GFP与YFP有哪些区别
YFP和GFP其实是序列基本相同的两种蛋白，YFP就是把Thr203以Tyr取代，GFP则不发出绿色荧光，而发出较长波长的黄色荧光，也就是YFP。因此两者最大的区别则是发射波长了。我觉得这两种蛋白标记应该都没有问题，只是有几个问题应该考虑：1. 应该标记在C端，一般的核定位序列均位于蛋白N端，如果将GFP或者YFP标记在N端很可能影响核定位；2. 取决于你的核探针，如果是红色的探针，选用GFP比较经典，两者叠合的橙色也是很多文献上常采用的。但如果是蓝色的探针，则选用黄色比较容易区分一点，比较好看，不过做这个的好像也不太多。最后还有一点就是GFP的质粒比较多，很多还有EGFP序列，比如我们实验室的EGFP荧光就非常好看，所以我还是建议你选经典的GFP\EGFP。祝实验顺利。......阅读全文
yfp激发光波长和YFP的发射波长是多少？
YFP激发波长为510nm，更大发射波长为527 nm黄色荧光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做GFP.html' target='_blank' title='绿色荧光蛋白' >绿色荧光蛋白的一种突变体，最初来源于
GFP与YFP有哪些区别
YFP和GFP其实是序列基本相同的两种蛋白，YFP就是把Thr203以Tyr取代，GFP则不发出绿色荧光，而发出较长波长的黄色荧光，也就是YFP。因此两者最大的区别则是发射波长了。我觉得这两种蛋白标记应该都没有问题，只是有几个问题应该考虑：1. 应该标记在C端，一般的核定位序列均位于蛋白N端，如果将
GFP与YFP有哪些区别
YFP和GFP其实是序列基本相同的两种蛋白，YFP就是把Thr203以Tyr取代，GFP则不发出绿色荧光，而发出较长波长的黄色荧光，也就是YFP。因此两者最大的区别则是发射波长了。我觉得这两种蛋白标记应该都没有问题，只是有几个问题应该考虑：1. 应该标记在C端，一般的核定位序列均位于蛋白N端，如果将
GFP抗体|GFP抗体检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP抗体
检测GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP的GFP抗体GFP是绿色萤光蛋白（Green Fluorescent Protein）的简称，由238个氨基酸残基组成。GFP蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质，在蓝色波长范
荧光共振能量转移（FRET）
一、活细胞研究遇到的问题：蛋白质或其他分子在活细胞内互相结合的时间和地点是了解它们功能的关键问题。要回答这一问题，需将蛋白质标上不同的荧光团。但是，光学显微镜的分辨率将蛋白质检测精度限制在大约0.2μm左右。要研究蛋白质成分的相互物理作用，需要高的分辨率。二、什么是FRET？FRET就是采用非放射方
细胞共定位
实验概要本实验子在构建了中间载体pA7-CFP和pA7-YFP的基础上，构建了pA7- CFP- AtCOP1，pA7-AtCRY1-YFP，pA7- CFP-OsCOPl和pA7-OsCRY1b-YFP载体。利用基因枪将重组质粒轰击入洋葱内表皮。主要试剂高保真聚合酶(pfu ultra)，限制性内
细胞共定位
实验试剂 高保真聚合酶(pfu ultra)，限制性内切酶(XhoI、SpeI、BamHI、SpeI、SacI)，金粉，无水乙醇，2.5MCaCl2 ，20ul 0.1M亚精胺实验设备 PCR扩增仪，PDS-1000/He型基因枪，激光共聚焦显微镜(Carl Zeiss LSM 510 )实验材料
生物大分子相互作用检测技术新进展
荧光共振能量转移 (fluorescence resonance energy transfer，FRET)，是指能量从一种受激发的荧光基团 (fluorophore)以非辐射的方式转移到另一种荧光基团的物理现象。FRET的能量转移效率是两个荧光基团间距离的函数，并对此距离十分敏感，它的有效
方案8－用－FRET－法分析体内蛋白质的相互作用实验
实验材料a-GFP 抗体编码 CFP 和 YFP 的 DNA酵母细胞株系试剂、试剂盒分子生物学试剂合成的完全液体培养基酵母操作试剂编码目标内源蛋白的 DNA 片段仪器、耗材滤光镜装置图像分析软件显微镜设备分子生物学和酵母操作用的标准设备实验步骤一、实验设计因为体内 FRET 实验的复杂性，要获得有效
何为荧光共振能量转移技术
一、FRET技术基本原理荧光共振能量转移是指两个荧光发色基团在足够靠近时，当供体分子吸收一定频率的光子后被激发到更高的电子能态，在该电子回到基态前，通过偶极子相互作用，实现了能量向邻近的受体分子转移（即发生能量共振转移）。FRET是一种非辐射能量跃迁，通过分子间的电偶极相互作用，将供体激发态能量转移
exFoxp3－Th17细胞对自身免疫关节炎的作用机制研究（一）
“我是谁?我从哪里来?我要到哪里去？” 是柏拉图提出的经典哲学三大问，小编每天早上起床前都要用这个问题叫醒我沉睡的灵魂。在本期带来的经典文献回顾中，请跟随本文作者一起听一听ex Foxp3 TH17细胞的深刻哲学独白吧！一、故事背景自身免疫性疾病通常由调节性T细胞（Treg细胞）和产生干扰素17的辅
采用PCR技术插人表位标记物
许多表达载体可能没有能够克隆标记物的合适的限制性酶切位点。在这种情况下，采用PCR技术将多肽标记物插入到已经克隆化的开放阅读框。在设计PCR正向和反向引物时，可引入较长的片段以在蛋白的氨基或羧基末端引入多肽标记物。，选择用于编码标记物特定氨基酸的密码子，使其能够用于表达标记蛋白的生物系统中。引
关于黄色荧光蛋白的基本介绍
黄色荧光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做绿色荧光蛋白的一种突变体，最初来源于维多利亚多管水母（ Aequorea victoria）。相对于绿色荧光蛋白，其荧光向红色光谱偏移，而这主要是由于蛋白203位苏氨酸变为酪氨酸。其最大激发波长为514 nm，
正置荧光显微镜的技术指标
1全电动正置荧光显微镜。具有明场,暗场,荧光,DIC观察附件2卤素灯透射光照明,长效荧光光源3物镜5个,荧光物镜5X,平场复消色差10X0.45，20X0.8，40X1.2水镜，100X1.4油镜,目镜10X234滤光片8套dapi，CFP YFP GFP RFP cy3 cy5,cfp-yfp
双色同步成像在荧光共定位等成像实验中的应用（二）
双色同步成像——一台Flash 4.0 LT相机作两台用 采用W-View GEMINI这样的双色分光附件将两种颜色的信号成像到一台相机的一个感光芯片上很好地解决了同步成像的时间问题，但对于绝大多数的相机，整个感光芯片只能设置一个曝光时间，当两个颜色的信号强度相差较大时将很难同时将两个颜色的成像信噪
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂实验
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂 实验材料 PRSETB 细菌表达质粒 HeLa 细胞株
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂实验
实验材料 PRSETB 细菌表达质粒HeLa 细胞株试剂、试剂盒 苯甲基横酰基氟化物EGTA 缓冲液氯化钙缓冲液仪器、耗材 超声发生器荧光光谱仪实验步骤 本文中描述的方法涵盖了变色子在细菌及真核细胞里的克隆与表达（见 4.3.1 )，变色子的生物化学和生物物理特征鉴定（见 4.3.2 )，以及通过
基于钙调素与荧光蛋白融合的钙指示剂实验
钙调素（CaM) 是普遍分布的蛋白质，参与钙介入的信号转导。当 Ca2+ 流入时，CaM 获得强亲和力，结合各种带有一个或多个CaM 识别序列的胞内蛋白，启动或终止 Ca2+ 调控的信号串联。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。实验材料PRSETB 细菌表达质
竞争性分析Epitope－Mapping实验方法
ABSTRACTThe simplest way to determine whether two monoclonal antibodies bind to distinct sites on a protein antigen is to carry out a competition assa
黄色荧光蛋白的概念
黄色荧光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做绿色荧光蛋白的一种突变体，最初来源于维多利亚多管水母（ Aequorea victoria）。相对于绿色荧光蛋白，其荧光向红色光谱偏移，而这主要是由于蛋白203位苏氨酸变为酪氨酸。其最大激发波长为514 nm，最大
黄色荧光蛋白的结构和功能特点
黄色荧光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做绿色荧光蛋白的一种突变体，最初来源于维多利亚多管水母（ Aequorea victoria）。相对于绿色荧光蛋白，其荧光向红色光谱偏移，而这主要是由于蛋白203位苏氨酸变为酪氨酸。其最大激发波长为514 nm，最大
研究发现小鼠卵巢内存在雌性生殖干细胞
中科院昆明动物研究所郑萍课题组采用了体内细胞示踪技术，提供了支持生理条件下哺乳动物卵巢中存在生殖干细胞的活动及卵细胞再生的首个体内证据。研究成果近日在线发表于《分子人类生殖学》。 经典理论认为哺乳动物出生时卵巢已形成了终生所需的原始卵泡，出生后没有卵细胞的再生。然而，近来一些研究对经典理论提出
黄色荧光蛋白的应用
像绿色荧光蛋白一样，YFP是细胞生物学和分子生物学中一种非常常用的报告基因。目前，有三种改良的黄色荧光蛋白： Citrine, Venus, and Ypet。这三种改良的蛋白荧光更亮，更稳定，而且成熟更快，因此应用广泛。黄色荧光蛋白最常用于荧光共振能量转移，作为荧光能量的接受体（acceptor）
植物多光谱荧光成像系统的广泛应用
植物多光谱荧光成像系统可用于叶绿素荧光动态成像分析、多激发光光合效率成像分析、紫外光激发多光谱荧光成像分析、PAR吸收与NDVI（植物光谱反射指数）成像分析、GFP/YFP稳态荧光成像等，全面、非接触、高灵敏度反映植物生理生态、胁迫生理与抗性、光合效率等。Fluorcam植物多光谱荧光成像系统广
植物多光谱荧光成像系统多激发光、多光谱荧光成像技术
多激发光、多光谱荧光成像技术：通过光学滤波器技术，仅使特定波长的光（激发光）到达样品以激发荧光，同时仅使特定波长的激发荧光到达检测器。不同的荧光发色团（如叶绿素或GFP绿色荧光蛋白等）对不同波长的激发光“敏感”并吸收后激发出不同波长的荧光，根据此原理可以选配2个或2个以上的激发光源、滤波轮及相应
LVF光栅在FRET和BRET分析中的优异表现
在多功能酶标仪中，为了分离某一特定波长的单色光我们有两种技术选择——滤光片或者光栅。与光栅相比，滤光片系统往往具有更好的灵敏度，因为滤光片具有更好的透光率和更宽的带宽。而光栅系统的好处是可以提供波长选择的灵活性，不需要购买或安装特定波长的滤光片。尽管如此，很多用户都发现许多应用在光栅系统上达不到理想
exFoxp3－Th17细胞对自身免疫关节炎的作用机制研究
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FluorCam多光谱荧光成像技术介绍
FluorCam多光谱荧光成像系统作为FluorCam叶绿素荧光成像系统的最高级型号，是目前唯一有能力实现了一台仪器上同时完成叶绿素荧光、UV-MCF多光谱荧光、NDVI归一化植被指数以及GFP、YFP、BFP、RFP、CFP、DAPI等荧光蛋白与荧光染料的成像分析功能。同时也可以加装RGB真彩成像
亚细胞定位用荧光显微镜能看到吗
目前进行亚细胞定位研究，提取拟南芥(Arabidopsis thaliana)(Arabidopsis thaliana)叶肉原生质体进行PEG转化。研究目标采用GFP/YFP融合蛋白，但是在LSM710观察时，叶绿体有很明显的背景，尽管有些细胞是明显看到了GFP荧光，远远强于叶绿体背景，但是拍的照
Yeast基因文库的分类和选择
文库种类Dharmacon酵母资源包括多个酵母基因组文库，包括ORF文库、基因敲除（Knock Out）菌株、蛋白质相互作用文库、突变菌株和各种筛选文库等。除此之外，Dharmacon 针对Saccharomyces cerevisiae 研究领域提供了Zoonome siRNA 文库。酵母