酶联免疫吸附测定法测定T2毒素

测定小麦中T-2毒素的酶联免疫吸附法有间接竞争性酶联免疫吸附测定法和直接竞争性酶联免疫吸附测定法。(1)间接法①试剂a.化学试剂:T-2毒素,四甲基联苯胺,甲醇,石油醚,三氯甲烷,无水乙醇,乙酸乙酯,二甲基甲酰胺,吐温-20,30%过氧化氢等。b.缓冲溶液包被缓冲液:50mmol/L 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液,PH9.6。洗液:含0.05%吐温-20的磷酸盐缓冲液,PH7.4。样品与T-2毒素标准溶液稀释液,含20%甲醇的溶液。底物缓冲液:0.1mol/L的磷酸-柠檬酸缓冲液,PH5.0。底物溶液:取50μL 四甲基联苯胺溶液加10mL 底物缓冲液、10μL 30%过氧化氢混匀。终止液:1mol/L 硫酸溶液。c.T-2毒素标准溶液:用甲醇配成1mg/mL T-2毒素贮备液,20℃冰箱贮存。于检测当天,精密吸取贮备液,用稀释液稀释成制备标准曲线的所需浓度。d.包被抗原:T-2毒素与载体蛋白-牛血清白蛋白的结合物。e.抗体:抗T-2......阅读全文

免疫亲和柱荧光计快速测定法

  (1)试剂与设备   ①4-系列真菌毒素专用荧光计。   ②均质器(250mL)。   微量移液器(0.5mL)。   涡流混合器。   ⑤塑料注射器(60mL)。   ⑥VICAM T-2毒素亲和柱。   ⑦聚乙二醇(PEG),相对分子质量8000。   色谱级甲醇。   ⑨

HPLC柱后衍生法测定黄曲霉毒素

黄曲霉毒素主要污染粮食和油料作物。黄曲霉毒素的急性毒性极强,可引起急性肝炎。它还有明显的慢性毒性与致癌性,持续摄入可引起肝肿大,并发生肝硬化和癌变。世界卫生组织已明确认定黄曲霉毒素为致癌物,许多科学家甚至认为,黄曲霉毒素是目前已知的致癌性zui强的生物代谢产物。 黄曲霉毒素主要有4种:即B1、B2、

HPLC法测定谷物中黄曲霉毒素含量

方案优势       定量准确,精密度高而且操作极为方便。               采用标准       国家相关标准           方法/原理/步骤         标准品的准备   标准品包括了黄曲霉毒素B1、G1、B2、G2各单一

浅析今年全球饲料原料霉菌毒素的检出率

For its latest World Mycotoxin Survey, Biomin conducted more than 33,000 analyses on 8,452 finished feed and raw commodity samples from 63 countri

解读国内外饲料中真菌毒素限量标准对比(二)

三、欧盟饲料中真菌毒素的限量标准欧盟委员会指令2002/32/EC规定了饲料中黄曲霉毒素B1的最高限量,在欧盟委员会建议2006/576/EC中发布了饲用农产品和饲料中呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A和伏马毒素的指南限量(表4),要求加强对T-2毒素和HT-2毒素的危害信息收集、研究和检测方法开

酶联免疫吸附测定

1 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。2 标本的采取和保存可用作ELISA测定

微柱筛选法测定各种食品中黄曲霉毒素

(1)原理  样品提取液中的黄曲霉毒素被微柱管内硅镁型吸附剂层吸附后,在波长365nm 紫外光灯下显示蓝紫色荧光环,其荧光强度与黄曲霉毒素在一定的浓度范围内成正比例关系。若硅镁型吸附剂层未出现蓝紫色荧光,则样品为阴性(方法灵敏度为5~10μg/kg)。由于在微柱上不能分离黄曲霉毒素B1,B2,G1,

食品及相关产品毒素检测标准汇总

  本汇总主要是食品及饲料等相关产品中的毒素检测方面标准汇总:  国家标准:  GB 13078.2-2006 饲料卫生标准 饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的允许量  GB/T 17480-2008 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 酶联免疫吸附法  GB/T 18979-2003

脱氧雪腐镰刀茵烯醇的免疫学方法

  免疫学检测方法——酶联免疫吸附检测(ELISA)在微量毒物的检测中已经得到广泛应用。与理化方法相比,它具有特异性高、敏感性强、快速方便、以及不需要昂贵仪器设备等优点,但关键是要有高质量的抗体。邓舜洲等通过竞争间接ELISA法测定出饲料中DON的含量。  DON等镰刀菌毒素在人类粮食和家畜饲料中污

免疫亲和柱荧光计快速分析法测定呕吐毒素

呕吐毒素介绍脱氧雪腐镰刀菌烯醇,又称为呕吐毒素,属单端孢霉烯族化合物。该毒素是F.镰刀菌霉(主要是 F.graminearum h 和 F.culmorum)的二级代谢产物,化学名为3α,3β,7α,15-四羟基镳草镰刀菌-9-烯-8-酮。这类真菌大多在低温、潮湿和收割季节,在谷物庄稼中慢慢生长。呕

免疫亲和层析法测定黄曲霉毒素M1

1、范围适用于测定牛奶、奶粉,以及低脂牛奶、脱脂牛奶、低脂奶粉和脱脂奶粉中黄曲霉毒素 M1 的含量。奶粉中的最低检测限是0.08μg/kg,牛奶中的最低检测限是0.008μg/kg。2、原理试样通过免疫亲和柱时,黄曲霉毒素 M1 被提取。亲和柱含有特性的抗体键合在固体支持物上。当样品通过亲和柱时,抗

斑点酶联免疫吸附测定

实验概要斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少,节省材料,不需特殊仪

斑点酶联免疫吸附测定

实验概要斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少,节省材料,不需特殊仪

酶联免疫吸附测定(ELISA)

基本原理    1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原

斑点酶联免疫吸附测定

实验概要斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少,节省材料,不需特殊仪

真菌毒素的概念和种类

真菌毒素(mycotoxin),有时也俗称霉菌毒素,是某些真菌产生的代谢产物,目前已发现的真菌毒素有十多种,它们包括黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马霉素、脱氧雪腐镰刀菌烯酮(也称为呕吐毒素)、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、麦角碱、杂色曲霉素、黄米毒素、岛青霉毒素、展青霉毒素(棒曲霉毒素)、橘青霉素皱褶青霉素

酶标抗体法—生物毒素检测的介绍

  酶标抗体法—生物毒素检测:以免疫学为基础的检测方法如ELISA具有实验周期短、设备简单、操作简便等特定而被广泛应用。已建立检测黄曲霉毒素B1直接竞争ELISA法,检测猪肉和鸡肉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素的直接竞争ELISA法,基于噬菌体展示技术的酶联免疫吸附分析检测赭曲霉毒素A的方法等。

百奥明2021上半年主要原料与饲料霉菌毒素普查报告

  样品与检测  2021上半年百奥明委托Romer实验室进行霉菌毒素检测,检测样品总数合计979份。使用的检测方法有两种:LC-MS/MS 串联质谱和ELISA酶联免疫试剂盒,串联质谱可以检测出18种毒素,ELISA主要针对常见的4种毒素进行检测。  18种霉菌毒素包括:黄曲霉毒素4种(黄曲霉毒素

黄曲霉毒素一般检测方法概述

1.薄层层析(TLC)法 TLC法是测定黄曲霉毒素的经典方法,在薄层板展开后,在365 nm紫外灯下,黄曲霉毒素B1,B2,G1和G2分别显示紫色、蓝紫色、绿色和绿色荧光。TLC法的特异性较差,灵敏度相对较差,且测定黄曲霉毒素专一性不够,经常引起测量误差。但由于此法设备

QuEChERS法测定药食同源性食品中16种真菌毒素

  建立了加速溶剂萃取-QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱测定药食同源性食品中16种真菌毒素的方法。样品经过加速溶剂萃取后用QuEChERS方法净化,液相色谱分离,在正、负离子同时扫描和多反应离子监测模式下检测,黄曲霉毒素B1和伏马毒素B1采用内标法定量,其余毒素采用基质外标法定量。在较宽的

液相色谱法测定茶叶中黄曲霉毒素B1

1.适用范围本方法适用于出口茶叶中黄曲霉毒素B1含量的检验。2.原理概要样品用三氯甲烷提取,提取液经硅胶柱净化,净化后的提取液用三氟乙酸衍生,用配有荧光检测器的液相色谱仪测定,外标法定量。3.主要试剂和仪器3.1.主要试剂三氯甲烷;正己烷;苯;甲醇:紫外光谱级;乙腈:紫外光谱级;三氟乙酸;乙腈-水溶

固相萃取高效液相色谱法测定水中痕量藻类毒素

实验概要本实验建立了固相萃取(SPE)高效液相色谱(HVLC)检测水环境中痕量藻毒素的分析方法,并用于实际样品分析。该法具有操作简便,灵敏度高的特点,适合水质监测部门应用。同时,与酶联免疫法相比,在定性和定量上更加可靠,可推广进行水中藻毒素含量的检测。主要试剂徽囊藻毒素标样为MC-LR,MC-RR(

液相色谱法测定茶叶中黄曲霉毒素B1

  1.适用范围   本方法适用于出口茶叶中黄曲霉毒素B1含量的检验。   2.原理概要   样品用三氯甲烷提取,提取液经硅胶柱净化,净化后的提取液用三氟乙酸衍生,用配有荧光检测器的液相色谱仪测定,外标法定量。   3.主要试剂和仪器   3.1.主要试剂   三氯甲烷;

如何检测食品中的霉菌毒素?

  霉菌毒素是霉菌在谷物(大豆、玉米、麸皮)中繁殖过程中或者储存过程中产生的有毒代谢产物。正确认识这些毒素,可以帮助我们更好地预防并选择有针对性的脱霉剂。那么霉菌毒素有哪些有哪些?如何检测呢?  霉菌毒素的种类  赭曲霉毒素:与黄曲霉毒素有些相似,主要侵害肝脏和肾脏。它可使肠道相关淋巴组织坏死,降低

生物呕吐毒素荧光定量检测试纸条性能评估验证...(二)

取10个无污染(阴性)小麦样品和10个无污染(阴性)玉米样品,用上海飞测生物呕吐毒素荧光定量检测试纸条每个样品检测3次,检测限(LOD)为测定平均值加3倍标准偏差,定量限(LOQ)为测定平均值加10倍标准偏差。测试结果表明,DON的LOD为25μg/kg,LOQ为82μg/kg。   2.2准确

T2毒素免疫层析亲和柱说明

1、 用途:免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的T2毒素,从而对T2毒素样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行T2毒素含量的检测。亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。2、 概述:T2毒素(T2)是由多种镰刀菌产生的一种霉

T2毒素免疫层析亲和柱

  1、 用途:   免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的T2毒素,从而对T2毒素样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行T2毒素含量的检测。   亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。   2、 概述:   T2毒

酶联免疫吸附测定的原理

原理是抗原与抗体之间的特异性结合。酶联免疫吸附是在固相载体上包被好能与目的抗原特异性结合的抗体,当检测样本中含有目的抗原时,其会与固相载体上的抗体相结合,并加入和链接化学发光酶,通过冲洗去掉其他非目的抗原,加入显色底物与之反应,此时吸光度越大也就是颜色越深的就说样本中明目的抗原越多,没有颜色反应的就

酶联免疫吸附测定方法介绍

双抗体夹心法双抗体夹心法双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:一、将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。二、加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。三、加酶标抗体:使固

酶联免疫吸附测定的原理

  原理是抗原与抗体之间的特异性结合。酶联免疫吸附是在固相载体上包被好能与目的抗原特异性结合的抗体,当检测样本中含有目的抗原时,其会与固相载体上的抗体相结合,并加入和链接化学发光酶,通过冲洗去掉其他非目的抗原,加入显色底物与之反应,此时吸光度越大也就是颜色越深的就说样本中明目的抗原越多,没有颜色反应