有了ripa裂解液怎么提取蛋白
不太推荐从提取蛋白自身的角度来考虑,ripa裂解液可以使蛋白质的空间结构破坏,即破坏蛋白质分子的二级和三级结构,从而使抗原决定簇得以充分暴露在外,更有利于被检测出来;而从试剂盒本身的角度来考虑,以双抗体夹心法为例,提取的蛋白中含有ripa裂解液,当加入到包被的孔板当中时,可能同样会对孔板中的包被的抗体起到了裂解作用(如sds),从而使其失去该有的特异性,这方面可能需要考虑在内的......阅读全文
碱裂解法提取质粒DNA
实验概要本实验介绍了碱裂解法提取质粒DNA的实验原理和操作步骤。实验原理碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法,碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH值高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大
碱裂解法提取质粒DNA
实验目的1、掌握最常用的提取质粒DNA的方法和检测方法;2、了解制备原理及各种试剂的作用。实验原理碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,复性的为质粒DNA,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物质,通过离心除去。细菌质粒是一类双链、闭环
Co-IP-Protocol2
Protocol1 调制protein A sapharoseprotein A sapharose 5ml 溶于20ml含0.02%NaN3的PBS离心2000转2分,去上清,在沉淀加0.02%NaN3的PBS,离心后去上清,重复2次,最后沉淀加20ml含0.02%NaN3的PBS,冷藏保存用单抗
免疫沉淀的培养细胞的裂解实验_悬浮生长的细胞的裂解
实验材料细胞实验步骤①细胞在480g的离心力条件下离心10min,弃去上清。②用冷PBS洗细胞两次,然后将洗过的细胞置于冰上。③重新悬浮沉淀,使1.0ml裂解液(冷却到4℃)中含大约1X107〜5X107个细胞。④冰上孵育细胞15min,并不时地振动小管。⑤4℃条件下20000g离心裂解液10min
Western-Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)6
YY. 加甲醇的目的是什么?解答:加甲醇起着一定的固定作用,因为小分子蛋白质容易转出去.(特别是在硝酸纤维素膜上,因为NC膜结合蛋白质的能力较弱)。ZZ. “转膜后的脱脂奶粉封闭液是5%的TBST脱脂奶粉”,其中TBST最后那个T是Tween吗,浓度多大?解答:是Tween,配方如下:Tris-Bu
煮沸裂解法制备质粒DNA实验——煮沸裂解法大量制备质粒DNA
实验方法原理经 Triton X-100、溶菌酶和加热处理可从大量(500 ml ) 细菌培养物中分离质粒 DNA,所获得的质粒通过柱层析或 CsCl-溴化乙锭梯度离心可进一步纯化。试剂、试剂盒抗生素乙醇异丙醇乙酸钠STETTE溶菌酶仪器、耗材LB、YT 或 Terrific 培养液沸水浴实验步骤一
煮沸裂解法制备质粒DNA实验——煮沸裂解法小量制备质粒DNA
这个方法 [ 根据 Holmes 和 Quigley 的方法(1981) 修订而成 ] 是将细菌悬浮于含有 Triton X-100 和能消化细胞壁的溶菌酶的缓冲液中,然后加热到 100℃ 使其裂解。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等实验方法原理经 Triton X-100、溶菌酶和加热处
利用-TSQ-Quantiva-定量肉类掺假比例(一)
引言“挂羊头,卖狗肉”是日常用的一个熟语。虽然随着时间的发展,这句话已经难以反应最真实的情况,在世界上大部分地方,狗已经不作为食用肉的来源,即使在极少数食狗肉的地方,狗肉的价格也往往比羊肉还高,已经失去了造假的意义。但是,这种商品标识与实际商品的组成不一致的情况,却是长期存在的。自从 2013
用于激酶分析的细胞裂解实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 培养
用于激酶分析的细胞裂解实验
实验材料培养细胞(贴壁贴壁细胞在100 mm 组织培养板中约 70% 生长成片/悬浮细胞浓度 为 10^6 细胞/ml)试剂、试剂盒PBS裂解缓冲液蛋白酶抑制剂储存液仪器、耗材微量离心机实验步骤1. 用预冷的 PBS 洗细胞 2 次,将最后的洗液尽可能吸尽。2. 加入 0.75 ml 裂解缓冲液重悬
琼脂板上裂解性感染实验
实验材料 λgtll 噬菌体重组体 E.coli Y1090 hsdR 菌株 试剂、试剂盒 对照覆盖溶液
研究探索太空光驱动水裂解
一项研究展示了在接近零重力的情况下,光可以驱动水裂解产生氢气和氧气。该研究成果或能应用于长期航天飞行,其间可利用水生产设备需要的燃料和可呼吸的氧气。相关成果近日发表于《自然—通讯》。 植物能够将光和水转化为燃料和氧气。科学家希望模仿和改进这种自然过程,通过人工光合作用大规模利用可再生能源。虽然
琼脂板上裂解性感染实验
λ噬菌体重组体编码的融合蛋白可通过大肠杆菌株 Y1089 溶源化菌落来制备。但从大量单个噬菌斑制备溶源菌工作量大,且并不一定每次成功(Huynh et al.1985)。另外,裂解性噬菌体感染可通过软琼脂(本方案)或液体培养(方案 9) 获得。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕
钙调蛋白的溴化氰裂解实验
试剂、试剂盒甲酸纯的钙调蛋白溴化氰乙腈实验步骤材料甲酸(市售最髙级(如AldrichChemicalCo.,Inc.)纯的钙调蛋白(干粉;无盐(0.1~1 mg)溴化氰(CNBr)(晶体)(如AldrichChemicalCo.,Inc.)乙腈(如Burdick&Jackson或J,T.Baker)
热裂解仪表面异物分析方法
异物分析从分析方法上主要涉及以下步骤: 1、表面观察:主要采用光学显微镜观察(OM)观察异物在表面还是嵌入在基体材料内。 2、异物物质种类判断:主要采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)、显微红外(M)判断异物主要是有机物还是无机物。 3、有机物分析手段:可能涉及Py-GCMS、萃取GC-M
热裂解器的特点和分类
裂解器是热裂解气相色谱仪的关键部件,有管式炉裂解器、热丝裂解器和居里点裂解器等。1、管式炉裂解器:管式炉裂解器通常由一个外壁加热的石英管制成,采用电热丝加热,裂解温度在300~1000℃,恒温精度高。当炉温达到设定温度时,将样品置于铂金小舟内,用推杆将铂金小舟送人裂解炉,样品不与管壁接触。管式炉裂解
化学错配裂解的原理和特点
中文名称化学错配裂解英文名称chemical mismatch cleavage;CMC定 义一种测定基因突变的方法。即将同位素标记的野生型DNA分子和突变型DNA或RNA片段混合变性,复性时可形成DNA-DNA或DNA-RNA异源双链、化学修饰突变部位的错配碱基、氮杂环己烷裂解被修饰的DNA片段
用于激酶分析的细胞裂解实验
实验方法原理 实验材料 培养细胞(贴壁贴壁细胞在100 mm 组织培养板中约 70% 生长成片/悬浮细胞浓度 为 10^6 细胞/ml)试剂、试剂盒 PBS裂解缓冲液蛋白酶抑制剂储存液仪器、耗材 微量离心机实验步骤 1. 用预冷的 PBS 洗细胞 2 次,将最后的洗液尽可能吸尽。2. 加入 0.
自动进样热裂解器
自动进样热裂解器是一种用于能源科学技术领域的分析仪器,于2014年9月28日启用。 技术指标 裂解温度:1-1400℃;裂解时间:0.01s-999.99s;加热速率:0.01℃/ms-20.00℃/ms;接口温度:1-350℃。 主要功能 通过一个裹有加热丝的加热腔体接至气相色谱等,对
裂化和裂解有什么区别
一种使烃类分子分裂为几个较小分子的反应过程。烃类分子可能在碳-碳键、碳-氢键、无机原子与碳或氢原子之间的键处分裂。在工业裂化过程中,主要发生的是前两类分裂。在中国,习惯上把从重质油生产汽油和柴油的过程称为裂化;而把从轻质油生产小分子烯烃和芳香烃的过程称为裂解。
裂解气相色谱法
裂解气相色谱法 pyrolysis gas chromatography PyGC 又称热解气相色谱法。裂解气相色谱法多用于分子量大、难挥发物质的分析。方法原理是:当样品在严格控制的操作条件下迅速加热时,它遵循一定的规律裂解,得到可挥发的小分子产物,然后进入色谱柱和检测器进行分离、检测和记录谱图。每
热裂解仪的技术指标
热裂解仪是一种用于化学领域的分析仪器,于2015年11月06日启用。 技术指标 1、脉冲裂解:指单次裂解。灯丝温度:可编程的1℃-1400℃,加热速率:0.01-20.0℃/ms(10-20,000℃/s);2、程序裂解:指多次脉冲裂解。温度由低到高进行裂解,无需再次进样,GC能够启动;3、
流感病毒裂解疫苗的简介
流感病毒裂解疫苗,适应症为用于成人和6个月以上儿童预防流感。 每0.5 ml疫苗含以下病毒株的纯化抗原: A3型流行性感冒病毒裂解血凝素抗原15 μg [2012/2013年度:甲/维多利亚/361/2011 (H3N2)-类似株; 甲/维多利亚/361/2011 (IVR-165)]
热裂解器的特点和分类
热裂解器是热裂解气相色谱仪的关键部件,有管式炉裂解器、热丝裂解器和居里点裂解器等。 1、管式炉裂解器:管式炉裂解器通常由一个外壁加热的石英管制成,采用电热丝加热,裂解温度在300~1000℃,恒温精度高。当炉温达到设定温度时,将样品置于铂金小舟内,用推杆将铂金小舟送人裂解炉,样品不与管壁接触。管式炉
超声波细胞裂解器原理
超声波细胞粉碎仪的原理并并不是太神密、太繁杂。简易说就是说将电磁能根据超声波换能器变换为声音,这类动能根据液體介质而变为一个个聚集的气泡,这种气泡快速爆裂,造成的强大的动能,进而具有粉碎体细胞等化学物质的功效。 超声波裂解是化学物质介质中的一种延展性机械波,它是一种起伏方式,因而它能够用以检测
SDS裂解法提取质粒DNA实验
实验方法原理 这种温和的方法(改进自 Godson and Vapnek 1973 ) 在处理大质粒(>15 kb ) 时较碱裂解法和煮沸法好。但温和的代价是产量低:有相当数量的质粒 DNA 混于细胞渣滓中,在操作的早期步骤中丢失。试剂、试剂盒 抗生素氯霉素氯仿EDTA乙醇NaClSDSSTETri
钙调蛋白的溴化氰裂解实验
试剂、试剂盒 甲酸纯的钙调蛋白 溴化氰乙腈实验步骤 材料甲酸(市售最髙级(如AldrichChemicalCo.,Inc.)纯的钙调蛋白(干粉;无盐(0.1~1 mg)溴化氰(CNBr)(晶体)(如AldrichChemicalCo.,Inc.)乙腈(如Burdick&Jackson或J,T.Bak
SDS裂解法提取质粒DNA实验
这种温和的方法(改进自 Godson and Vapnek 1973 ) 在处理大质粒(>15 kb ) 时较碱裂解法和煮沸法好。但温和的代价是产量低:有相当数量的质粒 DNA 混于细胞渣滓中,在操作的早期步骤中丢失。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理这种温和的方法(改进自
SDS裂解法提取质粒DNA实验
实验方法原理 这种温和的方法(改进自 Godson and Vapnek 1973 ) 在处理大质粒(>15 kb ) 时较碱裂解法和煮沸法好。但温和的代价是产量低:有相当数量的质粒 DNA 混于细胞渣滓中,在操作的早期步骤中丢失。
苯的制备方法介绍蒸汽裂解
蒸汽裂解是由乙烷、丙烷或丁烷等低分子烷烃以及石脑油、重柴油等石油组份生产烯烃的一种过程。其副产物之一裂解汽油富含苯,可以分馏出苯及其他各种成分。裂解汽油也可以与其他烃类混合作为汽油的添加剂。裂解汽油中苯大约有40-60%,同时还含有二烯烃以及苯乙烯等其他不饱和组份,这些杂质在贮存过程中易进一步反应生