HPLC是做什么的?原理?操作方法?

HPLC是高效液相色谱,英文全称是High Performance Liquid Chromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途:高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。原理:高效液相色谱以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析和分离。操作方法:如下图所示,溶剂贮器中的流动相被泵吸入,经梯度控制器按一定的梯度进行混合然后输出,经测其压力和流量,导入进样阀(器)经保护柱、分离柱后到检测器检测,由数据处理设备处理数据或记录仪记录色谱图,馏分收集器收集馏分,废......阅读全文

HPLC法对猪体内金霉素的残留检测

 【摘要】  目的  了解饲喂金霉素后药物在猪体内的残留情况。方法  应用高效液相色谱仪测定猪部分组织中金霉素的含量,根据残留量,确定临床应用金霉素的休药期。结果  HPLC法稳定性好,测量精度高,最高回收率达87.8%,最低回收率达53.6%。结论  连续5天以600ppm剂量饲喂猪的安全休药期为

HPLC柱在多功能毒品分析中的应用

在欧美许多国家,毒品肆虐,并日益侵蚀青少年群体。值得忧虑的是,世界上有许多人至今对毒品的危害还缺乏足够的认识。现代分析技术应用于毒品检验,为毒品案件的查缉和制贩毒人员的定罪、量刑提供了重要的刑事科学依据。毒品检验方法有免疫分析法、气相色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、联用分析技术等等。其中高效液

高效液相色谱(HPLC)柱子的清洗和再生

1. 柱子的清洗 即使样品和流动相已做过前处理,也仍难以完成避免柱子受到污染,因此必须对柱子行清洗。清洗应定期进行,如果在短期内分析许多样品,则以每日清洗一次为宜,至少也应一周一次,防止有太多的杂质在柱上堆积。 反相柱的常规洗涤办法是:分别取甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱体积(既对于一根4

提高HPLC检测限、溶剂脱气等的几点经验

仅针对用反相碳十八烷基硅烷化填料的柱子和紫外检测器的HPLC通常在理论教学时,HPLC分析总要求实用HPLC纯的试剂、用孔径比填料粒度小的微孔滤膜过滤流动相、最好用真空或氦气脱气。实际上,按照不同的精确度,有时候并不需要做得那么严格。这里首先申明,虽然许多做法是我的经验,但请读到这篇文章的朋友自己做

常见的HPLC检测器有哪几种

高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。  紫外检测器  该检测器适用于对紫外光或可见光有吸收性能样品的检测。其特点:使用面广、灵敏度高(检测下限为10-10g/ml)、对温度和流速变化不敏感、线性范围宽、可检测梯度溶液洗脱的样品。  示差折光检测器  这一系统通用性强

参加国际学术会议HPLC-2014观感

  刘虎威  北京大学化学与分子工程学院,北京 100871  1. 会议概况  第41届国际高效液相分离及相关技术学术会议(HPLC2014)于2014年5月10日至15日在美国新奥尔良召开,会议主席是北卡罗来纳大学的J. Michael Ramsey教授。这是从1973年开始举办的国际

从HPLC色谱柱上去除样品残余物

因为样品中经常会含有能够吸附在色谱柱固定相上的杂质化合物,所以应该经常对色谱柱进行清洗或冲洗。当色谱柱在多次进样后显示出柱效降低时,有必要采用适当的流动相对色谱柱进行处理,冲洗除去吸附在固定相上的污染物和样品残余物。 方法如下: ●将色谱柱从系统上取下,反向连接到输液泵上。色谱柱出口不要连接到检

HPLC法测定保健食品中芦荟的含量

1 范围本标准规定了保健食品中芦荟苷的高效液相色谱测定方法。本标准适用于以芦荟和加工产品为原料的保健食品中芦荟的含量测定。2 原理以甲醇和水(55+45)为溶剂,用高效液相色谱c18柱分离,在293nm波长下检测。芦荟苷的保留时间为定性,峰面积为定量。3 试剂和材料除另有说明外本方法所用试剂为分析纯

提高HPLC检测限、溶剂脱气等的几点经验

仅针对用反相碳十八烷基硅烷化填料的柱子和紫外检测器的HPLC通常在理论教学时,HPLC分析总要求实用HPLC纯的试剂、用孔径比填料粒度小的微孔滤膜过滤流动相、zui好用真空或氦气脱气。实际上,按照不同的精确度,有时候并不需要做得那么严格。这里首先申明,虽然许多做法是我的经验,但请读到这篇文章的朋友自

聚焦制药行业-福立HPLC-5090亮相CPHI

  分析测试百科网讯 2020年12月16-18日,第二十届世界制药原料中国展(CPhI China 2020)在上海新国际博览中心开幕。浙江福立分析仪器股份有限公司携新品HPLC 5090亮相CPhI China 2020,为制药行业的用户带来稳定出色的产品和丰富的应用解决方案。福立展台  HPL

用于HPLC分析的超纯水——超纯水之角色

      糖分析是HPLC的典型应用之一,它广泛的应用在许多测试中用以确定膜的性能,一方面可以通过糖分析来确定膜去除糖分子的能力,另一方面也可检测膜固定化酶的活性。在分析中,目前通常采用薄层色谱法(TLC)、气体色谱法(GC)以及液相色谱法(HPLC)进行糖分析。尤其是当混合物中包含几种必须要分离

HPLC常见的六个故障解决方法!

  一、液相色谱仪峰分叉怎么回事?   造成这种情况的原因一般是色谱柱被污染,或柱头填料塌陷导致的。   对于*种情况,先用纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子

AKTA快速蛋白分离系统和HPLC-的优劣比较

HPLC 优点:高压 速度快 分析精度高 所需样本量少,主要用于分析 纯化多肽类缺点:柱子较贵 有些需要用乙氰甲醇等有毒有害试剂 不能或只能纯化 很小量的蛋白AKTA 系统 优点: 中低压 容易放大 可大规模纯化蛋白类 常规只用无机盐类试剂 可配备各种介质纯化不同蛋白 可自己灌胶 费用较少缺点:分析

土霉素的高效液相色谱HPLC检测方案

简介:高效液相色谱HPLC检测土霉素的方法,首页要了解土霉素是什么和分子式等,然后通过制定高效液相色谱检测方案,最后通过仪器与试剂等硬性条件进行土霉素检测。【土霉素】土霉素:抗菌谱和应用与四环素相同。本品对肠道感染,立克次体病,包括流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、落基山热、恙虫病和Q热,支原体属感染

高效液相色谱仪(HPLC)的品牌都有哪些

惠普公司的液相就是我们所熟悉的安捷伦(Agilent)液相,安捷伦公司99年从惠普中单独分离出来,所以我们现在看见的安捷伦液相型号都是HP1100、HP1200、HP1260等等其它用得比较多的品牌有:日本岛津(SHIMADZU)液相,美国沃特世(Waters)液相,其中以Waters液相最好,价钱

安捷伦在HPLC-2025上展示新品与创新成果

  2025年6月16日,北京——安捷伦科技公司在HPLC 2025上全球首发了新一代 Hybrid Multisampler,并重点展示新型液相色谱单四极杆质谱仪。这些新产品旨在提高实验室效率,同时为研究人员带来更为出色的分析结果。现场观众可深入了解这些产品如何简化运营并提升分析性能。HPLC 2

HPLC时出来峰不尖可能造成的原因

首先是浓度,浓度过大造成平头峰,稀释浓度,第二个是流速,流速过慢了出风慢,不尖锐,第三个是预柱问题,这个不好说,最好换一个,不太贵,第四个是流动相洗脱效果不好,洗脱不下来,建议换配比或者换流动相还有温度、湿度等,这些如果差异太大也会影响峰型变化。

简述hplc级流动相使用前如何处理

  一、基质(担体)  HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质,也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝。无机物基质刚性大,在溶剂中不容易膨胀。有机聚合物基质主要有交联苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小、易压缩,溶剂或溶质容易渗入有机基质中,导致填料颗粒膨胀,结果减少

肉桂酸的纯度检查方法介绍HPLC法

HPLC法分别在270nm及254nm波长下进行检查。检测波长:270nm色谱条件色谱柱:C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.5%磷酸溶液(30∶70);流速:1.0mL.min-1;柱温:室温;试验结果:肉桂酸纯度为99.0%,符合规定。检测波长:254nm色谱条件

实验分析方法HPLC分离常用固定相基质介绍

1.硅胶微粒硅胶及键合硅胶是开发最早、研究深入、应用广泛的HPLC固定相。未改性硅胶表面学性质随制备和处理条件不同而変化。如图2所示,水合硅胶的表面一般存在三种类型的硅羟基,热处理温度高于800℃时,硅胶表面的硅羟基(—SiOH)表层大部分不再存在,在HPLC中已无使用价值。用于进行键合反应制备改性

HPLC中,分离度(R)计算公式是什么

R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)tR2:相邻两峰中后一峰的保留时间;tR1:相邻两峰中前一峰的保留时间;W1、W2:此相邻两峰的峰宽

HPLC中,分离度(R)计算公式是什么

R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)tR2:相邻两峰中后一峰的保留时间;tR1:相邻两峰中前一峰的保留时间;W1、W2:此相邻两峰的峰宽

HPLC法对猪体内金霉素的残留检测

 【摘要】  目的  了解饲喂金霉素后药物在猪体内的残留情况。方法  应用高效液相色谱仪测定猪部分组织中金霉素的含量,根据残留量,确定临床应用金霉素的休药期。结果  HPLC法稳定性好,测量精度高,最高回收率达87.8%,最低回收率达53.6%。结论  连续5天以600ppm剂量饲喂猪的安全休药期为

HPLC常见问题和解决方法压力波动

  压力波动原 因解决方法1、泵中有气体1、a、溶剂脱气b、从泵中除去气体2、单向阀损坏2、更换单向阀3、泵密封损坏3、更换泵密封4、脱气不充分4、a、溶剂脱气b、改变脱气方法(使用在线脱气法等)5、系统漏液5、确定漏液位置并维修6、使用梯度洗脱6、由于流动相粘度的变化引起的压力波动

HPLC高压泵产品的多元化发展

 产品的生命力在于市场的需求。如今的市场需求正是要求产品各有特色或特点,做到与众不同;正是以这一点,造就了液相色谱仪高压泵产品的多元化趋势。它的多元性主要体现在泵输液流速不同及系统耐压的要求不同。    随着HPLC的高压恒流泵技术的不断成熟,已在分析仪器领域得到广泛应用。根据应用不同,需要配备不同

默克密理博HPLC溶剂现货大促销

订货号产品名称中文名称包装市场指导价(RMB)1.00030.4004Acetonitrile gradient grade LiChrosolv® Reag. Ph EurHPLC 乙腈4x4 L22001.06007.4004Methanol gradient gr

液相色谱HPLC检测器及检测限

在定义检测器灵敏度时,只考虑了样品响应信号的大小,并没有考虑检测器的噪声。当检测器噪声与响应信号大小相近时,两者就无法区分。而且对于某些检测器,其输出信号要经过放大后才能输出到记录仪。电子放大器几乎可以把一个信号放大到任意倍数,这样似乎可以任意提高检测器的灵敏度。其实不然,因为在放大信号时也同时放大

高效液相色谱法HPLC实验结果的分析

高效液相色谱和气相色谱法(包括测定方法和计算方法)的定性和定量分析是相同的。定性分析采用纯物质控制的色谱鉴别方法,非色谱鉴别方法结合化学分析或其他仪器分析方法采集组分;定量分析采用峰高或峰面积内标法、外标法或归一化法进行定量,并与计算机结合作为现代分析方法对。定性分析色谱方法的定性分析的目的是确定每

大连依利特携多款HPLC亮相BCEIA-2017

  分析测试百科网讯 2017年10月10日,第十七届北京分析测试学术报告会暨展览会(BCEIA 2017)在北京国家会议中心开幕。大连依利特分析仪器有限公司携多款高效液相色谱仪参展。  大连依利特分析仪器有限公司展台  P3500/P3700半制备型/制备型高效液相色谱仪  P3500高压恒流泵是

高效液相HPLC溶剂的选择及使用(一)

高效液相色谱法又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对