实验分析方法反相色谱的固定相的分类及使用
1.硅胶基质反相色谱固定相反相高效液相色谱中使用的固定相大多是各种烃基硅烷的化学键合硅胶。烷基链长可以是C2、C4、C6、C8、C16、C18和C2等,最常用的是C18(又称ODS),即十八烷基硅烷键合硅胶。键合烷基的链长对键合相的样品负荷量、溶质的容量因子及其选择性有不同的影响,当烷基键合相表面浓度(mol/m2)相同时,随着烷基链长增加,碳含量成比例增加,溶质保留值增加。199年, 某公司采用带有二丁基或异丙基等较大基团的卤代硅烷代替甲基鹵代烷进行表面硅烷化制备键合固定相,被称作SB技术。由于位阻效应,较大的疏水基团从空间上起到了保护硅胶表面的作用,可明显降低硅胶的水解作用,减少键合相的流失,固定相稳定使用pH值上限达到9.0以上。SB技术解决了C8、CN和Ph固定相,特别是CN固定相的稳定性问题。有些硅烷键合相(如C8、C18)的生产厂家采用被称为“封尾”( endcapping)的工艺,使硅胶担体表面完全反应(硅烷化)。......阅读全文
液固吸附色谱法固定相
液固吸附色谱法固定相 :通常是硅胶、氧化铝、活性炭等固体吸附剂。硅胶最常用。流动相: 极性大的试样需用极性强的洗脱剂,极性弱的试样宜用极性弱的洗脱剂。应用 :几何异构体分离和族分离,如农药异构体;石油中烷、烯、芳烃的分离。不适于强极性的离子型样品的分离,不适于分离同系物(因为它对相对分子质量的选择性
液固吸附色谱法固定相
液固吸附色谱法固定相 :通常是硅胶、氧化铝、活性炭等固体吸附剂。硅胶最常用。流动相: 极性大的试样需用极性强的洗脱剂,极性弱的试样宜用极性弱的洗脱剂。应用 :几何异构体分离和族分离,如农药异构体;石油中烷、烯、芳烃的分离。不适于强极性的离子型样品的分离,不适于分离同系物(因为它对相对分子质量的选择性
液相色谱仪固定相以硅胶作基质的反相色谱填料
液相色谱仪占世界液相色谱仪总量的75%,各领域日常分析所用的液相色谱柱大多为ODS柱。虽然已经开发出各种新的基质,如有机聚合物、石墨化碳、氧化铝、氧化钛和氧化锆,硅胶是反相液相色谱仪中应用最广泛的固定相。这是因为:1 硅胶有良好的机械强度;2 孔结构和比表面容易控制;3 比较好的化学温度型和热稳定性
如何选择反相键合相色谱法的固定相
键合相色谱法是由液-液色谱法即分配色谱发展起来的。键合相色谱法将固定相共价结合在载体颗粒上,克服了分配色谱中由于固定相在流动中有微量溶解,及流动相通过色谱柱时的机械冲击,固定相不断损失,色谱柱的性质逐渐改变等缺点。键合相色谱法可分为正常相色谱法和反相色谱法。反相色谱法在反相色谱法中共价结合到载体上的
色谱固定相分类图表
全屏显示表格固定相组成极性类似品牌应用SE-30OV-1OV-101二甲基硅氧烷非极性DB-1、HP-1、CP-SiL 5CB、SPB-1、007-1…烃类、胺类、酚类、农药、挥发油、硫化物等SE-54SE-525%苯基,1%乙烯基甲基硅氧烷非极性DB-5、HP-5、SPB-5、BP-5…药物、芳烃
气固填充柱色谱仪特点及常用固定相
气固填充柱色谱仪是以固体吸附剂为固定相的气相填充柱色谱仪。一、气固填充柱色谱仪特点: 1、保留时间长,色谱峰常不对称。 2、吸附剂批与批之间差异大,保留值和分离性能不稳定。 3、高温下一般吸附剂有催化性,不适合高沸点化合的分离。 4、品种少,选择余地不大。二、气固填充柱色谱仪常用固定相:
键合固定相分析色谱仪分类
键合固定相分析色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:化验室键合固定相分析色谱仪和工业键合固定相分析色谱仪。2、按流动相物理状态可分:气相键合固定相分析色谱仪和液相键合固定相分析色谱仪。3、按灵敏性可分:微量键合固定相分析色谱仪和痕量键合固定相分析色谱仪。4、按分离化合物的特点可分:同系物键合固定相分
高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法
高效液相色谱仪反相色谱柱的使用方法: 1.以0.5ml/min的流速用正己烷-乙腈(99∶1)洗涤柱体积10次,然后用氯仿、异丙醇和甲醇-水依次冲洗柱子。 2.以0.5ml/min的流速用30倍体积的ph 11.0氢氧化钠溶液注意ph值不得超过11.0冲洗柱然后立即用水0.5ml/min
实验分析方法常用固定相基质特征及常用种类
一、固定相基质的特征由于HPLC分离过程涉及物理化学作用、流体动力カ学、热力学过程等,因而对固定相基质材料的物理化学性质有比较严格的要求。液相色谱固定相基质可分为无机氧化物、有机聚合物和无机有机杂化材料三种类型。杂化基质作为一类新型液相色谱固定相基质,近两年发展较快,但大多尚处于研究阶段。无机和有机
快速开发反相固相萃取的方法的建议
Log P (分配系数)的定义:分配系数是一个非离子化的化合物在两种不互溶的溶剂中达到平衡后,在每种溶剂中的浓度比例。 一般用水(水相)和辛醇(Octanol疏水的有机溶剂)做为计算化合物分配系数两种溶剂。就是说,一个化合物加入这两种混合溶剂内,达到平衡后,然后用UV/Vis来定量计算化
快速开发反相固相萃取的方法的建议
Log P (分配系数)的定义:分配系数是一个非离子化的化合物在两种不互溶的溶剂中达到平衡后,在每种溶剂中的浓度比例。一般用水(水相)和辛醇(Octanol疏水的有机溶剂)做为计算化合物分配系数两种溶剂。就是说,一个化合物加入这两种混合溶剂内,达到平衡后,然后用UV/Vis来定量计算化合物在每一种
反相键合固定相色谱仪分离的疏溶剂理论
典型的反相键合固定相色谱仪是采用非极性键合固定相和极性流动相组成的色谱体系,固定相常用十八烷基(ODS或C18)键合固定相,流动相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相键合固定相色谱仪是采用弱极性或中等极性键合固定相和极性大于固定相的流动相组成的色谱体系。疏溶剂理论把非极性烷基键合固定相看作是在硅胶表面
反相色谱柱的平衡方法
反相色谱柱的平衡方法 聚合物基质的反相色谱柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物,制备而成具有不同孔径和粒径大小的各种规格的产品。TSKgel 聚合物基质反相色谱柱适用于较宽的pH范围,即使在高pH下也具有很好的重复性。这类色谱柱在pH2-12下表现出极其稳定的化学特性。因此,在硅胶基质色谱柱适用受限的
反相色谱柱的平衡方法
聚合物基质的反相色谱柱采用了聚甲基丙烯酸酯聚合物,制备而成具有不同孔径和粒径大小的各种规格的产品。TSKgel 聚合物基质反相色谱柱适用于较宽的pH范围,即使在高pH下也具有很好的重复性。这类色谱柱在pH2-12下表现出极其稳定的化学特性。因此,在硅胶基质色谱柱适用受限的碱性pH下仍然可以使用。
Tutorial-III:样品制备技术及反相高效液相色谱法固定相选择
Tutorial III:样品制备技术及反相高效液相色谱法固定相的选择Tutorial III:Sample Preparation Techniques and Reverse Phase HPLC Stationary Phase Selection Tutorial III:样品制备技术及反
实验室分析方法反相液相色谱法概念介绍
反相液相色谱法(RPLC, reversed phase liquid chromatography)固定相的极性较流动相的极性弱的液相色谱法。
色谱分析技术(高压液相色谱、亲和色谱法和吸...(一)
色谱分析技术(高压液相色谱、亲和色谱法和吸附色谱法)高压液相色谱Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色谱的设想,然而直到六十年代后期,由于各种技术的发展,高效液相色谱才付诸实现。这种色谱技术曾被称为高速液相色谱(HighSpeed Liquid Chromatography)
常规反相色谱柱安装及使用维护指南
何谓常规反相色谱柱?在硅胶或杂化基质颗粒上键合了如C18、C8、C4或苯基等键合相的色谱填料所装填的色谱柱,按反相色谱条件进行操作和分离。反相是液相色谱中zui常使用的分离模式,而C18柱是zui常使用的反相色谱柱之一。新色谱柱开启和安装的推荐步骤:使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,确保系统干净,不
高效液相色谱仪固定相的分类
高效液相色谱仪固定相的分类有多种。一、按承受压力能力分类:1、刚性固体:刚性固体以二氧化硅为基质,可承受 7×108~1×109Pa 的高压,可制成直径、形状和孔隙度不同的颗粒。如果在二氧化硅表面键合各种官能团,可扩大应用范围。目前使用最广泛的固定相。2、硬胶:硬胶由聚苯乙烯与二乙烯苯基交联而成,可
反相高效液相色谱柱的原理及使用维护
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能
固相萃取反相固相萃取
反相固相萃取反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物通常是非极性的或极性较弱的,主要是靠非极性-非极性相互作用,是范德华力或色散力。
实验分析方法HPLC分离固定相基质的形态
目前HPLC分析中常用的几种形态的固定相如图1所示,主要包括全多孔微球、薄売型微球、灌流色谱固定相和整体材料,其中由于全多孔微球固定相具有能够很好地兼顾柱效、样品容量、使用寿命等众多理想的性质,应用最为普遍。图1 HPLC的微粒类型(a)全多孔微球;(b)薄壳型微球;(c)灌流色谱固定相;(d)整体
实验分析方法HPLC分离固定相基质的特征
由于HPLC分离过程涉及物理化学作用、流体动力カ学、热力学过程等,因而对固定相基质材料的物理化学性质有比较严格的要求。液相色谱固定相基质可分为无机氧化物、有机聚合物和无机有机杂化材料三种类型。杂化基质作为一类新型液相色谱固定相基质,近两年发展较快,但大多尚处于研究阶段。无机和有机两类基质的主要特征比
实验分析方法HPLC分离固定相基质的特征
由于HPLC分离过程涉及物理化学作用、流体动力カ学、热力学过程等,因而对固定相基质材料的物理化学性质有比较严格的要求。液相色谱固定相基质可分为无机氧化物、有机聚合物和无机有机杂化材料三种类型。杂化基质作为一类新型液相色谱固定相基质,近两年发展较快,但大多尚处于研究阶段。无机和有机两类基质的主要特征比
高效液相色谱法的固定相的分类
高效液相色谱法的固定相的分类 : (1)按固定相承受压力分:刚性固体:以二氧化硅为基质,可承受较高压力,表面可键合各种功能官能团---键合固定相,是目前应用最广泛的固定相。硬胶:主要用于离子交换色谱法和凝胶色谱法中,由聚苯乙烯与二乙烯基苯交联而成,可承受的压力较低。 (2)按孔隙深度分:表面多孔型
反相高效液相色谱的固定相是什么,流动相有什么
反相高效液相色谱的固定相是非极性溶剂,常见的固定相是十八烷基键合硅胶,流动相是极性溶剂,常见的流动相是甲醇,乙腈。反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系(正相色谱)相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基键合硅胶,
反相高效液相色谱法流动相与固定相的极性关系
根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。反之叫正相色谱。
反相键合相色谱仪固定相和流动相的选择
在反相键合相色谱仪中, C18是常用的键合固定相,水是常用的流动相弱组分,重要的是选择流动相的强组分,常用的强组分有甲醇、乙腈和四氢呋喃。反相键合相色谱仪流动相的选择规则如下:一、若样品中含有两个以下氢键作用基团(如-COOH、-NH2和-OH等)的芳香烃邻、对位或邻、间位异构体,可选用甲醇-水为流
实验室分析方法液相色谱分类及基础原理
液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中。为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如纸色谱、薄层色谱和柱液相色经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μ
液相色谱仪常见分类
液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中做相对运动时,经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程,各组分在移动速度上