聚合酶链式反应(PCR)扩增仪的分类

普通的PCR仪一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,又叫传统的PCR仪。用途:主要是做一些简单的、对单一退火温度的目的基因进行扩增。(1)梯度PCR仪一次PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),通常为12种温度梯度的普通PCR仪。用途:研究未知DNA退火温度的扩增。(2)原位PCR将具有细胞定位能力的原位杂交技术运用于从细胞内靶DNA的定位分析,在细胞内实现基因扩增的普通PCR仪。用途:用于在细胞的靶DNA所在位置上进行基因扩增。2.实时荧光定量PCR仪PCR扩增时加入的引物利用荧光素进行标记,使引物和荧光探针同时与模板进行特异性结合,扩增结果通过荧光信号采集系统实时采集信号并输送到计算机分析处理系统,实时输出量化结果,这样的PCR仪叫实时荧光定量PCR仪。(1)金属板式实时定量PCR仪可作为普通PCR仪使用可带梯度功能可容纳的样本量大,无需特殊耗材温度均一性欠佳,有边缘效应,标准曲线的反应条件难以做......阅读全文

聚合酶链式反应(PCR)扩增仪的分类

普通的PCR仪一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,又叫传统的PCR仪。用途:主要是做一些简单的、对单一退火温度的目的基因进行扩增。(1)梯度PCR仪一次PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),通常为12种温度梯度的普通PCR仪。用途:研究未知DNA退火温度的扩增。(2)

PCR基因扩增仪的分类介绍

PCR基因扩增仪的类型:PCR基因扩增仪的设计均按照DNA变性、复性和延伸三个环节以及温度均恒、传导快和升降温迅速等原则,结合传感技术、微电子技术和电子计算机等技术发展而成的自动化和智能化的仪器设备,下面仅从保温和变温的角度介绍几类PCR仪的原理。1. 水浴式PCR基因扩增仪 水浴式PCR基因扩增仪

PCR基因扩增仪的分类介绍

PCR基因扩增仪的类型:PCR基因扩增仪的设计均按照DNA变性、复性和延伸三个环节以及温度均恒、传导快和升降温迅速等原则,结合传感技术、微电子技术和电子计算机等技术发展而成的自动化和智能化的仪器设备,下面仅从保温和变温的角度介绍几类PCR仪的原理。1. 水浴式PCR基因扩增仪 水浴式PCR基因扩增仪

PCR仪(基因扩增仪)的分类介绍

PCR仪(基因扩增仪)的类型:PCR仪(基因扩增仪)的设计均按照DNA变性、复性和延伸三个环节以及温度均恒、传导快和升降温迅速等原则,结合传感技术、微电子技术和电子计算机等技术发展而成的自动化和智能化的仪器设备,下面仅从保温和变温的角度介绍几类PCR仪的原理。1. 水浴式PCR仪(基因扩增仪) 水浴

聚合酶链式反应(PCR)PCR不扩增的原因

1、PCR扩增体系问题。用其他正在进行的且扩增正常的模板和引物证明PCR扩增体系没有问题,即PCR反应混合物、水、取液器、PCR仪、操作等都是好的(阳性对照)2、引物问题。用以前扩增产物做模板(稀释50倍),证明引物没有问题3、只是模板问题了。因为样本降解的可能性比引物降解的可能性高得多。也可能是样

详述PCR仪(基因扩增仪)的分类介绍

PCR仪(基因扩增仪)的类型:PCR仪(基因扩增仪)的设计均按照DNA变性、复性和延伸三个环节以及温度均恒、传导快和升降温迅速等原则,结合传感技术、微电子技术和电子计算机等技术发展而成的自动化和智能化的仪器设备,下面仅从保温和变温的角度介绍几类PCR仪的原理。1. 水浴式PCR基因扩增仪 水浴式PC

详述PCR基因扩增仪的分类介绍

 PCR基因扩增仪的类型:PCR基因扩增仪的设计均按照DNA变性、复性和延伸三个环节以及温度均恒、传导快和升降温迅速等原则,结合传感技术、微电子技术和电子计算机等技术发展而成的自动化和智能化的仪器设备,下面仅从保温和变温的角度介绍几类PCR仪的原理。1. 水浴式PCR基因扩增仪 水浴式PCR基因扩增

聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆

概 述   PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤: (1) 变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链; (2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上

聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆

 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤:(1) 变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链;(2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目的序列通过

聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆

第一节 概 述 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤: (1) 变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链; (2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃

聚合酶链式反应体外扩增DNA:PCR

聚合酶链式反应体外扩增DNA1.    按以下次序,将各成分加在0.5 ml灭菌离心管、扩增管或灭菌滴定板的孔内混合:10×扩增缓冲液                               5μl20 mmol/L 4种dNTP混合液(pH 8.0)           1μl20 μmol/

聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段

一、实验目的1.学习PCR基因扩增的基本原理和操作方法。2.理解PCR基因扩增在分子生物实验技术中的重要性。3.了解引物设计的一般要求。二、实验原理多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR ):原理类似于DNA的变性和复制过程,即在高温(93-95℃)下,待扩增的

聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆(四)

[注意]1、纯化树脂在使用前必须充分混匀。   2、PCR产物中矿物油应尽量吸去,否则会影响提取DNA的 产量。四、载体加dT尾1、将1μg pUC19用SmaⅠ全酶切。   2、在小管中按上述PCR反应,加入各种混合物,除将4μl 4种dNTP改为4μl 25mM dTTP。   3、加入1μl(

聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆(三)

材料、设备及试剂一、材料不同来源的模板DNA。二、设备移液器及吸头,硅烷化的PCR小管,DNA扩增仪(PE公司),琼脂糖凝胶电泳所需设备(电泳槽及电泳仪),台式高速离心机。三、试剂:1、10×PCR反应缓冲液:500mmol/L KCl, 100mmol/L Tris·Cl, 在25℃下, pH9.

聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆(一)

PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤:(1) 变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链;(2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目

聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆(二)

二、PCR反应参数1、变性:在第一轮循环前,在94℃下变性5-10min非常重要,它可使模板DNA完全解链,然后加入Taq DNA聚合酶(hot start),这样可减少聚合酶在低温下仍有活性从而延伸非特异性配对的引物与模板复合物所造成的错误。变性不完全,往往使PCR失败,因为未变性完全的DNA

PCR扩增仪

聚合酶链锁反应,Polymerase chain reaction,简称PCR,是一种分子生物学技术,用于扩增特定的DNA片段,这种方法可在生物体外进行,不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。PCR这项技术,被广泛地运用在医学和生物学的实验室,例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊

详述PCR基因扩增仪的三种分类简介

 PCR基因扩增仪的设计均按照DNA变性、复性和延伸三个环节以及温度均恒、传导快和升降温迅速等原则,结合传感技术、微电子技术和电子计算机等技术发展而成的自动化和智能化的仪器设备,下面仅从保温和变温的角度介绍几类PCR仪的原理。PCR基因扩增仪的类型:1. 水浴式PCR基因扩增仪 水浴式PCR基因扩增

PCR基因扩增仪的原理+分类+操作+常见故障

  一、原理  PCR技术的本质是体外核酸扩增,加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在Taq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复 “变性→退火→引物延伸”过程至25~40个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数。  二、分类  1

PCR扩增仪简介

  PCR扩增仪又称为PCR基因扩增仪、PCR核酸扩增仪、聚合酶链反应核酸扩增仪,是利用PCR(Polymerase chain reaction,聚合酶链反应)技术对特定DNA扩增的一种仪器设备,被广泛运用于医学、生物学实验室中,例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病的诊断、基因复制

PCR扩增仪步骤

一般的PCR反应由20到35个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:利用高温(93-98℃)使双链DNA分离(熔解)。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟。在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单

PCR扩增仪的选择

1971年Kleppe等人在Journal of molecular biology上发表文章首次准确、精炼、客观的阐述了PCR方法,1976年一种从嗜热水生菌(Thermus aquaticus)分离得到的热稳定的DNA依赖的DNA聚合酶的应用大大增加了PCR的效率。而现今所发展出来的PCR则是源

PCR扩增仪的选择

1971年Kleppe等人在Journal of molecular biology上发表文章首次准确、精炼、客观的阐述了PCR方法,1976年一种从嗜热水生菌(Thermus aquaticus)分离得到的热稳定的DNA依赖的DNA聚合酶的应用大大增加了PCR的效率。而现今所发展出来的PCR则是源

PCR扩增仪的步骤

一般的PCR反应由20到35个循环组成,每个循环包括以下3个步骤:利用高温(93-98℃)使双链DNA分离(熔解)。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前,通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离,仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟。在DNA双链分离后,降低温度使得引物可以结合于单

PCR扩增仪的选择

1971年Kleppe等人在Journal of molecular biology上发表文章首次准确、精炼、客观的阐述了PCR方法,1976年一种从嗜热水生菌(Thermus aquaticus)分离得到的热稳定的DNA依赖的DNA聚合酶的应用大大增加了PCR的效率。而现今所发展出来的PC

PCR基因扩增仪四大分类和应用

 PCR仪即基因扩增仪,主要是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。PCR仪的原理为利用升温使DNA变性,用限制性内切酶使DNA双链解链,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制的目的。根据DNA扩增的目的和检测的标准可以将

PCR仪根据DNA扩增时升温介质的不同分类

  根据DNA扩增时升温介质的不同可以将PCR仪分为:变温铝块式PCR仪、水浴式PCR仪和变温式流式PCR仪。  1. 变温铝块式PCR仪  热源用电阻丝、导电热膜、热泵式珀尔帖半导体元件制作,让带有凹孔的铝块升温,用自来水、制冷压缩机或半导体降温。优点:温度传导快,各管的扩增一致性好;反应管规格一

PCR扩增仪的选择一

1971年Kleppe等人在Journal of molecular biology上发表文章首次准确、精炼、客观的阐述了PCR方法,1976年一种从嗜热水生菌(Thermus aquaticus)分离得到的热稳定的DNA依赖的DNA聚合酶的应用大大增加了PCR的效率。而现今所发展出来的PCR则是源

PCR基因扩增仪的用途

  西安天隆科技有限公司DTC-3G型PCR基因扩增仪适用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction , PCR)为特征的、以检测D

PCR扩增仪的选择二

一、温度控制对普通PCR仪来说,温度控制指标主要是指温度的准确性、均匀性、以及升降温速度,对梯度PCR仪来说,除了温度的准确性和均匀性、升降温速度以外,还必须考虑仪器在梯度模式和标准模式下是否具有同样的温度特性。温度的准确性是指样品孔温度与设定温度的一致性,它直接关系到实验的成败。如果排除样品加入过