实验室分析方法反相液相色谱法概念介绍
反相液相色谱法(RPLC, reversed phase liquid chromatography)固定相的极性较流动相的极性弱的液相色谱法。......阅读全文
反相高效液相色谱2
方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱试剂、试剂盒甲醇n-丙醇反相硅胶TFA 乙腈溶剂体系仪器、耗材水浴超声波仪色谱加样器层析柱玻璃料末端接口环氧树脂流动池正向光学扫描检测器加热枪加样器液相色谱柱填充泵微柱聚丙烯离心管聚硅酸盐管蓝宝石切刀信号数据收集装置硅胶隔膜Teflon接头UV检测器实验步骤一
反相高效液相色谱1
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件实验材料蛋白质标样试剂、试剂盒乙睛(HPLC级)去离子水(HPLC级)三氟乙酸(TFA)仪器、耗材HPLC 色谱系统反相柱实验步骤1.进行空白或对照层析谱分析(即在步骤①中不加样)。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系
反相色谱法的简介
“反相”这个词有着其历史背景。在1970年代,大多数液相色谱是在未修饰的氧化硅或氧化铝上完成的,他们表面的化学性质是亲水性的,对于极性化合物具有更强的亲和力,因此也叫做“正相”(正常)色谱。若采用烷基链共价键合到支持表面上,则会倒换洗脱顺序。在反相色谱法中,极性化合物先被洗脱出来,而非极性化合物被保
反相高效液相色谱6
方案6 计算机辅助方法优化梯度条件的 RP-HPLC 蛋白质分离实验实验材料HPLC 肽标准品蛋白质样品试剂、试剂盒丙酮乙腈(HPLC级)磷酸磷酸二氢钠硫脲硝酸钠三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置色谱柱洗脱液瓶Hamilton 玻璃注射器氮气量筒微量离心机流动相过滤装置实验步骤一、配制流动相以
反相高效液相色谱4
方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验实验材料用于分析的肽或蛋白试剂、试剂盒丙酮乙腈(HPLC级)2 -丙醇乙醇硝酸钠硫酸钠硫脲三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置离心机锥形瓶玻璃容器Hamilton 玻璃注射器氮气冷冻干燥机流动相过滤装置氦气制备型 HPLC 装置实验步骤一、
反相高效液相色谱3
方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验实验材料大分子量非极性多肽或蛋白质仪器、耗材层析柱HPLC 系统冷冻干燥器微量离心机标准的或专用 HPLC 仪器氮气实验步骤一、用于 RP-HPLC 纯化的大分子非极性多肽或蛋白质样品的制备1.将多肽样品(如果蛋白质是通过固相化学合成法得到的,质量在 30~5
反相高效液相层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材 层析柱HPLC进样器实验步骤 1. 用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂,梯度从100%有机溶剂到100%水,流速1 ml/min,持续15 min 以上。 2. 以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子至柱压和光吸收值达到恒定。用1
实验室前处理技术热浴的概念和方法介绍
热浴就是把装有待加热物质置的容器置于热浴物质内,让热浴物质的温度缓慢升高到一定程度,再让其缓慢冷却,从而达到改善容器热传递性能,受热均匀的效果。加热物体时,人们通常将待加热物质置于容器内,容器置于热源上。但有些容器,如玻璃容器和陶瓷容器,若直接置于热源上,则往往因受热不均,温升过快,发生炸裂,或因热
实验室常用实验方法介绍浓缩的基本概念
①使溶液中溶剂蒸发溶液浓度增大的过程。广泛应用于化学、食品、生物制药等工业中。②指物体中使部分含量减少,另一部分含量增加的过程。如浓缩铀等。③泛指用一定方法减少事物中不需要的部分,从而使需要部分的相对含量增加:浓缩铀|文学要求浓缩,集中,概括,凝练。④矿粒借助自身的重力从矿浆中沉淀出来的脱水过程。浓
舜宇恒平仪器乳制品检测解决方案
近年来,乳制品的质量安全问题受到越来越多的关注,为了加强对乳制品的质量监管,多项关于乳制品的检测标准相继出台。上海舜宇恒平科学仪器有限公司参考各项国家标准,针对乳制品中的营养物质、添加剂以及违禁物的检测,推出符合国家标准要求的解决方案,以满足广大用户的应用需求。
关于食品化学分析中HPLC方法
自HPLC仪问世以来,其硬件技术、分析方法及应用研究发展迅速。本文仅就在食品化学分析中,HPLC分析技术与应用进展概述如下。 HPLC分析方法进展 ● 液-固色谱法(LSC) LSC是根据组分基团对吸附剂表面亲和力的大小,决定了其保留程度。在LSC色谱中应用广泛的极性固定相是硅胶。
ACQUITY-UPLC-MClass用于微升级二维反相/反相肽段分离
Matthew A. Lauber、 Stephan M. Koza 和 Kenneth J. Fountain目的 证明ACQUITY UPLC®M-Class系统和配套的色谱柱进行微升级2D-RP/ RP肽段色谱的性能和重现性。 背景信息 微升级LC-MS方法在蛋白质组学领域得到了日益广泛的应
实验室分析仪器测汞仪的测量方法介绍
汞及其化合物属于剧毒物质,特别是有机汞化合物。天然水中含汞极少,一般不超过0.1ug/L。我国饮用水标准限值为0.001mg/L。大多院校以及科研单位都选用测汞仪来测量,以下就有几种测汞仪的测量方法:(1)冷原子吸收法,该方法适用于各种水体中的汞的测定,其最低检测浓度为0.1-0.5ug/L汞(因仪
实验室分析方法典型热分析法介绍DTA、DSC理论差异
DTA理论监视样品与参比物之间的温度差作为温度的函数。功率补偿型DSC(Differential Scanning Calorimetry)理论在样品受到程序温度的控制下,DSC用来监视样品吸收或释放热流与参比物吸收或释放热流之间的差别。功率补偿型DSC原理图热流型DSC(Differential
实验室分析方法典型热分析法介绍热机械分析(DMA)
动态热机械分析是通过对材料样品施加一个已知振幅和频率的振动,测量施加的位移和产生的力,用以精确测定材料的粘弹性,杨氏模量(E*)或剪切模量(G*)。 可分为:1、热膨胀法:热膨胀法是在程序控温下,测量物质在可忽略负荷时尺寸与温度关系的技术。2、静态热机械分析法:静态热机械分析法是在程序控温下,测量物
实验室分析仪器气质联用定量分析方法介绍
定量分析主要有三种方法,面积归一化法、外标法和内标法。 面积百分率法(面积归一) 各组分浓度以面积百分率表示,该结果可以确认大概的浓度,但有误差。 特点及要求: 简单,但是定量准确性和重复性差。 仅适用于试样中所有组分全出峰的情况。 外标法该法是应用最广泛的方法之一,其误差
实验室分析方法气相色谱法的进样方式介绍
气相色谱分析主要有填充柱进样和毛细管进样两种方式。1.填充柱进样填充柱进样口是目前最为常用,也是最简单、最易操作的GC进样口,该进样口的作用就是提供一个样品气化室,所以气化的样品都被载气带入色谱柱进行分离。进样口可连接玻璃或不锈钢填充柱,进样口温度应接近于或略高于样品中待测高沸点组分的沸点。内径为2
什么是正相分配色谱和反相分配色谱
正相色谱法:当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法,主要用于极性物质的分离分析;反相色谱法:当流动相的极性大于固定相的极性时称反相色谱法,主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法(HPLC)。其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不
什么是正相分配色谱和反相分配色谱
正相色谱法:当流动相的极性小于固定相的极性时称正相色谱法,主要用于极性物质的分离分析;反相色谱法:当流动相的极性大于固定相的极性时称反相色谱法,主要用于非极性物质或中等极性物质的分离分析。以高压液体为流动相的液相色谱分析法称高效液相色谱法(HPLC)。其基本方法是用高压泵将具有一定极性的单一溶剂或不
实验分析方法反相色谱的固定相强极性化合物分离
在较强极性化合物反相色谱分离中,由于流动相有机溶剂的比例相对较低,固定相表画的烷基链会发生一定程度的收缩,使得化合物的保留时间不稳定或分离效果变差。 Waters公司采用三步反应制备了包埋氨基甲酸酯的C8、C10、C12、C14、C16和C18系列固定相, 其他公司等也采用低酸度的超纯硅胶微球为基质
烧烤中的苯并(a)芘检测
试问,炎炎夏日,还有什么能比加完班去撸个串更惬意的事了? 如果有,那就再来一打!打包带走! 可是,每当有人说要去吃烧烤的时候 总有人会一桶冰水泼下来—— “烧烤有毒”,“烧烤里有苯并芘”,“会致癌” 我们在讨论烧烤会致癌的时候,讨论的基本上是在烧烤过程中形
实验室分析化学位移基础知识化学位移的概念
质子或其他种类的磁性核由于在分子中所处的化学环境不同而在不同的磁场强度下显示共振峰的现象称为化学位移。
实验室分析仪器自旋偶合与自旋分裂的基本概念
在有机化合物分子中,每一个原子核的周围除了电子以外,还存在着其他带正电荷的原子核,其中的自旋量子数不等于零的原子核相互间存在着干扰作用,这种干扰作用不影响磁性核的化学位移,但对核磁共振图谱的形状有着显著的影响。核磁矩自旋间的相互干扰作用叫作自旋偶合,由自旋偶合引起的谱线增多的现象叫作自旋分裂。
如何从正相柱换为反相柱
同一根柱子可以从正相转换为反相,反相高效液相色谱法只是高效液相色谱法的一个分支,用甲醇水做流动相代替正己烷就直接转换成了反相HPLC。
如何从正相柱换为反相柱
同一根柱子可以从正相转换为反相,反相高效液相色谱法只是高效液相色谱法的一个分支,用甲醇水做流动相代替正己烷就直接转换成了反相HPLC。
常用的分离方法沉淀的概念
沉淀(precipitation)操作则是将溶液中的目的产物或主要杂质以无定形固相形式析出再进行分离的单元操作。 沉淀法有等电点沉淀法、盐析法、有机溶剂沉淀法等。
核转录终止分析的方法概念
中文名称核转录终止分析英文名称nuclear run-off assay;run-off transcription assay定 义用分离的细胞核研究其对特定基因转录作用的一种类似核连缀分析的方法,但更侧重于测定转录的终止位置,体外转录可进行到模板最末端,以分析转录本的长度。应用学科生物化学与分
末端分析的概念和产业方法
中文名称末端分析英文名称terminal analysis定 义常指蛋白质肽链两端氨基酸的分析。对于N端分析有三种方法:桑格-库森法、丹璜酰法和埃德曼降解法,后者可连续测入,并可自动化操作;对于C端分析,主要用外肽酶,如一些羧肽酶,将肽链的羧基末端氨基酸切下分析。应用学科生物化学与分子生物学(一级
仪器分析方法的概念和种类
仪器分析方法:以物质的物理和物理化学性质为基础的分析方法称物理和物理化学分析法。这类方法都需要较特殊的仪器,通常称为仪器分析方法。最主要的仪器分析方法有以下几种:1、光学分析法根据物质的光学性质所建立的分析方法。主要包括:分子光谱法、分光分析法、分子荧光及磷光分析法;原子光谱法,如原子发射光谱法、原