液相色谱仪图谱宽峰的原因及处理办法
宽峰原因解决办法1、流动相组成变化重新制备新的流动相2、流动相流速太低调节流速3、漏液(特别是在柱子和检测器之间)见section 3。检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪音。如果必要更换密封。4、检测器设定不正确调整设定5、柱外效应影响a、柱子过载b、检测器对反应时间或池体积响应过大c、柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大d、记录仪响应时间太长a、小体积进样(例如:10ul而不是100ul)以1:10或1:100的比例稀释样品b、减少响应时间或使用更小的流通池c、使用内径为0.007-0.01的短管路d、减少响应时间6、缓冲液浓度太低增加浓度7、保护柱污染或失效更换保护柱8、色谱柱污染或失效,塔板数较低更换同样类型的色谱柱。如果新柱子可以提供对称的色谱峰,则用强溶剂冲洗旧柱子。9、柱入口塌陷打开柱入口,填补塌陷或更换柱子10、呈现两个或多个未被完全分离的物质的峰选择其它类型的色谱柱以改善分离效果11、柱......阅读全文
液相色谱仪图谱宽峰的原因及处理办法
宽峰原因解决办法1、流动相组成变化重新制备新的流动相2、流动相流速太低调节流速3、漏液(特别是在柱子和检测器之间)见section 3。检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪音。如果必要更换密封。4、检测器设定不正确调整设定5、柱外效应影响a、柱子过载b、检测器对反应时间或池体积响
液相色谱仪图谱所有的峰面积都太小的原因及处理办法
所有的峰面积都太小原因解决办法1、检测器衰减设定过高减少衰减的设定2、检测器时间常数设定太大设定较小的时间常数3、进样量太少增大进样量4、记录仪连接不当使用正确的连接
液相色谱仪图谱所有的峰面积都太大的原因及处理办法
所有的峰面积都太大原因解决办法1、检测器衰减设定过低采取较大的衰减2、进样过多减少进样量3、记录仪连接不正确正确连接记录仪
液相色谱仪图谱基线漂移的原因及处理办法
基线漂移原因解决办法1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。)控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。)使用HPLC级的溶剂,高纯度
液相色谱仪图谱分离度降低的原因及处理办法
分离度降低原因解决办法1、流动相污染或变质(引起保留时间变化)重新配置流动相2、保护柱或分析柱阻塞去掉保护柱进行分析。如果必要则更换保护柱。如果分析柱阻塞,可进行反冲。如果问题仍然存在色谱柱可能被强保留的污染物损坏,建议使用恰当的再生程序。如果问题仍然存在,进口可能阻塞了,更换入口处的筛板或更换色谱
液相色谱仪图谱基线噪音(规则的)的原因及处理办法
基线噪音(规则的)原因解决办法1、在流动相、检测器或泵中有空气流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。2、漏液见第三部分。检查管路接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换泵密封。3、流动相混合不完全用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂4、温度影响(柱温过高,检测器未
溶剂峰拉宽原因分析及处理方法
1、色谱柱安装失败。2、进样渗漏。3、进样量高。处理方法:提高汽化温度。4、分流比低。处理方法:提高分流比。5、柱温低。6、分流进样时,初始OVEN过高。处理方法:降低初始柱温,使用高沸点溶剂。7、吹扫时间过长(不分流进样)。处理方法:定义短时间的吹扫程序。
液相色谱仪图谱保留时间不断变化的原因及处理办法
保留时间不断变化原因解决办法1、流速变化重新设定流速2、泵中有气泡从泵中除去气泡3、流动相选择不恰当a、更换合适的流动相b、选择合适的混合流动相
液相色谱仪图谱基线噪音(不规则的)的原因及处理办法
基线噪音(不规则的)原因解决办法1、漏液见第三部分。检查接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换密封。检查流通池是否漏液。2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成检查流动相的组成。3、流动相各溶剂不相溶选择互溶的流动相4、检测器/记录仪电子元件的问题断开检测器和记录仪的电源,
液相色谱仪图谱额外的峰的原因
原因解决办法1、样品中有其他组份正常2、前一次进样的洗脱峰a、增加运行时间或梯度斜率b、提高流速3、空位或鬼峰a、检查流动相是否纯净b、使用流动相作为样品溶剂c、减少进样体积
宽溶剂峰原因分析及排除方法
由于柱安装不当,在进样口产生死体积:重新安装柱。2.进样技术差(进样太慢):采用快速平稳进样技术。3.进样器温度太低:提高进样器温度。4.样品溶剂与检测相互影响(二氯甲烷/ECD):更换样品溶剂。5.柱内残留样品溶剂:更换样品溶剂。6.隔垫清洗不当:调整或清洗。7.分流比不正确(分流排气流速不足):
溶剂峰拉宽原因分析
1.色谱柱安装失败;2.进样渗漏;3.进样量高 提高汽化温度;4.分流比低 提高分流比;5.柱温低;6.分流进样时,初始OVEN过高 降低初始柱温,使用高沸点溶剂;7.吹扫时间过长(不分流进样) 定义短时间的吹扫程序。
液相色谱仪图谱出现峰分叉的原因及解决方案
峰分叉原因解决办法1、保护柱或分析柱污染取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞,拆下来清洗。如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用适当的再生措施。如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。2、样品溶剂不溶于流动相改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂
液相色谱仪图谱出现峰变形的原因及解决方案
峰变形原因解决办法1、样品过载减少样品载量
液相色谱仪图谱峰拖尾程度大于晚出峰的原因及解决方案
早出的峰拖尾程度大于晚出的峰原因解决办法1、柱外效应a、调整系统连接(使用更短、内径更小的管路)b、使用小体积的流通池
液相色谱仪图谱出现峰拖尾的原因及解决方案
峰拖尾原因解决办法1、筛板阻塞a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱2、色谱柱塌陷填充色谱柱3、干扰峰a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱4、流动相PH选择错误a、调整PH值。对于碱性化合物,低PH值b、更有利于得到对称峰。5、样品与填料表面的溶化点发生反应a、加入离子对
液相色谱仪图谱出现峰前延的原因及解决方案
峰前延原因解决办法1、柱温低升高柱温2、样品溶剂选择不恰当使用流动相作为样品溶剂3、样品过载降低样品含量4、色谱柱损坏见A1、A2
H溶剂峰拉宽原因分析
色谱柱安装失败;2.进样渗漏;3.进样量高 提高汽化温度;4.流比低 提高分流比;5OVEN低;6 分流进样时,初始OVEN过高 降低初始柱温,使用高沸点溶剂;7.吹扫时间过长(不分流进样) 定义短时间的吹扫程序。
液相色谱仪图谱出现早出的峰变形的原因及解决方案
早出的峰变形原因解决办法1、样品溶剂选择不恰当a、减少进样体积b、运用低极性样品溶剂
峰拖尾原因分析及解决办法
1 衬管,色谱柱被污染或者衬管,色谱柱安装不当,存在死体积;改进方法:注射甲烷,峰若拖尾,则重新安装。2、进样器温度过高;3色谱柱柱头不平;改进方法:用金刚砂切割。4 固定相的极性指标与样品不匹配;改进方法:换匹配的柱子。5 样品流通路线中有冷井;改进方法:消除路线中的过低温度区。6衬管或色谱柱中有
色谱峰过宽原因分析及处理方法
a. 进样器的温度太低;排除方法:提高进样器的温度。b.柱子中的样品过载;排除方法:分流进样。c.气相色谱升温太慢;排除方法:改变气相色谱的升温程序。
液相色谱仪图谱酸性或碱性化合物峰拖尾的原因
酸性或碱性化合物的峰拖尾原因解决办法1、缓冲不合适a、使用浓度50-100mM的缓冲液b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液
液相色谱仪色谱曲线相关术语峰宽
峰宽(peak width)在峰两侧拐点(图1中的F、G)处所作切线与峰底相交两点间的距离(图1中的KL)。用W表示。
液相色谱仪的图谱出现怪峰
1 样品分析时峰没出完,在下一针或下下一针出现,判断办法,延长分析时间,计算可能出现的保留时间。然后调整流动相。2 连续进样,在某个位置出现忽高忽低的峰,最可能是进样针污染,清洗进样针,注意黑垢的干扰,有些样品易残留在针管里。可重新取样分析。3 定量管污染,处理方法同上。4 在死体积位置出现的小峰,
液相色谱仪的图谱出现怪峰
1 样品分析时峰没出完,在下一针或下下一针出现,判断办法,延长分析时间,计算可能出现的保留时间。然后调整流动相。2 连续进样,在某个位置出现忽高忽低的峰,最可能是进样针污染,清洗进样针,注意黑垢的干扰,有些样品易残留在针管里。可重新取样分析。3 定量管污染,处理方法同上。4 在死体积位置出现的小峰,
造成金属X衍射峰半高宽增加原因
原因:1.仪器本身就有一定宽度(仪器变宽);2.晶粒细化(大约100nm,尺寸变宽);3.由于应力影起的(应力变宽);共三个因素。消除方法:1.仪器本身就有一定宽度(仪器变宽);---可以做标准曲线扣除。3.由于应力影起的(应力变宽);--可以用退火方法(退火温度是mp的1/3)去除,你说的两种应力
PCR无扩增产物的原因及处理办法
原因: 1、模板:含有抑制物,含量低 2、Buffer对样品不合适 3、引物设计不当或者发生降解 4、反应条件:退火温度太高,延伸时间太短对策: 1、纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量 2、更换Buffer或调整浓度 3、重新设计引物(避免
液相色谱仪图谱拖尾峰严重的原因及解决方案
K’增加时,脱尾更严重原因解决办法1、二级保留效应,反相模式a、加入三乙胺(或碱性样品)b、加入乙酸(或酸性样品)c、加入盐或缓冲剂(或离子化样品)d、更换一支柱子2、二级保留效应,正相模式a、加入三乙胺(或碱性样品)b、加入乙酸(或酸性样品)c、加入水(或多官能团化合物)d、试用另一种方法3、二级
高效液相色谱仪峰型异常问题及解决办法
高效液相色谱仪峰型异常问题及解决办法 峰型问题是液相的主要问题 1、色谱图中未出峰。解决方法:系统未进样或样品分解;泵未输液或流动相使用不正确;检测器设置不正确;针对以上情况成因作相应调整即可。 2、 一个峰或几个峰是负峰。解决方法:流动相吸收本底高;进样过程中进入空气;样品组分的吸收低于流动相。
色谱峰宽的构成
色谱分析时经常会有先出来的峰就窄,后出来的就宽的情况。色谱峰宽是由很多因素构成的,每个因素影响程度不同,造成的结果也不同,谁的影响力大,就主要显示谁的作用结果。那么色谱峰宽,到底由哪几部分构成? 色谱峰宽由两部分构成: 一、对称峰宽。二、拖尾峰宽。所谓对称峰宽,就是指这种峰宽不会造成峰型不