如何抑制western中蛋白样的降解
Western在检测过程中，蛋白样一般是不会降解的。因为在SDS-PAGE的时候，蛋白样品已经被SDS分解成一级结构了，不具有高级结构的蛋白质一般就失去了生物学活性，很难再被降解了。如果Western检测出来蛋白有降解，那很大的可能也会在做检测之前就已经降解了。......阅读全文
如何抑制western中蛋白样的降解
Western在检测过程中，蛋白样一般是不会降解的。因为在SDS-PAGE的时候，蛋白样品已经被SDS分解成一级结构了，不具有高级结构的蛋白质一般就失去了生物学活性，很难再被降解了。如果Western检测出来蛋白有降解，那很大的可能也会在做检测之前就已经降解了。
抑制蛋白已经过时，降解蛋白即将来临？
今天《自然药物研发》杂志发表一篇耶鲁大学Craig Crews教授撰写的综述，介绍双特异小分子诱导的蛋白降解。这篇文章介绍了目前已知的蛋白降解技术，从无选择性的热休克蛋白抑制剂、到意外发现的AR、ER降解小分子、到机理未知的HyT、到Crews教授自己发明的利用连接酶降解的PROTACs技术。重
如何靶向降解促癌症蛋白？
癌症研究越来越关注于靶向作用引发疾病蛋白的疗法开发，其中研究者们对发生早期降解的蛋白进行了标记，近日发表于国际杂志Nature上的研究论文中，来自瑞士巴塞尔弗雷德里希米歇尔研究所的科学家就揭示了特殊化合物如何拦截遍在蛋白连接酶来靶向作用特殊的蛋白进行降解，该机制或为靶向降解特殊的癌症蛋白提供思路
Westernblot实验中，蛋白上样一般多少含量
重组蛋白，推荐尝试30ng/泳道，细胞裂解液样品推荐 30µg/泳道，可以设定几个梯度。 但是具体样品需要具体分析。也要结合你的一抗对目标分子的检测限来进行调整。
western－blot中的一抗如何选择
一般选择的原则是去文献中找，看看别人做和你一样的目的蛋白的时候用的都是哪家得抗体，都有介绍的，看看图片效果怎么样。多找出一些文献，然后根据你掌握的信息选择一种最便宜，最高效，特异性最好的抗体。一般做科研的人都是这么选择抗体的，不能蒙着买，毕竟不便宜的。
如何提细胞的组蛋白做western－blot
你的意思就是提取核蛋白，提取核蛋白和提取全蛋白用的裂解液是不一样的。一般情况下我们都是买试剂盒，里面包含有细胞裂解液和核裂解液，按照说明书实用就行了。120mmol/L的Hepe（PH7.9）2420mmol/LNaCl31.5mmol/LMgCl242%Igepal50.5mmo/LEDTA620
western－blot中蛋白样品浓度怎样稀释
计算出样品及buffer的体积，加水补足到25ul
Western－Blot中蛋白样品的制备与试剂选择
"良好的开始是成功的一半"，尤其对于生物学实验，如果没有高质量的实验样本，等待我们的很可能是失败的实验结果。优质特异的蛋白样品对Western Blot实验至关重要。下面将从蛋白样品制备的方法和试剂选择上给大家一些建议，同时也和大家分享一些因蛋白样品制备不当而导致Western Blot实验失败的案
蛋白质代谢的降解蛋白
1、内源蛋白降解速度不同，一般代谢中关键酶半衰期短，如多胺合成的限速酶－鸟氨酸脱羧酶半衰期只有11分钟，而血浆蛋白约为10天，胶原为1000天。体重70千克的成人每天约有400克蛋白更新，进入游离氨基酸库。 2、内源蛋白主要在溶酶体降解，少量随消化液进入消化道降解，某些细胞器也有蛋白酶活性。内
TEM中如何正确制样
溶液相纳米颗粒常见的纳米粒子（金属纳米颗粒、量子点、氧化物纳米颗粒等）都能够很好溶解、或者分散在溶剂中，使得制样过程变得简单很多。常见的方法有两种：1.捞取法：用特制的镊子夹取载网放置于分散好的胶体溶液中，适当晃动，取出载网晾干即可，如图1所示。2.滴液法：在干净桌面上铺一张A4纸或者面巾纸，在A4
如何判断尿蛋白中的“+”？
1.首先要确定是否是持续出现加号，偶然检查发现加号，而平时尿检正常，则并不能说明什么问题，建议进一步复查确定。 2.一个加号表示有潜在的肾炎可能或尿路感染的危险。如果加号多就表示肾炎或泌尿系统炎症，究竟是哪种肾炎尚需进一步确认个人的症状及其相应检查。 3.如仅仅是少量蛋白尿，无血尿及高血压，
蛋白质代谢的降解蛋白的介绍
1、内源蛋白降解速度不同,一般代谢中关键酶半衰期短,如多胺合成的限速酶－鸟氨酸脱羧酶半衰期只有11分钟,而血浆蛋白约为10天,胶原为1000天。体重70千克的成人每天约有400克蛋白更新,进入游离氨基酸库。 2、内源蛋白主要在溶酶体降解,少量随消化液进入消化道降解,某些细胞器也有蛋白酶活性。内
蛋白提取的常见问题分析
Q：如何进行组织液氮研磨？A：将组织块在液氮里冻实，敲成大小合适的小块后放在研钵里，倒液氮，边研边加，保持研钵里有液氮，或是保持组织块不融。研碎了就行了。注意做前研钵等器具要预冷，用液氮或是先放负二十冰箱一段时间。注意事项：1.液氮研磨的研钵，药勺必须预冷。2.开始研磨前，将研钵置于冰袋上，并加入少
Western－blot中蛋白表达差异量检测哪种效果最好？
在检测Western blot中蛋白表达差异量时，数字成像和X光胶片哪种效果最好？哪种方法得出的图像才是我们最想要的？针对此问题，最近，武汉大学生命科学院舒红兵院士实验室特意用“化学发光成像仪”和“胶片”做了一次严谨的对比。通过这次PK，我们发现：1、化学发光成像仪具有灵敏度高、线性好和抑制过曝等优
western－blot－试验中蛋白转膜总转不上去
当然，首先要考虑的问题是你转过头了，蛋白质跑出去了。其次你的电流有点大，你也没说转了多久？用的干转还是湿转？是不是拿出来的时候很热？这种情况有可能使蛋白质降解。我们一般是湿转用100mA转2小时， 干转所需电流更小。
蛋白聚糖的降解的概述
可在一系列细胞外酶或溶酶体中的细胞内酶的催化下进行。水解糖链的酶包括内切糖苷酶及外切糖苷酶，分别催化水解糖链中的及糖链非还原末端的糖苷链。透明质酸酶是了解最多的内切糖苷酶。精细胞产生的透明质酸酶对其穿过卵膜实现受精是必要的。细菌分泌的透明质酸酶对其侵犯宿主组织有重要作用。氨基聚糖中的硫酸基由硫酸
如何在拉曼光谱中抑制荧光背景
1、表面增强技术，现在又表面增强的芯片或者溶液，这个不能算抑制，只是提高信号的强度2、主要是选用荧光效应小的激光器，比如1056nm的。
如何在拉曼光谱中抑制荧光背景
改变激发光波长，选择一个荧光效应最小的
Western印迹法检测蛋白
实验概要Western印迹法检测蛋白的敏感性约为1-5ng，0.75mm厚的SDS-PAGE板的一个孔可上总蛋白量约为100μg，所以只要被检蛋白不低于总蛋白量的万分之一，即可被检测出来。如果所分析的样品为未知时，应同时作阳性对照。杂交技术主要有NC膜的封闭，靶蛋白与第一抗体的反应，结合靶蛋白的一抗
Western印迹法检测蛋白
实验概要Western印迹法检测蛋白的敏感性约为1-5ng，0.75mm厚的SDS-PAGE板的一个孔可上总蛋白量约为100μg，所以只要被检蛋白不低于总蛋白量的万分之一，即可被检测出来。如果所分析的样品为未知时，应同时作阳性对照。杂交技术主要有NC膜的封闭，靶蛋白与第一抗体的反应，结合靶蛋白的一抗
Western－Blot－蛋白样品制备
一、单层贴壁细胞总蛋白的提取：1.倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。2.每瓶细胞加 3 ml 4℃ 预冷的 PBS（0.01M pH7.2～7.3）。平放轻轻摇动 1 min 洗涤细胞，然后弃去洗液。重复以上操作两次
Western－Blot，如何成功优化？
Western Blot 现在仍然是检测和分离蛋白最常用的一种实验方法，但是要想得到较好的结果并不容易，只有找到合适的实验条件并进行优化，才能以更少的时间得到更多的结果，达到事半功倍的效果！下面是 R&D Systems 品牌为您推荐的免疫印迹优化步骤和实验涉及参考数据：一抗浓度对实验结果的
western如何孵一抗
将抗体稀释到推荐浓度，这要是看你放膜的容器大小，如果容器刚好和膜差不多，只要配少量的一抗溶液就可以完全覆盖膜，但是如果容器较大，就需要事先看多少ml的溶液才能够用。抗体溶液倒到膜上后，将容器放到一个水平摇床，或者是染色摇床上，缓慢的摇动。可以在4C过夜孵育，也可以在室温孵育1h即可。
神经所研究发现抑制TRPC6蛋白降解保护大鼠缺血性脑损伤
TAT-C6肽（包含calpain切割位点）保护大鼠缺血性脑损伤 中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所神经信号转导研究组的杜婉璐、黄隽波和姚海兰等研究生在王以政研究员的指导下研究发现，抑制瞬时受体电势通道TRPC6蛋白降解保护缺血性脑损伤。9月1日医学杂志《临床检查杂志》（T
Western－Blot中抗体的选择
Western Blot又称为蛋白质印迹，是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的基于抗体抗原之间特异免疫反应的一种定量或定性检测蛋白的实验方法。基本原理：聚丙烯酰胺凝胶电泳将不同分子量的蛋白质样品分离，分离后的蛋白被转移到固相支撑物（杂交膜）上，抗体特异性识别目标蛋白，通过酶促反应或者化学发光等
尿纤维蛋白降解产物
尿纤维蛋白降解产物阳性意味着肾脏内有凝血和纤溶现象，提示有炎症病变。非炎性疾病大多阴性。原发性肾小球肾病通常为阴性，慢性肾炎多为阳性。尿纤维蛋白降解产物含量增加反映了肾功能损害程度。在医学`教育网搜集整理慢性肾炎的治疗过程中，临床症状缓解，肾功能恢复，尿纤维蛋白降解产物含量逐渐降低或转阴；阳性者表明
膜蛋白在室温多久降解
该膜蛋白容易降解。一般放置10天左右就降解50%以上、各种层析柱均没有获得好的分离效果、离子交换、分子筛、疏水柱都没有取得明显的分离效果。
蛋白质的降解的相关介绍
对于细胞来说，蛋白质降解有多种用途，包括去除分泌蛋白的N末端信号肽，对前体蛋白进行剪切以产生“成熟”蛋白等。细胞不需要的或受到损伤的非跨膜蛋白质一般由蛋白酶体来进行降解，而真核生物的跨膜蛋白则通过内体运送到溶酶体（动物细胞）或液泡（酵母）中进行降解。降解所生成的氨基酸分子可以被用于合成新的蛋白
如何选择蛋白酶抑制剂以提高蛋白纯化率
当细胞破碎的时候，蛋白水解酶就会被释放出来或被激活，使电泳结果复杂化，影响zui终结果分析。为了避免这些情况的出现，建议在样品制备时尽可能在低 温下进行。此外，许多蛋白酶在PH9以上就失活了，因此Tris碱，碳酸钠或碱性载体两性电解质往往能抑制蛋白水解。但是有些蛋白酶在上述条件下仍然保持 着活性，此
western－blot－中甲醇作用
westernblot转膜不用甲醇可以蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即westernblot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息