免疫金制备的原理和要点有哪些?
(一)制备原理:蛋白质被吸附到胶体金颗粒表面而结合的过程。 (二)技术要点 1.胶体金溶液的pH:原则上可选择待标记蛋白质等电点,也可略为偏碱。 2.蛋白质最适标记量 (三)注意事项 多种蛋白质、葡聚糖、PEG2000、明胶等均为良好的高分子稳定剂,PEG和BSA是最常用的稳定剂。稳定剂有两大作用: ①为保护胶体金的稳定性,使之便于长期保存; ②为防止或减少免疫金复合物的非特异性吸附反应。......阅读全文
免疫金制备的原理和要点有哪些?
(一)制备原理:蛋白质被吸附到胶体金颗粒表面而结合的过程。 (二)技术要点 1.胶体金溶液的pH:原则上可选择待标记蛋白质等电点,也可略为偏碱。 2.蛋白质最适标记量 (三)注意事项 多种蛋白质、葡聚糖、PEG2000、明胶等均为良好的高分子稳定剂,PEG和BSA是最常用的稳定剂。稳定
抗血清的制备的免疫程序有哪些?
1.免疫原的剂量:免疫原剂量过大或过小都可使动物产生免疫耐受,在一定剂量范围内,免疫原剂量越大,产生的抗体效价越高。2.免疫途径:有皮内、皮下、肌内、静脉、腹腔、淋巴结等途径。皮内或皮下免疫时一般采用多点注射。初次免疫一般选择皮内接种,加强免疫和颗粒性抗原一般选择静脉注射。宝贵抗原可选择淋巴结内微量
免疫球蛋白的制备方法有哪些?
乙醇沉淀法:这是最早用于从血浆中分离IgG的方法之一。通过在低温条件下向血浆中加入乙醇,使IgG沉淀,然后通过一系列的沉淀和溶解步骤来纯化IgG。这种方法相对简单,但纯度较低,需要进一步处理以获得高纯度的IgG。 色谱吸附法:现代免疫球蛋白生产中广泛使用色谱技术,如离子交换色谱、亲和色谱和凝胶过
免疫胶体金的制备过程
1蛋白质的处理:由于盐类成分能影响金溶胶对蛋白质的吸附,并可使溶胶聚沉,故致敏前应先对低离子强度的水透析。必须注意,蛋白质溶液应绝对澄清无细小微粒,否则应先用微孔滤膜或超速离心除去。一般情况下应避免磷酸根离子和硼酸根离子的存在,因为它们都可吸附于颗粒表面而减弱胶体金对蛋白质的吸附。2蛋白质最适用量的
怎么样制备免疫金?
(一)制备原理:蛋白质被吸附到胶体金颗粒表面而结合的过程。(二)技术要点1.胶体金溶液的pH:原则上可选择待标记蛋白质等电点,也可略为偏碱。2.蛋白质最适标记量(三)注意事项多种蛋白质、葡聚糖、PEG2000、明胶等均为良好的高分子稳定剂,PEG和BSA是最常用的稳定剂。稳定剂有两大作用:①为保护胶
耐药细胞的特性和操作要点有哪些
耐药细胞的特性: 1)细胞来源于人正常口腔黏膜组织。 2)细胞鉴定:Vimentin免疫荧光染色为阳性。 3)经鉴定细胞纯度高于90%。 4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。 5)细胞生长方式:不规则细胞,长梭形,贴壁培养。 耐药细胞的操作要点: 1)将
抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些
抗原免疫动物制备血清,常用动物有哪些抗原注射进入动物体内后,因为不是一个单独的分子,会随血液循环输送到各处,也就会接触不同的免疫细胞。有些还会被抗原提呈细胞再加工。所以最后的结果是很多个免疫细胞都会接触到。一个抗原分子也有很多抗原表位。每个表位理论上都有能力激活一个B细胞转化为浆细胞。所以体内最后针
免疫固定电泳的原理有哪些?
可用于各种蛋白质的鉴定。原理:将待检样品在凝胶板上作区带电泳,将蛋白质分离成不同区带,然后在其上覆盖抗血清,当抗血清与某区带中的单克隆免疫球蛋白结合,便形成抗原抗体复合物而沉淀。最后通过漂洗和染色,并与蛋白质参考泳道对照分析,可对各类免疫球蛋白及其轻链进行分型。 本法可用于迁移率近似的蛋白和M
免疫胶体金技术的蛋白制备
胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。 1.待标记蛋白溶液的制备 将待标记蛋白预先对0.0
免疫胶体金技术的颗粒制备
根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1.枸橼酸三钠还原法 (1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。 (2)15nm胶体金颗粒的制备:取0.
免疫胶体金技术的颗粒制备及蛋白制备
颗粒制备 根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1.枸橼酸三钠还原法 (1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。 (2)15nm胶体金颗粒的
金标免疫分析方法原理和操作办法
1、原理 利用不同的增菌培养基,提供给 E.coli O157:H7 ,迅速复活和生长所必须的营养物质及其他因素(利用 REVEAL 培养基,可以在8h 得到检测结果。其他培养基如《FDA 细菌分析手册》推荐的增菌培养基也可用于检测卡检测,允许检测时间在20h 内)取一部分(120μL)
肉眼血尿的鉴别要点有哪些?
①肾肿瘤:多见于40岁以上的患者,为无痛全程血尿、当血块通过输尿管时,可发生疼痛。②膀胱肿瘤:其特点为无痛全程间歇肉眼为主血尿,伴感染有膀胱刺激症状。③肾结核:为终末血尿,伴顽固的膀胱刺激症状。④泌尿系结石:具有劳动后绞痛和血尿相继出现的特点。血尿应与血红蛋白相区别,血红蛋白尿在镜下见不到红细胞或少
恒温摇床使用要点有哪些?
使用过冷冻恒温摇床的实验人员都知道,它在使用过程中对环境有着较为严格的要求,在操作时有很多雷区需要规避。稍不注意就会影响仪器的使用效果,甚至缩短其使用寿命。今天,就和大家聊聊仪器的使用要点,希望对您有所帮助。 【操作要点】 1、保证仪器牢固、平稳放置,保持实验室通风良好、清洁整
免疫金标记技术原理
免疫金标记技术原理:胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面,无共价键形成,标记后大分子物质活性不发生改变。金颗粒具有高电子密度的特性。金标蛋白在相应的配体处大量聚集时,在显微镜下可见黑褐色颗粒或肉眼可见红
斑点金免疫渗滤试验原理
斑点免疫渗滤试验的基本原理是:以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔滤膜的可滤过性,使抗原抗体反应和洗涤在一特殊的渗滤装置上以液体渗滤过膜的方式迅速完成。斑点免疫渗滤试验最初是从斑点ELISA基础上发展起来建立的,应用的结合物是酶标记的,称为斑点酶免疫渗滤试验。90年代初发展了以胶体金为标记物的斑点免疫渗
过滤器的选择有哪些要点
过滤器的选择要点①首先要确定滤除的颗粒尺寸和污染浓度。原则是根据关键液压元件内部表面磨损的危害和影响,控制能够侵人润滑油膜的颗粒,依油膜厚度选择可控制的颗粒尺寸和数量。②系统中需要被过滤器(空气过滤器,油过滤器)净化的总油量也要精确计算确定。油量越大,选用过滤器(空气过滤器,油过滤器)的元件过滤面积
选择蒸发器的要点有哪些?
蒸发器蒸发结晶器器下部接有淘析柱,器内设有导流筒和筒形挡板,操作时热饱和料液连续加到循环管下部,与循环管内夹带有小晶体的母液混合后泵送至加热器。加热后的溶液在导流筒底部附近流入结晶器,并由缓慢转动的螺旋桨沿导流筒送至液面。选择二手蒸发器的要点有哪些呢?蒸发器说起这个名字,可能很多人都很陌生,但是二手
GMP现场检查的要点有哪些?(一)
一、现场不允许出现的问题:1、物料(含化验室菌种、车间物料)帐、卡、物不符或没有标签 2、现场演示无法操作、不能说清如何工作3、现场存在废旧文件(包括垃圾桶、垃圾站),有撕毁记录,随意涂改现象4、专家面前推卸责任、争辩、训斥下属5、环境温湿度、压差、洁净区密封等方面存在问题 二、设备设施方面应避
免疫胶体金技术的测试原理
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:*方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定
免疫胶体金技术的测试原理
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:*方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定
免疫胶体金技术的方法原理
免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶,它能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此,用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针,就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位,甚至定量研究。由于胶体金
免疫胶体金技术的测试原理
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:*方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定
免疫胶体金技术的测试原理
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:*方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定
免疫胶体金技术的测试原理
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点: *方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。 *短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出结论。 *
免疫胶体金(Immune-colloidal-gold)基本原理和常用的免疫胶...
免疫胶体金(Immune colloidal gold)基本原理和常用的免疫胶体金胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学
人工制备抗体制备方法有哪些
抗体在疾病的诊断和免疫防治中的重要作用,使人们对抗体的需求越来越大。人工制备抗体是大量获得抗体的重要途径。早年人工制备抗体的方法主要是以相应抗原免疫动物,获得抗血清。由于抗原常常含有多种不同的抗原表位,加之所获得的抗血清也未经免疫纯化,因此,获得的抗血清实际上是含多种抗体的混合物,即多克隆抗体(po
冷冻恒温摇床使用要点有哪些
恒温摇床使用前涉及到一个仪表设置的问题,一般就是设置实验需要的温度和时间,下面我们来分享看一下如何设置这些参数。 请看操作步骤: 1. 打开电源开关,整机通电。 2. 设置转速:直接扭动旋钮可以更改所设置的转速,顺时针拨动,设置转速值增加 ,逆时 针减
植物生长室设计要点有哪些?
植物生长室就是人工气候室,通过在室内模拟控制植物生长需要的气候环境来帮助植物快速生长,是生物遗传工程、环境科学、林业、畜牧、水产等生产和科研部门理想的试验设备。那么植物生长室到底有哪些设计要点呢?我们一起来看看。首先,最基础的就是二氧化碳、温湿度控制要精确。植物生长室温湿度、二氧化碳均匀性以及稳定性
冷冻恒温摇床使用要点有哪些
恒温摇床使用前涉及到一个仪表设置的问题,一般就是设置实验需要的温度和时间,下面我们来分享看一下如何设置这些参数。 请看操作步骤: 1. 打开电源开关,整机通电。 2. 设置转速:直接扭动旋钮可以更改所设置的转速,顺时针拨动,设置转速值增加 ,逆时 针减少。若2秒钟未操作,则系统确认后显示实