落PCRTD-PCR是一种在一个反应管或少数几个反应管中通过一系列退火温度逐渐降低的反应循环来达到最佳扩增目的基因的PCR方案。它通过体系自身的代偿功能弥补以反应体系和并非完美的循环参数所造成的不足。此策略保证了最初形成的引物模板杂交体具最强的特异性。尽管最后一些循环采用的退火温
转基因植物的分子检测与鉴定方法(三)
3 转基因植株外源基因表达情况的检测与鉴定尽管在mRNA水平也能一定程度地研究外源基因的表达,但存在mRNA在细胞质中被特异性地降解等情况,mRNA与表达蛋白质的相关性不高(相关系数低于0.5),基因表达的中间产物mRNA水平的研究并不能取代基因最终表达产物的研究。转基因植株外源基因表达的产物一般
转基因植物的分子检测与鉴定方法(一)
随着分子生物学和植物基因工程的不断发展,越来越多的育种工作者开始利用转基因技术获得常规育种技术难以得到的新种质和新品种。植物转基因技术最大的好处在于可以打破自然界物种间原有的生殖隔离,促进基因在不同物种间的交流,极大地丰富变异类型,增大遗传多样性,为植物新品种的培育提供丰富的育种资源。通过对基因功能
BRAF突变检测成为新型PCR分子诊断系统的关键
一种基于PCR的全自动实时分子诊断系统和一种识别BRAF致癌基因所致癌症的专用试剂盒最近通过了欧洲的CE标志认证。比利时梅赫伦的Biocartis公司最近发布的Idylla仪器是该公司旗舰分子诊断系统的主打产品。发布Idylla的同时还发布了Idylla BRAF突变检验,用以检测BRAF致癌基因的