测定酶活力时分别有什么注意事项

(1)酶促反应过程中,要用初速度表示酶促反应速度。 (2)要规定时间、温度、pH等反应条件,并在酶测定过程中保持这些反应条件的恒定。 (3)配制的底物浓度应准确且足够大,底物液中应加入不抑制该酶活力的防腐剂并保存于冰箱中,以防止底物被分解。 (4)标本要新鲜,应保存于冰箱中。用血浆时,应考虑到抗凝剂对酶反应的影响。在采血、分离血清时,应注意防止溶血和白细胞的破裂。 (5)在测定过程中,所用仪器应绝对清洁,不应含有酶的抑制物,如酸、碱及蛋白沉淀剂等。......阅读全文

酶活力测定的方法

酶活力测定的方法很多,如化学测定法、光学测定法、气体测定法等。酶活力测定均包括两个阶段:首先是在一定条件下,酶与底物反应一段时间,然后再测定反应体系中底物或产物的变化量。一般经过以下几个步骤:(1)根据酶催化的专一性,选择适宜的底物,并配制成一定浓度的底物溶液。所用的底物必须均匀一致,达到酶催化反应

酶活性测定方法对比

  1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的

酶活性测定方法对比

1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的影

亚硝酸还原酶的酶活性测定

NiRs是胞内酶,其氧化还原反应过程中需要供体电子,且大多需要在厌氧条件下进行。因此体外检测亚硝酸还原酶时需要在密闭无氧且有电子供体的情况下才能进行检测。电子供体有甲基紫精、连二亚硫酸钠和硫代硫酸钠等 。

木瓜蛋白酶的酶活测定

基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。酶活单位在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。试液制备1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.42g,加10mmol/LE

猪胰蛋白酶酶活力的测定

实验原理胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中,在Ca2+的存在下,被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活,从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开,失去一段六肽,分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量约为24000,其等电点约为pH8.9,胰蛋白酶的分子量与其酶原接

木瓜蛋白酶的酶活测定

  一、基本原理  木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。  酶活单位  在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。  二、试液制备  1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐

精浆α葡糖苷酶测定测定方法

  比色法可测定精浆中α-葡糖苷酶的活性。葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成量,反映α-葡糖苷酶的活性。国内临床上较为常用。

酶活性测定法的测定方式介绍

  酶活力的测定可采用两种方式:  其一是测定完成一定量反应所需的时间,其二是测定单位时间内的酶催化的化学反应量。  终点法  该方式是在特定条件下,将样品中要检知的酶作用一定量的底物,然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。  其一个发展是采用检测器对反应进行连

木瓜蛋白酶的酶活性的测定

本方法仅适用于木瓜蛋白酶。 基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。酶活单位在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。试液制备1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.

豆粕中尿素酶活性的测定_尿素酶解法

将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合,在30℃保持30min后,尿素酶催化尿素水解产生氨的反应。用过量的盐酸溶液中和所产生的氨,再用氢氧化标准溶液回滴。实验材料大豆试剂、试剂盒尿素缓冲溶液盐酸氢氧化钠蒸馏水仪器、耗材样品筛酸度计恒温水浴锅试管精密计时器粉碎机分析天平移液管一、实验目的掌握测定尿素酶

木瓜蛋白酶的酶活测定方法

  25℃恒温条件下,取25mL烧杯装在pH自动滴定仪上,加底物溶液3.75mL、3mol/L氯化钠溶液2.50mL、重蒸馏水1.25mL,混合后加入待测酶液后立即计时,用0.1mol/L氢氧化钠在电磁搅拌下连续滴定以保持pH6.2,记下每分钟所耗0.01mol/L氢氧化钠毫升数。同时进行空白校正。

α淀粉酶的测定实验

实验方法原理将淀粉切割成小片段和麦芽糖。不同来源的 α-淀粉酶的最适 pH 不同。从 Bacillus subtilis 中提取的细菌酶在 pH 5.5 时有其最高活性,并且必须采用适合的缓冲溶液。实验材料4-α-D-葡聚糖葡聚糖水解酶试剂、试剂盒 磷酸钾麦芽糖溶液淀粉溶液二硝基水杨酸试剂仪器、耗材

酶免疫测定的应用

  几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用酶免疫测定检测。  均相酶免疫测定主要用于药物和小分子物质的检测。  非均相免疫测定中的ELISA在多种物质的检测中被广泛的使用。

酶免疫测定的应用

  酶免疫测定具有高度的敏感性和特异性,几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用以检测。它的最小可测值达ng甚至pg水平。与放射免疫分析相比,酶免疫测定的优点是标记试剂比较稳定,且无放射性危害。因此,酶免疫测定的应用日新月异,酶免疫测定的新方法、新技术不断发展。但酶免疫测定在医学检验中的普及应归功于商品试

脂肪酶的测定实验

pH 稳定计(自动滴定器)法 荧光分析法             实验方法原理 实验材料 酶样品

磷酸酶-a-的测定实验

基本方案             实验方法原理 4-α-D-葡聚糖:正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。酶断裂多糖的α-1,4-糖苷键:(葡萄糖)n+Pi →(葡萄糖)n-1+葡萄糖-1

酶免疫测定的概述

  酶免疫测定(enzyme immunoassay,EIA),是将酶催化作用的高效性与抗原抗体反应的特异性相结合的一种微量分析技术。酶标记抗原抗体后形成的酶标记物,既保留抗原或抗体的免疫活性,又保留酶的催化活性。当酶标记物与待测样品中相应的抗原或抗体相互作用时,可形成酶标记抗原抗体复合物。利用复合

淀粉酶(AMY)测定方法

(1)碘-淀粉比色法测定。(2)对-硝基苯麦芽七糖苷法。PNP(对硝基苯酚)的生成引起405nm处吸光度的上升,上升速率与AMY的活力成正比。(3)2-氯-4-硝基苯麦芽三糖苷法。

醛缩酶的测定实验

暂未评分点评实验,有机会获丁当奖励 +收藏醛缩酶的测定实验标签:                                    D-果糖-1                                    6-二磷酸 磷酸丙糖-裂解酶 果糖-二磷酸醛缩酶 酶学实验手册 第三章   

乳酸脱氢酶的测定

  乳酸脱氢酶催化乳酸氧化为丙酮酸为可逆反应,正反两个方向的反应均能测定。但逆反应测得的乳酸脱氢酶活性比正反应高得多,所以采用不同的测定方法得出的结果也会不同。

植物组织ATP酶活性测定

一、原理 ATP酶(adenosinetriphosphatase)可催化ATP水解生成ADP及无机磷的反应,这一反应放出大量能量,以供生物体进行各需能生命过程。它存在于生物细胞的多个部位,比如细胞质膜上,叶绿体  类囊体膜上,对整个生命的维持有着重要的作用。在生物学研究中,常通过测定酶促反应

酶免疫测定的应用

  酶免疫测定具有高度的敏感性和特异性,几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用以检测。它的最小可测值达ng甚至pg水平。与放射免疫分析相比,酶免疫测定的优点是标记试剂比较稳定,且无放射性危害。因此,酶免疫测定的应用日新月异,酶免疫测定的新方法、新技术不断发展。但酶免疫测定在医学检验中的普及应归功于商品试

乳酸脱氢酶的测定

  乳酸脱氢酶催化乳酸氧化为丙酮酸为可逆反应,正反两个方向的反应均能测定。但逆反应测得的乳酸脱氢酶活性比正反应高得多,所以采用不同的测定方法得出的结果也会不同。

胃蛋白酶测定方法

胃蛋白酶测定可用于鉴别神经性低酸症,当过少或缺乏时,前者胃蛋白酶的含量有时正常而后者盐酸与胃蛋白酶同时缺乏。一般认为胃性低酸症是由于胃粘膜的重症器质性变化所致,特别是对于恶性贫血、无酸症、无胃蛋白酶分泌是诊断上的重要所见。慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二脂肠炎等胃蛋白酶的分泌常减少。一般胃酸基础分泌高

脂肪酶的测定实验

实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 氯化钠氯化钙牛血清蛋白牛磺胆酸钠橄榄油-阿拉伯树胶乳胶脂肪酶NaOH仪器、耗材 自动滴定器实验步骤 实验混合物:5 ml 橄榄油-阿拉伯树胶乳胶5 ml H2O2 m l 3.0 mol/L NaCl1 ml 0.075 mol/L 氯化钙2 ml 0.5

免疫酶测定法简介

免疫酶测定法是一种用酶标记一抗或二抗检测特异性抗原或抗体的方法。本法将抗原抗体反应的高度特异性与酶对底物高效催化作用结合起来,根据酶作用底物后显色,以颜色变化判断实验结果。目前常用的方法有酶免疫组化技术和酶联免疫吸附试验(ELISA)。前者测定细胞表面抗原和组织内的抗原,后者主要测定可溶性抗原或抗体

单胺氧化酶活性测定

实验材料 大鼠试剂、试剂盒 磷酸钠缓冲液蒸馏水盐酸苯乙胺甲苯5-羟色胺双草酸盐β-乙基-苯乙胺盐酸盐苯-醋酸乙酯闪烁液仪器、耗材 制冰机水浴锅试管试管架计数瓶离心机离心管移液枪漩涡振荡仪

异相酶免疫测定介绍

  异相酶免疫测定:又分为液相和固相酶免疫测定。www.med66.com  液相酶免疫测定:医学教|育网其测定灵敏度与放射免疫方法相近,近年有取代放射免疫方法的趋势。  固相酶免疫测定:如常用的酶联免疫吸附试验(ELISA)。

腺苷脱氨酶的测定

  腺苷脱氨酶(adenosine deaminase, ADA):在红细胞和T细胞中ADA含量最丰富,结核性胸膜炎(Tuberculous Pleural Effusion,TPE)时,T细胞活性增强,故胸水ADA多>45 U/L,有助于区别结核性或癌性胸水。我们就此曾进行荟萃分析[1],旨在更加