实验室分析方法反相液相色谱法概念介绍

反相液相色谱法(RPLC, reversed phase liquid chromatography)固定相的极性较流动相的极性弱的液相色谱法。......阅读全文

实验室分析仪器凝胶色谱仪的用途和概念

凝胶过滤色谱一般用于分离水溶性的大分子,如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。

实验室分析方法DSC基本结构

差示扫描量热仪主要由加热系统、程序控温系统、气体控制系统、制冷设备等几部分组成。如下图所示。 1)加热系统加热方式:电阻元件、红外线辐射和高频振动,常用电阻元件。炉腔内有一传感器置于防腐蚀的银质(纯银导热性好,受热均匀)炉体中央。DSC传感器的热电偶以星形方式排列,可单独更换。 2)程序控温系统其一

实验室分析方法质谱法的应用

质谱法特别是它与色谱仪及计算机联用的方法,已广泛应用在有机化学、生化、药物代谢、临床、毒物学、农药测定、环境保护、石油化学、地球化学、食品化学、植物化学、宇宙化学和国防化学等领域。用质谱计作多离子检测,可用于定性分析,例如,在药理生物学研究中能以药物及其代谢产物在气相色谱图上的保留时间和相应质量碎片

实验室分析方法光谱法

光谱法是一种基于物质与辐射能作用时,分子发生能级跃迁而产生的发射、吸收或散射的波长或强度进行分析的方法。

实验室分析方法质谱法的原理

使试样中各组分电离生成不同荷质比的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器,利用电场和磁场使发生相反的速度色散——离子束中速度较慢的离子通过电场后偏转大,速度快的偏转小;在磁场中离子发生角速度矢量相反的偏转,即速度慢的离子依然偏转大,速度快的偏转小;当两个场的偏转作用彼此补偿时,它们的轨道

实验室分析方法质谱法的定义

是将待测物质置于离子源中电离形成带电离子,让离子加速并通过磁场或电场后,离子将按质荷比(m/z)大小分离,形成质谱图。依据质谱线的位置和质谱线的相对强度建立的分析方法称为质谱法。

高效液相色谱法定量测定介绍内标法

采用不加校正因子的峰面积法。取供试品,按各品种项下规定的方法配制不含内标物质的供试品溶液,注入仪器,记录色谱图Ⅰ;再配制含有内标物质的供试品溶液,在同样的条件下注样,记录色谱图Ⅱ。记录的时间除另有规定外,应为该品种项下规定的内标峰保留时间的倍数,色谱图上内标峰高应为记录仪满标度的30%以上,否则应调

关于高效液相色谱法的实例说明介绍

  高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于400以上)的有机物(这些物质几乎占有机物总数的75%~80%)原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计,在已知化合物中,能用气相色谱分析的约占20%,而能用液相色

液相色谱法的基本原理介绍

  色谱法作为一种分离分析方法,其最大的特点在于能将一个复杂的混合物分离为各个有关的组成,然后一个个地检测出来。一般色谱过程中不同组分在相对运动、不相混溶的两相间进行交换,相对静止的一相称为固定相,另一相对运动的相称为流动相,利用吸附、分配、离子交换、亲和力或分子大小等性质的微小差别,经过连续多次在

高效液相色谱法液—固分离原理介绍

  流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:Xm nSa ====== Xa nSm  式中

高效液相色谱法正反色谱的相关介绍

  正相色谱法  采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。  反相色谱法  一般用非极性固定相(如

高效液相色谱法仪器的梯度洗脱介绍

  类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种:  a.低压梯度(也叫外梯度):在常

谷胱甘肽的高效液相色谱法测量相关介绍

  原理:高效液相色谱法是由于溶质在同定相和流动相之间的分配系数、亲和力、分子大小、吸附能力等不同,而进行连续分离的过程。  操作步骤:  ①色谱条件  色谱柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)。  流动相:磷酸二氢钠和辛烷磺酸钠混合溶液(磷酸二氢钠3.0 g、

关于高效液相色谱法的历史发现介绍

  1903年俄国植物化学家茨维特(Tswett)首次提出“色谱法”(Chromatography)和“色谱图”(Chromatogram)的概念。茨维特使用色谱法 chromatography (来自希腊字, chroma 意思是颜色, graphy 意思是记录  -直译为颜色记录)来描述他的彩色

高效液相色谱法的梯度洗脱的介绍

  类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提高分离效果。梯度洗提可以分为两种:  a.低压梯度(也叫外梯度):在常

高效液相色谱法检测蓖麻毒素的介绍

  高效液相色谱检测将待测物质溶于流动相中,利用色谱柱固定相将流动相的组成进行分离,对检测器收集到的峰信号转换为待测物质浓度,进而来判定待测物质含量的一种方法,具有速度快、分辨率高、灵敏度高等特点。采用PROTEIN KW-802.5凝胶色谱柱,在柱温25℃、流速1mL/min、进样量10μL的条件

关于谷胱甘肽的高效液相色谱法检测介绍

  一、谷胱甘肽的高效液相色谱法检测原理:高效液相色谱法是由于溶质在同定相和流动相之间的分配系数、亲和力、分子大小、吸附能力等不同,而进行连续分离的过程。  二、谷胱甘肽的高效液相色谱法检测的操作步骤:  ①色谱条件  色谱柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)

实验室分析方法气体钢瓶及其使用方法

气体钢瓶是贮存压缩气体的高压容器,其容积一般为40~60 L,最高工作压力为15MPa(150atm),最低的也在0.6MPa(6atm)以上,标准高压气体钢瓶是按国家标准制造而成,在钢瓶肩部应有下述标记,即:制造厂、制造日期、气瓶型号及编号、气瓶重量、气体容积、工作压力、水压试验压力、水压试验日期

实验室分析方法热重数据的表示方法

由热重法测得的记录为热重曲线(TG曲线),一般以质量G为因变量,温度T为因变量。从热重法衍生出微商热重法(DTG),它是研究物质的质量变化速率(dm/dt)与温度T或时间t的关系;它的记录即为微商热重曲线(DTG曲线),以质量变化率为自变量,因变量为温度或时间。TG曲线与DTG曲线有一定的联系。DT

实验室分析方法液相色谱的定量方法—定量方法

峰高和峰面积测量仅是对检测信号的一种响应该响应需同组分的浓度或者质量结合方可完成定量方法。无论在相同的还是不同的色谱条件下进行的试验,均要采取一定的手段加以校正,才可能得到准确的定量结果。主成分自身对照法、峰面积归化、内标法、外标法及标准加入法是HPLC定量分析中常用的校正技术。不加校正因子的主成分

超纯水有多重要?

先进、的实验室分析方法搭配高精尖的科学仪器得出的实验结果必然是越来越。其实,要得到高质量的检测数据,实验用试剂起着决定性意义。比如超纯水就是起决定性作用的实验材料。近几年来,实验室分析技术有了很大的改进。与此同时,检测仪器设备也越来越精密、灵敏,这就要求所使用的试剂、稀释剂和水要达到很高的质量标准。

反相色谱色谱柱的选择

  色谱柱是HPLC系统非常关键的一部分,随着色谱技术的发展,它也不断地更新换代,长度变得越来越短,填料颗粒也越来越细。现在常用的色谱柱长度在30~250 mm,颗粒直径在1.6~5μm。颗粒类型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多键合相选择的优点,表面多孔具有反压低、峰形好的优

反相高效液相色谱5

方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合物进行脱盐实验实验材料蛋白质或多肽样品试剂、试剂盒乙腈(HPLC级)2 -丙醇硝酸钠硫脲三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置色谱柱洗脱液瓶Hamilton 玻璃注射器氮气量筒微量离心机流动相过滤装置实验步骤一、流动相的配制1.配制缓冲液 A(弱流

什么是反相色谱法?

反相色谱法(英语:Reversed-phase chromatography,RPC)反相色谱法(IGC)一反普通气相色谱的测定方式。以被测的高分子为固定相、以惰性气体为流动相,为了测定需要,在流动相中加入一些探针分子,它们是挥发性的低分子。将探针分子注入气化室气化后,由载气带入色谱柱,测定它们在两

反相液相色谱仪种类

反相液相色谱仪种类有多种。1、按分离目的可分:实验室反相液相色谱仪和工业反相液相色谱仪。2、按色谱柱形状可分:反相液相填充柱色谱仪和反相液相毛细管柱色谱仪。3、按分离规模可分:微型反相液相色谱仪、小型反相液相色谱仪和大型反相液相色谱仪。4、按分离对象的离子性质可分:阴离子反相液相色谱仪和阳离子反相液

反相色谱柱的影响因素

  液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相色谱柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相色谱柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱,GPC柱,聚合物填料

反相高效液相色谱概述

  结果与保留值之间的关系:利用RP-HPLC 分离多肽首先得确定不同结构的多肽在柱上的保留情况。为了获得一系列的保留系数,Wilce 等利用多线性回归方法对2106 种肽的保留性质与结构进行分析,得出了不同氨基酸组成对保留系数影响的关系,其中极性氨基酸残基在2~20 氨基酸组成的肽中,可减少在柱上

常见色层分析反相层析

反相层析在吸附层析中,高极性物质在层析柱上吸附较牢,洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类,洗脱液用极性强的溶剂,如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附,最先洗下来,得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反,故称为反相层析

反相高效液相层析实验

多肽和蛋白质的分离             实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒

蛋白纯化反相柱的选择

HP-RPC的选择首先要看蛋白质的分子量,20kDa左右的一般用C4或C8,再小一点的可以用C18,太大的蛋白并不适于反相分离。C18通用性最好,但是有时候保留过强可能会导致收率较低。如果目的蛋白不是很针对,可以考虑通用性最强的C18柱。一般来说,4.6mm的内径比较常见,250mm长的柱子比150