关于小鼠胚胎干细胞的研究情况

自1981年Evans和Kaufman首次成功分离小鼠ES细胞,国内外研究人员已在仓鼠、大鼠、兔、猪、牛、绵羊、山羊、水貂、恒河猴、美洲长尾猴以及人类都分离获得了ES细胞,而且已经证明小鼠ES细胞可以分化为心肌细胞、造血细胞、卵黄囊细胞、骨髓细胞、平滑肌细胞、脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、内皮细胞、黑色素细胞、神经细胞、神经胶质细胞、少突胶质细胞、淋巴细胞、胰岛细胞、滋养层细胞等。人类ES细胞也可以分化为滋养层细胞、神经细胞、神经胶质细胞、造血细胞、心肌细胞等。ES细胞不仅可以作为体外研究细胞分化和发育调控机制的模型,而且还可以作为一种载体,将通过同源重组产生的基因组的定点突变导入个体,更重要的是,ES细胞将会给人类移植医学带来一场革命。 进一步说,胚胎干细胞(ES细胞)是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性,能分化出成体动物的所有组织和器官,包括生殖细胞。研究和利用ES细胞是当前生物工程领域的核心问题之一。ES细胞的研......阅读全文

关于小鼠胚胎干细胞的研究情况

  自1981年Evans和Kaufman首次成功分离小鼠ES细胞,国内外研究人员已在仓鼠、大鼠、兔、猪、牛、绵羊、山羊、水貂、恒河猴、美洲长尾猴以及人类都分离获得了ES细胞,而且已经证明小鼠ES细胞可以分化为心肌细胞、造血细胞、卵黄囊细胞、骨髓细胞、平滑肌细胞、脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、内皮细

关于胚胎干细胞的研究进展—小鼠ES细胞的介绍

  小鼠ES细胞的分离方法基本成熟,且已广泛应用于生命科学研究的各个领域。1981年Evans首次分离得到小鼠ES细胞,他以手术切除受精后2.5 d小鼠卵巢并结合激素注射干扰子宫环境,从而使胚胎延迟着床,再回收胚胎,将其体外培养于STO细胞饲养层上,结果得到了小鼠ES细胞系。Martin G R以免

小鼠胚胎干细胞的培养

实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巯基乙醇(55Mm) 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮(20μM) 腐

小鼠胚胎干细胞的培养

完全培养基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巯基乙醇(GIBCO 21985); 1

小鼠胚胎干细胞培养实验

体外分化法             实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存

小鼠胚胎干细胞培养实验

体外分化法             实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存

小鼠胚胎干细胞培养实验

实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存在的情况下扩增(第4步)并最终分化在第5步。细胞全程培养在37℃,5%CO2,100%湿度条件下。一般体外诱导向神经细胞方向分化,也可以采用低浓度的RA进

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤

   一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态   培养基   细胞复苏   冻存细胞   明胶包被   细胞传代    体外分化   培养基   包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)   体外分化方法   注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤

1、一般培养——保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代 2 、体外分化 培养基:包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片) 体外分化方法 注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的pr

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(四)

第3步--ITSFn培养基在最少量培养基中选择神经前体细胞1.在胚状体接种在组织培养皿一天后将培养基换成ITSFn培养基2.并非所有胚状体在这一时期都已经发生粘附,因此在移除培养基时要小心谨慎以使大部分胚状体留在培养皿内。3.保持细胞在ITSFn中培养大约10天,根据需要更换培养基--大约每隔一天。

人类胚胎干细胞移植恢复小鼠记忆能力

  近日,复旦大学张素春团队首次将人类胚胎干细胞成功转化成特定的神经细胞,并将转化后的中间细胞注入到小鼠大脑中,使已丧失学习和记忆功能的小鼠恢复了学习和记忆能力。近日,相关研究成果发表于最新一期的学术期刊《自然—生物技术》。业内专家认为,该成果对治愈各种神经功能缺陷疾病有重大意义。   据介绍,张

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(二)

Geltin(明胶)包被准备500ml 0.1%geltin溶液1.将0.5 g明胶溶解在500ml无钙镁的PBS中(50-65℃水浴15~30分钟)。2.最好在溶液没有冷却的情况下通过0.22 μm滤膜过滤,贮存在4℃。包被培养板或培养皿1.加入足量的明胶溶液覆盖培养平面(15 cm培养皿加2ml

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(一)

一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)体外分化方法注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol,需要用专用

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(三)

ITSFn and N3(分化培养基):配制一20×不含DMEM/F12的溶液。分装在15ml 离心管中,(稀释为1×,ITSFn 7.05ml,N3 12.55ml),0.2μm滤膜过滤,贮存在-20℃。将该溶液加入DMEM/F12中制备培养基,贮存于4℃。 贮存液          DMEM(高

小鼠胚胎干细胞培养实验——体外分化法

小鼠胚胎干细胞培养可以:(1)细胞保种;(2)用于干细胞研究;(3)用于细胞生理学、形态学等研究;(4)动物克隆。实验方法原理胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存在的情况下扩增(第4步)并最终分化在第5步

小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞系首次建立

  中国科学院上海生科院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组和徐国良研究组在一项合作研究中,首次建立了来自孤雄囊胚的单倍体胚胎干细胞系,而这些细胞保持了一定水平的雄性印记,并进一步验证这些细胞能够代替精子在注入卵母细胞后产生健康的小鼠。相关研究成果今天在线发表于国际著名学术期刊《细胞》(Cell)

关于胚胎干细胞的研究进展—仓鼠ES细胞的介绍

  Doetschman等从叙利亚金黄仓鼠(mesocricetus auratus)囊胚建立了4个ES细胞系,都具有正常的核型和44条染色体,1个为XX型,3个为XY型,它们能够在PMEF(primarymouse embryonic fibroblast)饲养层上增殖并保持未分化状态,悬浮培养时

关于胚胎干细胞的研究进展—猪ES细胞的介绍

  Piedrahita J A等采用STO、猪成纤维细胞和猪子宫上皮细胞作为饲养层,以DMEM为基础培养液,从猪囊胚ICM分离ES细胞,发现猪囊胚ICM在STO或PMEF饲养层上可以附着增殖,而在猪胎儿成纤维细胞饲养层上虽可附着但增殖甚微,传不过4代即发生死亡。Evans等将6天~7天猪囊胚直接培

关于胚胎干细胞的研究进展—牛ES细胞的介绍

  Saito等在加有LIF的培养基中对牛ICM进行培养,分离得到牛ES细胞并进行传代。Sims等使用与一般ES细胞分离完全不同的低密度培养法,使用BRL(buffalo rat liver)条件培养基并添加亚硒酸钠、胰岛素、运铁蛋白和50 mL/L胎牛血清,培养6 d~10 d,得到15个ES细胞

关于胚胎干细胞的研究进展—兔ES细胞的介绍

  Graves K H等从兔子附植前囊胚分离得到ES细胞,并进行了初步鉴定,证明它们具有在饲养层上保持未分化状态的增殖能力,体外传代培养1年以上,仍具有正常的核型,且能形成包含三胚层分化物的胚体。之后,Niemann等以PMEF为饲养层,建立了9个兔ES细胞系。Schoonjans L等将兔ES细

关于胚胎干细胞的研究进展—羊ES细胞的介绍

  Handyside等以绵羊皮肤成纤维细胞和胎儿成纤维细胞作饲养层,从7日龄~8日龄绵羊囊胚分离类ES细胞,结果得到内胚层样细胞而无ES细胞出现。Tsuchiya用免疫外科法分离8 天~9 天绵羊囊胚ICM,培养于STO细胞饲养层上,得到2个类ES细胞系,传至4代。Tillmann等用胎牛肝成纤维

关于胚胎干细胞的研究进展—水貂ES细胞的介绍

  Sukoyan 等从桑椹胚、囊胚和 ICM 建立了8个水貂ES细胞系,其中4个为XX 型,4个为XY型。源于桑椹胚和ICM的ES细胞有2/3其X染色体处于激活状态,而70%~100%的源于囊胚的ES细胞其一条X染色体处于失活状态。在源于桑椹胚和ICM的ES细胞中,XX基因型细胞的G6PD(glu

关于胚胎干细胞的研究进展—大鼠ES细胞的介绍

  Iannaccone P M等从大鼠PVG近交系分离克隆大鼠ES细胞系-RESC-01,该细胞系对SSEA-1和AKP呈阳性,在大鼠胎儿成纤维细胞饲养层上能很好的增殖,在体内环境能分化形成多种细胞类型。RESC-01细胞系在体外悬浮培养时形成的胚体出现有节律的收缩运动,将其注入囊胚并移植假孕母鼠

小鼠胚胎干细胞向神经干细胞的定向诱导分化

实验概要小鼠胚胎干细胞向神经干细胞的定向诱导分化主要试剂无菌水、0.1%明胶、DPBS、0.05%Tripsin、fibronection、Laminin、细胞基础培养液、N2B27培养液、mES培养液C、小鼠EB培养基、神经干细胞培养液(NSC培养液)主要设备35 mm、100 mm培养皿、12孔

胚胎干细胞的发现与研究

1964年:刘易斯·克莱因史密斯和小巴里·皮尔斯从畸胎瘤中分离出单一类型的细胞,畸胎瘤是一种现在已知的来源于生殖细胞的肿瘤。 这些从畸胎瘤中分离出来的细胞作为干细胞在细胞培养中复制和生长,现在被称为胚胎癌细胞(EC)。虽然形态学和分化潜能(多能性)的相似性导致了使用胚胎癌细胞作为小鼠早期发育的体外模

胚胎干细胞的研究及应用

1999年底,在美国《Science》(《科学》杂志)公布的年度世界十大科学成果评选中,“干细胞研究的新发现”荣登十大科学成果之首,而举世瞩目的、耗资巨大的人类基因组计划只居第二位,足见干细胞研究的重要性。ES细胞技术是一个发展空间极为广阔的研究领域,很多亟待解决的问题,将成为当前乃至未来人们攻坚的

人类胚胎干细胞研究意义

  早在1970年Martin Evans首次从小鼠胚囊中分离出小鼠胚胎干细胞,小鼠胚胎干细胞就可以成功地在体外进行培养。人的胚胎干细胞的体外培养在1998年由美国科学家培养成功。  研究证实:分离的小鼠胚胎干细胞在体外可以分化成各种细胞,包括神经细胞,造血干细胞(血细胞的前体)和心肌细胞。令人惊奇

关于胚胎干细胞的基本介绍

  胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESCs,简称ES、EK或ESC细胞)是早期胚胎(原肠胚期之前)或原始性腺中分离出来的一类细胞,它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境,ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。  胚胎干细胞研究在美国一

-胚胎干细胞的研究前景:悬而未决

  在4月一个阳光灿烂的日子,成千上万的棒球迷组成浩浩荡荡的队伍,从Jonathan Thomas的办公室窗前蜂拥而过,朝着美国电话电报球场(AT&T Park)进发,去观看令人激动非凡的2014赛季旧金山巨人队的第一场主场比赛。Thomas在站立式办公桌前背对着窗户工作,但此起彼伏的欢呼喝彩声不绝

亚太唯一突变小鼠胚胎干细胞库落户苏大

  目前,英国剑桥大学威康信托桑格研究所赠送的41万株突变小鼠胚胎干细胞,越过重洋,成功落户苏州大学剑桥—苏大基因组资源中心,该中心由此成为亚太地区仅有的一个突变小鼠胚胎干细胞资源库。  突变小鼠胚胎干细胞是由桑格研究所领导的欧美联盟共同研发,全球仅有4份,其中3份分别在英国桑格研究所、德国和美国,