wb电泳什么时候换电压

SDS-PAGE跑电泳时,跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的.具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严.我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可......阅读全文

wb电泳时电流多少正常

看电泳槽多大,两电极直接的距离,每cm 3~5V。例如一个20cm的电泳槽,电压就应该设为60~100V间。电压大,速度就快。还要考虑DNA长度,小片段DNA适宜用比较低的电压。DNA分子提取得到以后,需要通过电泳技术来检测其数量和质量。自从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶被引入核酸研究以来,按相对分子质量大

WB电泳槽不能漏水吗

不能漏水。玻璃板侧方或下方不小心因磕碰受损,这样玻璃板受损处则不再平整,液体会从这些部位漏出。这种情况下只能更换玻璃板,而很多垂直槽的玻璃板和边条压片是粘在一起的,这种情况则需要一起更换。有时由于清洗不到位,边条压片表面会有污物凸起,也会导致两侧不能密闭夹紧而漏胶。电泳槽是凝胶电泳系统的核心部分,其

wb电泳什么时候换电压

SDS-PAGE跑电泳时,跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的.具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严.我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可

wb电泳什么时候换电压

SDS-PAGE跑电泳时,跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的.具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严.我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可

wb电泳什么时候换电压

SDS-PAGE跑电泳时,跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的.具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严.我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可

wb电泳什么时候换电压

SDS-PAGE跑电泳时,跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的.具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严.我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可

wb电泳为什么不在一条线上

wb电泳不在一条线上的原因:1、样本本身含有高盐。2、积层胶长度不足,一般样品1-2cm足矣。但是如果样本含有高盐可以考虑将积层胶加长到4cm左右。3、缓冲液需要更换。使用多次的Buffer缓冲能力会大打折扣,如果样品珍贵难得推荐用新鲜配制电泳缓冲液,反之用3次就丢弃。4、上样量有关。5、电压不要太

WB电泳浓缩胶没压成一条线

第一、样本本身含有高盐。第二、积层胶长度不足,一般样品1-2cm足矣。但是如果样本含有高盐可以考虑将积层胶加长到4cm左右。第三、缓冲液需要更换。使用多次的Buffer缓冲能力会大打折扣,如果样品珍贵难得推荐用新鲜配制电泳缓冲液,反之用3次就丢弃吧!第四、上样量有关。dxylark已经叙述。第五、电

WB显影要多久

每个显影试剂盒都不一样,建议看说明书。实际情况视荧光强度而定,你看显出一点儿样子了,就赶紧捞出来,不然片子就太黑了。在加荧光剂后,反应大概一到四分钟。小心把膜放到暗盒里,放好后再也不要移动膜,否则荧光会消失。膜上覆盖一张保鲜膜,小心,铺展。将准备好的胶片放在膜上,放上去后也不要再移动了。然后压片。可

WB操作规程

一、设备和试剂1.设备① 电泳电源Mini-PROTEAN 3 Elecreophoresis Cell,Mini Teans-Blot Module,and PowerPac Basic Power Supply (BIO-RAD,Catalog#165-3323)② 电泳仪及附件Mini-PRO

WB显影要多久

每个显影试剂盒都不一样,建议看说明书。实际情况视荧光强度而定,你看显出一点儿样子了,就赶紧捞出来,不然片子就太黑了。在加荧光剂后,反应大概一到四分钟。小心把膜放到暗盒里,放好后再也不要移动膜,否则荧光会消失。膜上覆盖一张保鲜膜,小心,铺展。将准备好的胶片放在膜上,放上去后也不要再移动了。然后压片。可

WB实验问题总结

答:原因有很多:a) 你的细胞中不表达这种蛋白质,换一种细胞;b) 你的细胞中的蛋白质被降解掉了,你必需加入PMSF,抑制蛋白酶活性;c) 你的抗体不能识别目标蛋白,多看看说明,看是否有问题。答:a) 有沉淀可能因为你的蛋白没有变性完全,可以适当提高SDS 浓度,同时将样品煮沸时间延长;b) 也不排

WB实验小问答

  WB又称免疫印记法.是将生物大分子物质通过不同途径转移到固相载体的过程。其灵敏,可达ng级,用Ecl显色法理论上可达pg 级。方便,特异性高。今天给大家分析的是western blot实验中那些常见的问题,这份干货内容,请收好啦!    western blot 常见问题有那些?    1.为什

wb转膜条件公式

wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白

wb转膜条件公式

wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白

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WB实验的那些事儿

1.二抗需和一抗宿主的物种相同(如一抗来自兔,二抗为抗兔抗体)。原因: 一抗和二抗不匹配。2.参照说明书,设置阳性对照。原因:一抗不识别检测物种蛋白。3.每泳道蛋白上样量不低于20~30μg,设置阳性对照。原因:抗原量不足。4.使用可逆染色剂如丽春红S检测转膜效果,检测转膜操作是否正确。PVDF膜预

wb转膜条件公式

wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白

WB实战之抗体孵育

  由于抗原和抗体特异性结合的效率是非特异性结合的数百万--数十亿倍,所以当特异性抗体与非特异性'抗体'(不好描述,指添加在抗体稀释液中的封闭蛋白,我们可以把它们看成非特异性的一抗)竞争时,尽管抗体稀释液中封闭蛋白的浓度是一抗浓度20K:1以上,在碰撞几率相同的条件下,由于时间的积累

wb二抗怎么融化

wb 二抗融化,wb 抗体用5%的脱脂奶粉或者1%的BSA (千分之一的TBST的溶液 )配置,可以先让抗体和奶粉或者BSA 蛋白非特异结合,这样就不会与PVDF 膜上的蛋白结合了。

WB新时代开启-GE医疗发布Amersham-WB蛋白免疫印迹系统

  2014年9月24日,2014慕尼黑上海分析生化展在上海新国际博览中心隆重拉开帷幕。GE医疗生命科学亮相2014慕尼黑上海分析生化展,举办新品发布会全球同步发布Western

wb二抗室温几小时

二抗一般室温就行,没要求要37度,一个小时差不多就够了。

免疫印迹(Wb)的原理

(1)是一种蛋白质测定的技术,集合凝胶电泳的高分辨率,固定免疫测定的敏感及特异性和不需要对靶蛋白进行放射性核素标记,在固相膜上保持的时间很长等优点。(2)可以在样本中检测到微量到微量的抗原,以及在多克隆抗体中检测到单克隆抗体,还可以对已经转移到固相膜上面的蛋白质进行连续的分析。

wb条带放三天显影

显影。wb条带放三天看到明显的荧光条带,先压三十秒。显影时,把胶片完全浸入显影液,用透明的或者白色的盒子,看到显影,看到胶片上有黑色条带。wb就是艾滋病抗体确证试验,监测env的条带,出现两个env条带,判定是阳性检测env条带。

wb二抗室温几小时

二抗一般室温就行,没要求要37度,一个小时差不多就够了。蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或

WB条带是白色怎么补救

WB条带是白色无法补救。WB做出来是白色的条带,一抗、二抗均已稀释也不管用。二抗浓度或者目的条带丰富过高,很快消耗了底物,所以形成了白色条带。WB在做的时候需要稀释二抗浓度就可以了。

wb膜甲醇活化时间

不超过15秒。根据该物质简介可知,该物质的活化时间不超过15秒。pvdf膜在使用是需预处理,用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电的蛋白结合。pvdf膜具有较高的机械强度。

wb显影液显影原理

相纸、胶卷表面保护基下,是溴化银涂层(还有其他的从略),溴化银见光分解,显影液与其发生化学反应,分解析出。 拍照好的底片,图像在上面明暗不同,分解程度也就不一样了。冲洗出来就是底片。

magej分析wb条带如何水平

1、首先,打开ImageJ,并且导入要分析的条带。随后在Image-Type中选择8-bit。在Process-subtractbackground中设置rollingballradius=50pixel,记得勾选lightbackground哦。2、其次,进行分析参数的设置。这里选择Analyze