转基因食品检测技术——核酸杂交技术

核酸杂交技术的基本原理是两条 DNA 链之间可以通过碱基配对而形成氢键,通常核酸杂交的检测过程主要包括以下几个步骤:将单链的目的 DNA 结合到膜上,然后加入单链、标记过的探针 DNA,在一定的温度条件和离子浓度下使探针分子与目标 DNA 分子碱基配对,再洗去未结合的标记探针,检测探针和目标 DNA 形成的杂合分子。由此可以看出,一个核酸杂交检测有三个关键因素:探针 DNA、目的 DNA 和信号检测。把握好这三个因素,核酸杂交技术可以达到高特异性和高灵敏度的水平。......阅读全文

转基因食品检测技术——核酸杂交技术

核酸杂交技术的基本原理是两条 DNA 链之间可以通过碱基配对而形成氢键,通常核酸杂交的检测过程主要包括以下几个步骤:将单链的目的 DNA 结合到膜上,然后加入单链、标记过的探针 DNA,在一定的温度条件和离子浓度下使探针分子与目标 DNA 分子碱基配对,再洗去未结合的标记探针,检测探针和目标 DNA

核酸探针杂交检测技术介绍

一、核酸探针预杂交预杂交的目的是用非特异性 DNA 分子(鲑精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其他高分子化合物(Denhart’s溶液)将待测核酸分子中的非特异性位点封闭,以避免这些位点与探针的非特异性结合。杂交反应是使单链核酸探针与固定在膜上的待测核酸单链在一定温度和条件下进行复性反应的过程。杂交

转基因食品检测技术

转基因食品是指利用生物技术,将外源基因转移到动物、植物或微生物等其他物种中,从而改造生物的遗传特性,使其在性状、营养品质等方面向人类所需的目标转变,由这些转基因生物为直接食品或原料加工生产的食品就是转基因食品。自1983年世界第一例转基因作物马铃薯问世以来,目前各国已经试种的转基因植物超过4500种

核酸杂交的技术原理

其原理是核酸变性和复性理论。即双链的核酸分子在某些理化因素作用下双链解开,而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双链结构。杂交通常在一支持膜上进行,因此又称为核酸印迹杂交。根据检测样品的不同又被分为DNA印迹杂交(Southern blot hybridization )和RNA印迹杂交(Northe

核酸杂交技术的概述

  DNA或RNA先转移并固定到硝酸纤维素或尼龙膜上,与其互补的单链DNA或RNA探针用放射性或非放射性标记。在膜上杂交时,探针通过氢键与其互补的靶序列结合,洗去未结合的游离探针后,经放射自显影或显色反应检测特异结合的探针。

核酸分子杂交技术应用

核酸分子杂交作为一项基本技术,已应用于核酸结构与功能研究的各个方面。核酸分子杂交具有很高的灵敏度和高度的特异性,因而该技术在分子生物学领域中已广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。因而它不仅在分子生物学领域中具有广泛地应用,而且在临床诊断

核酸分子杂交技术简介

核酸分子杂交(简称杂交,hybridization)是核酸研究中一项最基本的实验技术。互补的核苷酸序列通过Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链DNA或RNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。

核酸杂交的技术操作步骤

(1)制备样品:首先需要从待检测组织样品提取DNA或RNA。DNA应先用限制性内切酶消化以产生特定长度的片段,然后通过凝胶电泳将消化产物按分子大小进行分离。一般来说DNA分子有其独特的限制性内切酶图谱,所以经酶切消化和电泳分离后可在凝胶上形成特定的区带。再将含有DNA片段的凝胶进行变性处理后,直接转

荧光定量PCR技术检测食品转基因

当前,国际社会对转基因食品检测技术路线主要有两条:一是对外源基因表达产物蛋白质进行检测;二是直接检测外源基因DNA。随检测手段不断提高,对食品转基因检测已从定性提高到定量水平 。对外源基因表达产物蛋白质检测常用方法有酶联免疫法(ELISA)、蛋白质印迹法(Westernblot)等,这些检测方法大多

人工转基因技术和人工杂交技术的区别

  人工转基因技术和人工杂交技术是两个概念,植物杂交技术是自体基因重组过程,不改变繁殖特性,但有组合优质基因的几率,基本不会产生变异基因,即没有剥夺其基本特性的作物。它可通过原生质体之间的融合、细胞自体细胞重组、自体遗传物质自由组合转移、自体染色体工程技术获得,不改变植物的遗传特性,可以提高优质率水

核酸分子杂交技术的基本介绍

  由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。  (1)灵敏度高、特异性强;  (2)用于 DNADNA和RNARNA的定性、定量检测。

四维核酸杂交技术介绍

四维核酸杂交技术[ 1 ](4DH),即在传统核酸杂交三维空间(XYZ:表征DNA片段的长度、碱基组成和碱基的排列)的基础上引入温度作为第四位参数所构成的四维温度空间平台上建立的核酸杂交技术。背景 基因组(genome)是指人类细胞中所有遗传信息的总和。基因组信息是由脱氧核糖核酸(又称为DNA)携带

四维核酸杂交技术介绍

  定义   四维核酸杂交技术[ 1 ](4DH),即在传统核酸杂交三维空间(XYZ:表征DNA片段的长度、碱基组成和碱基的排列)的基础上引入温度作为第四位参数所构成的四维温度空间平台上建立的核酸杂交技术。   背景   基因组(genome)是指人类细胞中所有遗传信息的总和。基因组信息

四维核酸杂交技术简介

定义 四维核酸杂交技术[ 1 ](4DH),即在传统核酸杂交三维空间(XYZ:表征DNA片段的长度、碱基组成和碱基的排列)的基础上引入温度作为第四位参数所构成的四维温度空间平台上建立的核酸杂交技术。 背景 基因组(genome)是指人类细胞中所有遗传信息的总和。基因组信息是由脱氧核糖核酸(又称为DN

四维核酸杂交技术介绍

  定义   四维核酸杂交技术[ 1 ](4DH),即在传统核酸杂交三维空间(XYZ:表征DNA片段的长度、碱基组成和碱基的排列)的基础上引入温度作为第四位参数所构成的四维温度空间平台上建立的核酸杂交技术。   背景   基因组(genome)是指人类细胞中所有遗传信息的总和。基因组信息

关于核酸分子杂交技术的特点和技术介绍

  1、特点  (1)灵敏度高、特异性强;  (2)用于 DNADNA和RNARNA的定性、定量检测。  2、用途  (1)检测特异 DNADNA序列的拷贝数、特定DNADNA区域的限制性内切酶图谱,判定基因的缺失、插入、重排现象;  (2)特异基因克隆的筛选;  (3)核酸序列的初略分析;  (4

关于核酸分子杂交技术的基本介绍

  由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。

基因诊断技术核酸杂交的相关介绍

  是从核酸分子混合液中检测特定大小的核酸分子的传统方法。核酸杂交反应是一对一的反应,即膜上有一个被检测分子时,相应就有一个标记的探针分子与它杂交。其原理是核酸变性和复性理论。即双链的核酸分子在某些理化因素作用下双链解开,而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双链结构。杂交通常在一支持膜上进行,因此又

分子杂交技术的核酸探针标记法

核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。 分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA

核酸突变检测技术

基因突变是指由于DNA碱基对的置换、增添或缺失而引起的基因结构的变化,亦称点突变。它的分类方式包括1)根据基因结构的改变方式,基因突变可分为碱基置换突变和移码突变两种类型;2)根据遗传信息的改变方式,基因突变又可以分为同义突变、错义突变和无义突变三种类型。基因突变的检测方法:从基因突变的性质来看,检

医用核酸分子杂交仪的技术指标

  ·采用导流杂交技术,提高杂交效率,简化操作步骤,缩短杂交时间; ·高速热循环系统,采用先进热电制冷技术,快速加热和冷却; ·彩色LCD显示器,可对杂交过程中的温控变化进行实时监控; ·机械升降台代替手工密封,实现密封自动化; ·压力平衡系统,减少杂交过程试剂的损耗。

核酸分子杂交技术的基本原理

  由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。  具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补还原成双链。杂交的双方是待测核酸序列

试论转基因食品检测技术研究进展

  【摘 要】随着科学技术的迅猛发展,转基因食品大量出现,并且大量涌入市场。转基因食品到底对人们的健康有没有影响,至今还没有一个定论,因此,对转基因食品的检测受到了世界各国卫生组织机构的广泛关注。    随着现代科技的快速发展,以基因工程为代表的现代生物技术也取得了令人注目的成绩,特别是与人们生活密

简述核酸分子杂交技术的基本原理

  具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补还原成双链。杂交的双方是待测核酸序列及探针(probe),待测核酸序列可以是克隆的基因征段,也可以是未克隆化的基因组DNA和细胞总RNA。核酸探针是指用放射性核素、生物素或其他活性物质标记的,能与特定的核酸序列发生

核酸杂交技术(Northern-Blot、Southern-Blot和探针标记)

(一)Southern Blot原理:将待检测的DNA分子用/不用限制性内切酶消化后,通过琼脂糖凝胶电泳进行分离,继而将其变性并按其在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上,固定后再与同位素或其它标记物标记的DNA或RNA探针进行反应。如果待检物中含有与探针互补的序列,则二者通过碱基互补的原理进

研究突破核酸检测技术瓶颈

大连理工大学物理学院先进光学与光纤传感技术团队的彭伟教授和张扬副教授与中国计量大学合作,发展了一种基于倾斜光纤布拉格光栅(TFBG)的超灵敏核酸检测系统,相关成果近日发表在《生物传感器与生物电子学》。核酸作为携带和传递生物信息的重要遗传物质,广泛应用于病毒生物标志物的检测。对核酸进行准确量化不仅为护

核酸检测革命:rpa技术原理

  重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。本专题为大家详细介绍RPA的原理、引物设计、疑难解答以及在致病菌检测、病毒检测以及癌症研究中的灵活应用。  自PCR技术诞生以来已经有三十年了,从经典PCR

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段...

实验材料核苷酸                                                          试剂、试剂盒冰水                                                                  8-羟基喹啉    

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合转基因片段实验

实验材料核苷酸试剂、试剂盒冰水8-羟基喹啉秋水仙素固定剂酶解缓冲液仪器、耗材载玻片玻璃盖玻片解剖针及镊子实验步骤原位杂交的基本操作方法(图 14 .2 ) 演化自 Southern 杂交:标底是玻片上的染色体和细胞核,探针是带标记的待测 DNA 序列 [ 本书中即是转基因和对照,图 14.3(a)

Southern杂交技术

 SOUTHERN BLOT1. Run the gel as normal. Often for genomic southerns it is desirable to run long gels (18cm) over 4-6hrs.2. Photograph the gel with a r